Descripción del proyecto
LA FORMACION DE FIBRAS DE AMILOIDES ESTA RELACIONADA CON UNA GRAN VARIEDAD DE ENFERMEDADES MORTALES DE LA ERA MODERNA, FARMACOS DISEÑADOS PARA COMBATIR DICHAS ENFERMEDADES ACTUAN EN DIFERENTES DIRECCIONES, BIEN PRODUCIENDO UNA DESAGREGACION DE LAS FIBRAS, O BIEN INHIBIENDO SU FORMACION, ENTRE OTROS, LA SELECTIVIDAD EN LOS MECANISMOS DE ACTUACION DE ESTOS FARMACOS ES CRUCIAL YA QUE TAMBIEN EXISTEN AMILOIDES DENOMINADOS FUNCIONALES, CONTRA LOS QUE LOS FARMACOS NO DEBEN DE ACTUAR, POR ELLO, EL DESARROLLO DE SISTEMAS DE MONITORIZACION DE LA ACCION DE ESTOS FARMACOS ES DE INTERES, NO SOLO PARA CONTROLAR EL PROCESO PARA UN FARMACO ESPECIFICO, SINO DE FORMA SIMULTANEA PARA DESCUBRIR NUEVOS FARMACOS, CON RESPECTO A LAS TECNICAS DE MONITORIZACION DE PROCESOS QUE IMPLIQUEN AMILOIDES, LA RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR (RMN) PUEDE PROPORCIONAR VALIOSA INFORMACION ESTRUCTURAL, SIN EMBARGO, LOS EQUIPOS DE RMN DE MAYOR CAMPO EN DISOLUCION, INCLUSO EQUIPADOS CON SONDAS FRIAS, ENCUENTRAN CIERTAS LIMITACIONES POR DOS MOTIVOS: (1) PORQUE EL PROCESO DE AGREGACION DE PROTEINAS EN LA FORMACION DE AMILOIDES NO SE PUEDE CONTROLAR EN DISOLUCION, Y (2) PORQUE EN EL PROCESO DE FORMACION DE AMILOIDES, LOS MONOMEROS EN DISOLUCION (DETECTABLES POR RMN) INICIAN UN PROCESO DE OLIGOMERIZACION HACIA ESPECIES CUYO TAMAÑO MOLECULAR LOS HACE INVISIBLES A LA TECNICA, POR ELLO, EL PROYECTO PENELOPE PRESENTA UNA ESTRATEGIA DE INMOVILIZACION DE AMILOIDES EN SUPERFICIES DE CANALES MICROFLUIDICOS PARA CONTROLAR EL PROCESO DE AGREGACION Y ASI PODER MONITORIZAR PROCESOS DE DESAGREGACION DE FIBRAS Y DE INHIBICION DE FORMACION DE AMILOIDES, PARA PODER DETECTAR LA CANTIDAD DE MONOMERO LIBERADA EN DISOLUCION SE COMBINARAN DOS TECNICAS EMPLEADAS PARA AUMENTAR LA SENSIBILIDAD DE RMN, BOBINAS DE RADIOFRECUENCIA DE DIAMETRO REDUCIDO (MICROBOBINAS) PARA AUMENTAR LA SENSIBILIDAD EN MASA, Y TECNICAS DE HIPERPOLARIZACION POR PHOTO-CIDNP PARA AUMENTAR LA SENSIBILIDAD EN CONCENTRACION, EL PRIMER PASO ES UN DESARROLLO EN LA TECNOLOGIA DADO QUE SE PRESENTA UNA NUEVA GEOMETRIA DE MICROBOBINAS DE RADIOFRECUENCIA CON PROPIEDADES DE BANDA ANCHA (SOLENOIDAL) Y CON UN AMPLIFICADOR DE SEÑAL PROXIMO A LA BOBINA CON EL FIN DE AUMENTAR LA VERSATILIDAD DE LA SONDA Y DE AUMENTAR LA SENSIBILIDAD DE LA TECNICA, RESPECTIVAMENTE, EL SISTEMA TAMBIEN SERA OPTIMIZADO PARA CONSEGUIR AUMENTOS OPTIMOS DE SEÑAL MEDIANTE PHOTO-CIDNP PARA LO QUE SE BUSCARAN NUEVOS FOTOSENSITIZADORES Y SE FOCALIZARA LA LUZ EN LA BOBINA MEDIANTE LA FABRICACION DE LENTES QUE SE SITUARAN DENTRO DEL IMAN DE RMN, EL SISTEMA FINAL COMPRENDE UN VOLUMEN TOTAL DE UNOS CUANTOS MICROLITROS, LO QUE HARA POSIBLE APROVECHAR LAS VENTAJAS DE LAS TECNICAS EN FLUJO CONTINUO SIN UN GASTO EXCESIVO DE ESTE TIPO DE MUESTRAS, PARA PONER A PUNTO EL SISTEMA, SE ABORDARA EL ESTUDIO DE LOS HETEROAMILOIDES FORMADOS POR RIPK1/RIPK3 DADA SU IMPLICACION EN PROCESOS DE MUERTE CELULAR POR NECROPTOSIS, ESTOS MECANISMOS SON ESENCIALES PARA ELIMINAR CELULAS NO VIABLES (POR EJEMPLO, INFECTADAS POR VIRUS), SIN EMBARGO, RECIENTEMENTE SE HA DETECTADO NECROPTOSIS EN SITUACIONES NO DESEADAS, COMO POR EJEMPLO EN PACIENTES CON ELA, POR ELLO, SE PONDRA A PUNTO UNA METODOLOGIA QUE PERMITA EL ENSAYO EFICIENTE DE FARMACOS CAPACES DE: (1) MANTENER LOS MONOMEROS DE RIPK1 O RIPK3 EN SU FORMA SOLUBLE, O (2) DESAGREGAR LAS FIBRAS AMILOIDES DE ESTAS PROTEINAS UNA VEZ FORMADAS PARA EVITAR LA ACTIVACION DE MUERTE CELULAR MASIVA EN SITUACIONES NO DESEADAS, RMN\MICROBOBINAS\AMILOIDES\RIPK\PHOTO-CIDNP\PDMS\QUIMICA EN SUPERFICIES\MONITORIZACION\NECROPTOSIS