NUEVOS ENFOQUES BIOTECNOLOGICOS PARA LA MEJORA RACIONAL DE LA PRODUCCION DE TAXA...
NUEVOS ENFOQUES BIOTECNOLOGICOS PARA LA MEJORA RACIONAL DE LA PRODUCCION DE TAXANOS EN CULTIVOS DE CELULAS VEGETALES
UNO DE LOS PRINCIPALES RETOS ACTUALES DE LA BIOTECNOLOGIA VEGETAL ES LA PRODUCCION DE METABOLITOS SECUNDARIOS DE ALTO VALOR AÑADIDO. EN ESTE CONTEXTO, EL PACLITAXEL (PX) Y OTROS TAXANOS UTILIZADOS PARA LA SEMISINTESIS DE ANALOGOS,...
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Descripción del proyecto
UNO DE LOS PRINCIPALES RETOS ACTUALES DE LA BIOTECNOLOGIA VEGETAL ES LA PRODUCCION DE METABOLITOS SECUNDARIOS DE ALTO VALOR AÑADIDO. EN ESTE CONTEXTO, EL PACLITAXEL (PX) Y OTROS TAXANOS UTILIZADOS PARA LA SEMISINTESIS DE ANALOGOS, CONSTITUYEN UNA RELEVANTE DIANA BIOTECNOLOGICA. EN ANTERIORES PROYECTOS, NUESTRO GRUPO HA INVESTIGADO LA PRODUCCION IN VITRO DE ESTOS COMPUESTOS Y MEDIANTE PROCEDIMIENTOS EMPIRICOS DESARROLLAMOS UN SISTEMA DE CULTIVO EN 2 FASES, OPTIMO PARA LA PRODUCCION DE PX, PERO SE REQUIERE UN MEJOR CONOCIMIENTO DE LA BIOSINTESIS DE TAXANOS Y SU CONTROL. POSTERIORES APROXIMACIONES DE GENOMICA FUNCIONAL REALIZADAS EN CULTIVOS CELULARES DE TAXUS ELICITADOS, NOS HAN PERMITIDO ESTABLECER UNA BIBLIOTECA DE GENES QUE INCLUYEN GENES CONOCIDOS QUE PARTICIPAN EN LA BIOSINTESIS DE PX, NUEVOS GENES QUE ACTUARIAN COMO CANDIDATOS A ALGUNOS PASOS TODAVIA NO CONFIRMADOS DEL PROCESO Y REGULADORES MASTER (EJ. FACTORES DE TRANSCRIPCION) QUE PODRIAN ACTUAR MODULANDO EL PROCESO BIOSINTETICO. DE ESTE MODO, ACTUALMENTE PODEMOS ABORDAR DE UNA FORMA MAS RACIONAL LA MEJORA BIOTECNOLOGICA DE TAXANOS Y COMPROBAR IN VIVO EL PAPEL DE ALGUNOS DE LOS NUEVOS GENES CLONADOS. POR ELLO, NUESTRO PROPOSITO ACTUAL ES UTILIZAR NUEVAS HERRAMIENTAS CON LAS QUE MEJORAR LA PRODUCCION BIOTECNOLOGICA DE ESTOS COMPUESTOS EN LOS CULTIVOS CELULARES ELICITADOS (CCE). CREEMOS QUE LOS ESTUDIOS DE GENOMICA FUNCIONAL ASOCIADOS AL ESTUDIO DEL PERFIL METABOLICO DE NUESTROS CULTIVOS PUEDEN APORTAR NUEVA INFORMACION SOBRE DESTACADOS PROCESOS DEL METABOLISMO DE LOS TAXANOS COMO SON, LOS POSIBLES PASOS ENZIMATICOS QUE LIMITAN EL FLUJO DE CARBONO HACIA LA FORMACION DE ESTOS COMPUESTOS, LA EXISTENCIA DE SISTEMAS DE INHIBICION POR FEED-BACK U OTROS MECANISMOS DE REGULACION Y LA POSIBLE PARTICIPACION DE SISTEMAS DE TRANSPORTE/EXCRECION A NIVEL CELULAR DE LOS COMPUESTOS ESTUDIADOS. EN LOS CCE TAMBIEN SE PRETENDE PROFUNDIZAR EN EL CONOCIMIENTO DE LOS MECANISMOS DE ELICITACION CELULAR PROVOCADOS POR EL JASMONATO DE METILO (MEJA) Y OTROS ELICITORES COMO LAS CICLODEXTRINAS (CDS). LOS CONOCIMIENTOS GENERADOS PODRIAN SERVIR PARA OPTIMIZAR LA PRODUCCION BIOTECNOLOGICA DE TAXANOS Y ABRIR NUEVAS EXPECTATIVAS PARA UTILIZAR LAS TECNICAS DE INGENIERIA METABOLICA, CON EL FIN DE INCREMENTAR SU PRODUCCION, OBTENIENDO NUEVAS LINEAS CELULARES GENETICAMENTE TRANSFORMADAS QUE SOBREEXPRESEN GENES CLAVE DE ESTE PROCESO BIOSINTETICO.LOS OBJETIVOS ESPECIFICOS DE NUESTRA PROPUESTA SON:A) MEJORA DE LA PRODUCCION BIOTECNOLOGICA DE TAXANOS MEDIANTE LA OPTIMIZACION DE LOS SISTEMAS DE ELICITACION Y LIBERACION AL MEDIO DE CULTIVO UTILIZANDO MEJA/CDS Y CORONATINA/CDS.B) ESTABLECIMIENTO DE UN NUEVO SISTEMA BIOTECNOLOGICO PARA LA PRODUCCION DE TAXANOS BASADO EN LOS CULTIVOS CELULARES DE AVELLANO.C) ALCANZAR UN MEJOR CONOCIMIENTO DE LAS ENZIMAS FLIJO-LIMITANTES, REGULADORES MASTER, SISTEMAS DE TRANSPORTE, ETC. MEDIANTE EL ESTUDIO DE LOS PERFILES TRANSCRIPTOMICOS, PROTEOMICOS Y METABOLICOS EN LOS CULTIVOS CELULARES ELICITADOS EN OPTIMAS CONDICIONES.D) CONFIRMACION DEL PAPEL REGULADOR DEL GEN TB595 (DESCUBIERTO RECIENTEMENTE POR NUESTRO GRUPO) EN LA BIOSINTESIS DE TAXANOS Y DE OTROS METABOLITOS SECUNDARIOS.E) OPTIMIZACION DE LOS PROTOCOLOS PARA LA TRANSFORMACION GENETICA DE TAXUS SP. Y AVELLANO, MEDIANTE EL SISTEMA AGROBACTERIUM, CON EL PROPOSITO DE OBTENER LINEAS CELULARES INGENIERIZADAS QUE SOBRE-EXPRESEN ENZIMAS FLUJO-LIMITANTES DE LA BIOSINTESIS DE TAXANOS Y/O EL PEPTIDO REGULADOR TB595. AXANOS\CICLODEXTRINAS.\JASMONATO DE METILO\ELICITACION\CULTIVOS CELULARES VEGETALES\PACLITAXEL
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