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CTQ2008-03922

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INVESTIGACION DE LA NANOESTRUCTURA DE LA REGION PERIFERICA DE UN MODELO DE PROTE...

INVESTIGACION DE LA NANOESTRUCTURA DE LA REGION PERIFERICA DE UN MODELO DE PROTEINA INTEGRAL DE MEMBRANA EN ESTE PROYECTO SE PRETENDE INVESTIGAR LA ESTRUCTURA A ESCALA NANOMETRICA DE LA REGION LIPIDICA PERIFERICA O ANULAR DE LA PROTEINA INTEGRAL DE MEMBRANA LACTOSA PERMEASA (LACY) DE ESCHERICHIA COLI, SE INVESTIGARAN LAS CARACTERISTI... ver más

01/01/2008

87K€

Presupuesto del proyecto: 87K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE BARCELONA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 327

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2008-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE BARCELONA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 327

Presupuesto del proyecto 87K€

Descripción del proyecto EN ESTE PROYECTO SE PRETENDE INVESTIGAR LA ESTRUCTURA A ESCALA NANOMETRICA DE LA REGION LIPIDICA PERIFERICA O ANULAR DE LA PROTEINA INTEGRAL DE MEMBRANA LACTOSA PERMEASA (LACY) DE ESCHERICHIA COLI, SE INVESTIGARAN LAS CARACTERISTICAS TOPOGRAFICAS DE LAS MATRICES FOSFOLIPIDICAS DONDE SE RECONSTITUYE LA PROTEINA, POR MICROSCOPIA DE FUERZA ATOMICA (AFM) Y SE ESTABLECERAN SUS PROPIEDADES NANOMECANICAS MEDIANTE ESPECTROSCOPIA DE FUERZA (FS), ESTA INFORMACION, LIMITADA A LOS COMPONENTES FOSFOLIPIDICOS MAYORITARIOS DE E,COLI (FOSFATIDILETANOLAMINA, FOSFATIDILGLICEROL Y CARDIOLIPINA), PERMITIRA CONSTRUIR DIAGRAMAS DE FASE QUE INFORMARAN DE LA POSIBLE EXISTENCIA DE REGIONES SEGREGADAS DE FOSFOLIPIDOS, SE PRETENDE ESCLARECER SI ESTOS DOMINIOS SON, O NO, REQUERIDOS PARA LA INSERCION DE LACY EN LAS BICAPAS PREVIAMENTE FORMADAS, UTILIZANDO MUTANTES DE LACY CON UN UNICO TRIPTOFANO Y FOSFOLIPIDOS DERIVATIZADOS CON MARCADORES FLUORESCENTES CONVENIENTES (PIRENO) SE ESTABLECE UN PAR DONADOR-ACEPTOR QUE PERMITE APLICAR LA TECNICA DE TRANSFERENCIA DE ENERGIA POR RESONANCIA DE FLUORESCENCIA (FRET), MEDIANTE LA FRET SE ESTUDIARA LA SELECTIVIDAD DE LAS MEZCLAS BINARIAS Y TERNARIAS DE FOSFATIDILETANOLAMINA, FOSFATIDILGLICEROL Y CARDIOLIPINA, CON EL FIN DE IDENTIFICAR LA COMPOSICION Y ESTRUCTURA DE LA REGION ANULAR DE LACY, LA APLICACION DE MODELOS CONVENIENTES, BASADOS PARCIALMENTE EN DATOS DE LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE LA PROTEINA CRISTALIZADA, PERMITIRA CONOCER LA TOPOGRAFIA A ESCALA NANOMETRICA DE LOS DIFERENTES ANILLOS DE FOSFOLIPIDOS QUE PUEDEN FORMARSE EN LA REGION ANULAR, SE ABORDARA LA INTEGRACION DE LA PROTEINA EN MATRICES PLANAS MEDIANTE DOS ESTRATEGIAS: (I) RECONSTITUCION ¿IN SITU¿ SOBRE UNA BICAPA PLANA SOPORTADA (SPB) PREVIAMENTE FORMADA; Y (II) FIJACION DE LA PROTEINA SOBRE SUPERFICIES DE ORO PREVIAMENTE FUNCIONALIZADAS Y FORMACION POSTERIOR DE LA BICAPA, LAS ESTRUCTURAS RESULTANTES SERAN OBSERVADAS POR FLUORESCENCIA DE REFLEXION INTERNA TOTAL (TIRF) PARA EXPLORAR LA APLICACION DE LA FRET EN ESTAS CONDICIONES, LAS CAPAS PROTEOLIPIDICAS CONTENIENDO LACY EMBEBIDAS EN FOSFOLIPIDOS BIOMIMETICOS SERAN OBJETO DE OBSERVACION MEDIANTE AFM CON EL OBJETIVO DE ALCANZAR ALTA RESOLUCION, ESTO ES, OBSERVAR ENTIDADES UNICAS DE LACY, Y SI ES POSIBLE, SU ENTORNO ANULAR, SE CONTEMPLA ASIMISMO APLICAR LA NOVEDAD QUE REPRESENTA LA AFM DE VELOCIDAD ALTA DE RASTREO A LA MISMAS MUESTRAS EN CONDICIONES BIOMIMETICAS, Microscopia de fuerza atómica (AFM)\Transferencia de energía de resonancia p\lactosa permeasa\fosfolípidos de membrana

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