Descripción del proyecto
LA INSEMINACION ARTIFICIAL (IA) ES UNA DE LAS PRINCIPALES TECNOLOGIAS REPRODUCTIVAS UTILIZADAS EN LAS EXPLOTACIONES GANADERAS. EL ESTUDIO DE LA CALIDAD SEMINAL SE CONSIDERA UNA HERRAMIENTA FUNDAMENTAL PARA LA SELECCION DE MACHOS Y EYACULADOS PARA LA REPRODUCCION. UN PARAMETRO IMPORTANTE DE CALIDAD SEMINAL ES EL ESTUDIO DE LA MORFOLOGIA ESPERMATICA, QUE SE HA RELACIONADO CON LA FERTILIDAD EN ALGUNAS ESPECIES. LOS SISTEMAS CASMA (ANALISIS DE LA MORFOMETRIA ESPERMATICA ASISTIDA POR ORDENADOR) SE DESARROLLARON PARA REDUCIR LA SUBJETIVIDAD DE LA EVALUACION MORFOLOGICA. LOS PRINCIPALES LIMITANTES DE ESTA TECNICA, QUE TRATARAN DE RESOLVERSE EN ESTE PROYECTO, INCLUYEN QUE REQUIERE MUCHO TIEMPO, LOS RESULTADOS SON VARIABLES EN FUNCION DE NUMEROSOS FACTORES Y QUE RESULTA DIFICIL CUANTIFICAR EL ACROSOMA EN ALGUNAS ESPECIES. ASI, EL OBJETIVO GENERAL DE ESTE PROYECTO ES EL DESARROLLO Y APLICACION DE NUEVOS METODOS PARA EL ANALISIS MORFOMETRICO DEL NUCLEO Y EL ACROSOMA ESPERMATICOS EN RUMIANTES. PARA LA CONSECUCION DE ESTE OBJETIVO GENERAL SE PROPONEN LOS SIGUIENTES OBJETIVOS ESPECIFICOS: EN EL PRIMER OBJETIVO SE ABORDARA EL DESARROLLO DE NUEVOS METODOS DE CASMA PARA EL ESTUDIO DE LA MORFOMETRIA DEL NUCLEO Y ACROSOMA ESPERMATICO EN RUMIANTES. EL NUEVO METODO PARA EL ANALISIS MORFOMETRICO DEL NUCLEO ESPERMATICO SE BASARA EN LA UTILIZACION DE LA MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA Y UN SOFTWARE LIBRE DE ANALISIS DE IMAGEN. LAS PRINCIPALES VENTAJAS DEL MISMO SERAN QUE PERMITIRA AUTOMATIZAR EL ESTUDIO MORFOMETRICO Y QUE SE REDUCIRA EL PROCESADO DE LAS MUESTRAS Y LA VARIABILIDAD AL PODER REALIZARSE SOBRE MUESTRAS NO TEÑIDAS EN DIFERENTES ESTADOS FISICOS (FRESCO, EXTENDIDO, FIJADO) CON GRAN PRECISION. EN EL DESARROLLO DEL METODO PARA EL ESTUDIO MORFOMETRICO DEL ACROSOMA SE REALIZARAN MODIFICACIONES EN LA OPTICA DEL MICROSCOPIO QUE PERMITAN AUMENTAR EL CONTRASTE DEL ACROSOMA CON EL RESTO DE LA CABEZA Y SU CAPTURA CON UN SISTEMA CASMA COMERCIAL. EN AMBOS CASOS SE ESTANDARIZARAN LAS CONDICIONES DE ANALISIS Y PREPARACION DE LAS MUESTRAS PARA VARIAS ESPECIES (OVINO, CAPRINO, VACUNO Y PORCINO). DENTRO DE ESTE OBJETIVO SE ABORDARA TAMBIEN EL ESTUDIO DEL EFECTO DE LAS DIFERENTES ETAPAS DE PROCESADO DE LA MUESTRAS (SECADO, TIPO DE FIJACION, ETC.) SOBRE LOS PARAMETROS MORFOMETRICOS DEL NUCLEO ESPERMATICO UTILIZANDO EL NUEVO METODO CASMA. EN EL SEGUNDO OBJETIVO SE APLICARA LOS NUEVOS METODOS MORFOMETRICOS DEL ESPERMATOZOIDE EN LA COMPARACION DE LA MORFOMETRIA ESPERMATICA ENTRE ESPECIES DE ARTIODACTILOS DOMESTICOS Y EN EL ESTUDIO DE LA RELACION ENTRE LA MORFOMETRIA ESPERMATICA CON LA FERTILIDAD/FRAGMENTACION DEL ADN ESPERMATICO EN MORUECO. EN ESTE OBJETIVO SE ABORDARA LA UTILIZACION DE LOS NUEVOS METODOS DE ANALISIS MORFOMETRICO EN DOS ESTUDIOS DIFERENTES. EN EL PRIMERO SE COMPARARAN LAS MEDIDAS MORFOMETICAS DE LOS ESPERMATOZOIDES DE MORUECO, MACHO CABRIO, TORO Y CERDO. ESTA COMPARACION NO HA PODIDO REALIZARSE CON ANTERIORIDAD PORQUE LOS ESPERMATOZOIDES DE CADA ESPECIE INCORPORAN LOS COLORANTES DE MANERA DISPAR, Y EL METODO DE TINCION INFLUYE EN LOS RESULTADOS MORFOMETRICOS. LA UTILIZACION DE MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA PERMITIRA OBVIAR LA TINCION Y REALIZAR COMPARACIONES ENTRE ESPECIES. EN UN SEGUNDO ESTUDIO SE RECOGERAN MUESTRAS DE SEMEN DE MORUECO DESTINADO A LA IA PARA ANALIZAR LA RELACION ENTRE LA MORFOMETRIA DEL NUCLEO Y EL ACROSOMA Y LA FERTILIDAD Y ENTRE LA MORFOMETRIA E INTENSIDAD DE FLUORESCENCIA DEL NUCLEO Y EL GRADO DE FRAGMENTACION DEL ADN ESPERMATICO. UMIANTES\FRAGMENTACION DE ADN\ASMA\FERTILIDAD\ACROSOMA\MORFOMETRIA ESPERMATICA\CALIDAD ESPERMATICA\ESPERMATOZOIDES