Descripción del proyecto
LA CRECIENTE DEMANDA DE TECNOLOGIAS DIAGNOSTICAS RAPIDAS, SENSIBLES Y FIABLES PARA EL DIAGNOSTICO PRECOZ DE ENFERMEDADES ALCANZO SU PUNTO CRITICO EN LA PANDEMIA DE SARS-COV-2 EN 2020. EN ESTOS CASOS, LOS SISTEMAS NACIONALES DE SALUD PUEDEN BENEFICIARSE DE PLATAFORMAS DE DETECCION QUE DIVERSIFIQUEN O DISMINUYAN EL NUMERO DE REACTIVOS, ESTEN AUTOMATIZADOS, Y/O CONSIGAN ALTA SENSIBILIDAD A TRAVES DE ESTRATEGIAS SIMPLES Y RAPIDAS QUE SE TRADUZCAN EN UN USO MAS EFICIENTE DE LOS RECURSOS Y UNA REDUCCION EN LA CARGA LABORAL DEL PERSONAL ESPECIALIZADO. UNWRAP PRETENDE ABORDAR ESOS RETOS DESARROLLANDO NUEVAS TECNOLOGIAS DE DETECCION BASADAS EN CONVERSION ASCENDENTE DE FOTONES (UC). MIENTRAS LA FLUORESCENCIA TRADICIONAL SE BASA EN LA ABSORCION DE FOTONES Y LA REEMISION DE FOTONES DE MENOR ENERGIA, LA UC CONSISTE EN LA ABSORCION SECUENCIAL DE FOTONES DE BAJA ENERGIA Y LA EMISION DE UN NUMERO MENOR DE FOTONES DE MAYOR ENERGIA. ESTO IMPLICA QUE LAS EMISIONES UC NUNCA ESTAN CONTAMINADAS POR LA FLUORESCENCIA PROVENIENTE DE LOS AMBIENTES BIOLOGICOS (I.E. AUTOFLUORESCENCIA). ASI, LAS NANOPARTICULAS QUE EXHIBEN UC, O NANOPARTICULAS DE CONVERSION ASCENDENTE (UCNPS), PROPORCIONAN UN MEDIO PARA DETECTAR CANTIDADES MINUSCULAS DE ANALITOS ESPECIFICOS INCLUSO EN MEDIOS BIOLOGICOS COMPLEJOS. DE HECHO, LOS PRINCIPALES FACTORES QUE LIMITAN LA SENSIBILIDAD AL USARSE UCNPS EN ENSAYOS DE BIO-AFINIDAD (I.E. AQUELLOS BASADOS EN LA INTERACCION ESPECIFICA ENTRE, POR EJEMPLO, ANTIGENO/ANTICUERPO, ARN/ADN, ETC) SON I) LA CONTAMINACION DE LA SEÑAL GENERADA POR LA INTERACCION ESPECIFICA DE LA UCNP CON EL ANALITO, CON LA SEÑAL GENERADA POR LAS UCNPS ADSORBIDAS NO ESPECIFICAMENTE A LA SUPERFICIE DEL SOPORTE SOLIDO USADO PARA PARA LA DETECCION, Y II) LA ESTABILIDAD QUIMICA RELATIVAMENTE BAJA DE LAS UCNPS EN CONDICIONES USADAS HABITUALMENTE DURANTE LA BIODETECCION (E.G. BAJA CONCENTRACION DE UCNPS, CIERTOS BUFERES). A TRAVES DEL USO DE LAS UCNPS MAS MODERNAS, DESARROLLADAS POR NUESTRO GRUPO Y QUE HAN DEMOSTRADO UNA INCREIBLE ESTABILIDAD FISICO-QUIMICA Y FIABILIDAD, UNWRAP CREARA NUEVAS ETIQUETAS LUMINISCENTES QUE SERAN BIO-ACTIVAS GRACIAS A SU BIO-CONJUGACION CON MOLECULAS DE INTERES (E.G. ADN, ANTICUERPOS). SU COMBINACION CON NUEVAS ESTRATEGIAS DE DETECCION PARA ELIMINAR LA ADSORCION NO ESPECIFICA DE LAS UCNPS (COMO EL USO DE TECNICAS DE FOTOLIGACION Y LAVADOS SEVEROS, O DISEÑANDO LAS PROPIEDADES SUPERFICIALES DE LAS UCNPS Y EL SOPORTE SOLIDO USADO PARA LA DETECCION), PERMITIRA EL DESARROLLO DE BIOENSAYOS RAPIDOS, FIABLES Y ALTAMENTE SENSIBLES. CON ESTE OBJETIVO, UNWRAP SE CENTRARA EN AVANZAR AREAS CLAVE PARA ESTA NUEVA GENERACION DE TECNOLOGIAS DE DIAGNOSTICO MEDIANTE:- UNA NUEVA GENERACION DE UCNPS CON ALTA ESTABILIDAD QUIMICA Y OPTICA, RENDIMIENTO CUANTICO MEJORADO, Y FACIL CONJUGACION CON BIOMOLECULAS PARA OBTENER ETIQUETAS LUMINISCENTES BIOACTIVAS. - DESARROLLO DE ENSAYOS DE HIBRIDACION DE ADN O ARN BASADOS EN LA FOTO-LIGACION DE SONDAS DE DNA MEDIANTE USO DE HEBRAS DIANA COMO MOLDE, JUNTO CON LAVADOS SEVEROS, PARA OBTENER LIMITES DE DETECCION POR DEBAJO DEL RANGO FM. - ACTIVACION POR LUZ DE DISTINTAS AREAS DE DETECCION EN UNA SUPERFICIE PARA MULTIPLEXADO DE VARIOS ANALITOS SIMULTANEAMENTE.- NUEVAS ESTRATEGIAS DE AMPLIFICACION BASADAS EN CICLOS DE FOTO-LIGACION DE SONDAS DE DNA MEDIANTE USO DE HEBRAS DIANA COMO MOLDE Y REGENERACION DE HEBRA DIANA MOLDE MEDIANTE CALOR. - DESARROLLO DE NUEVA INSTRUMENTACION PARA LA LECTURA AUTOMATICA DE ENSAYOS BASADOS EN UCNPS. UMINISCENCIA\TIERRAS RARAS\AMPLIFICACION\MULTIPLEXADO\FOTOACTIVACION\FOTOLIGACION\BIOENSAYOS\NANOPARTICULAS DE UPCONVERSION