Descripción del proyecto
EN LAS PLANTAS, LAS RESPUESTAS FISIOLOGICAS QUE CONFIEREN RESISTENCIA AL ESTRES HIDRICO VIENEN MODULADAS PRINCIPALMENTE POR EL ESTADO REDOX DE LAS CELULAS Y POR HORMONAS. SIN EMBRAGO EXISTE UNA FALTA DE CONOCIMIENTOS TANTO SOBRE LA PRECISA DETERMINACION DEL ESTADO REDOX DE LAS CELULAS COMO DE LA INTERACCION ENTRE EL ESTADO REDOX DE LAS CELULAS Y HORMONAS. EN LO QUE ATAÑE AL ESTADO REDOX DE LAS CELULAS EL PUNTO CLAVE ES SU DETERMINACION REAL SIN MODIFICAR EL ESTADO DE REDUCCION-OXIDACION DE LAS CELULAS IN VIVOY EN CUANTO A LAS HORMONAS DEBEN CONOCERSE CON DETALLE LAS VARIACIONES EN LAS CONCENTRACIONES DE HORMONAS LIBRES Y CONJUGADAS ASI COMO DE LOS ENZIMAS HIDROLASAS QUE INTERVIENEN EN LA HIDROLISIS DE LAS FORMAS CONJUGADAS A LO LARGO DE UNA SITUACION DE ESTRES. PARA ESTE ESTUDIO CONTAMOS CON PLANTAS CONTROL Y VARIOS MUTANTES DE ARABIDOPSIS THALIANA TRANSFORMADOS CON UNA PROTEINA DE FLUORESCENCIA SENSORA DEL ESTADO REDOX DE LAS CELULAS EXPRESADA EN EL CITOSOL O EN LAS MITOCONDRIAS (C-ROGFP1, M-ROGFP1) LO CUAL NOS PERMITIRA DETERMINAR EN MV LAS VARIACIONES EN EL ESTADO REDOX TANTO DEL CITOSOL COMO DE LAS MITOCONDRIAS. ADEMAS, SE DISPONE DE MUTANTES DEFICIENTES EN ANTIOXIDANTES: DEFICIENTES EN ASCORBATO,(VTC2) Y GLUTATION (CAD2) TRANSFORMADOS CON RO-GFP; ASI COMO DEFICIENTES EN ABA (ABA2), JASMONATOS (AOS). EN ESTA SERIE DE PLANTAS DE ARABIDOPSIS TRANSFORMADAS, SE ESTUDIARAN A LO LARGO DE UNA SITUACION DE ESTRES HIDRICO MODERADO Y POSTERIOR RECUPERACION: (I) MARCADORES DE ESTRES TAL Y COMO SE VIENE DESARROLLANDO DE UNA MODO HABITUAL POR NUESTRO EQUIPO DE INVESTIGACION: PEROXIDACION LIPIDICA, FV/FM, INTERCAMBIO DE GASES, RELACIONES HIDRICAS DE LAS PLANTAS, HACIENDO ESPECIAL HINCAPIE EN LA CARBONILACION DE PROTEINAS Y SU POSTERIOR IDENTIFICACION; (II) VARIACIONES EN EL ESTADO REDOX DEL ASCORBATO Y GLUTATION; (III) VARIACIONES EN LAS CONCENTRACIONES ENGOGENAS DE HORMONAS LIBRES (ABA, JA, IAA) Y SUS FORMAS CONJUGADAS: (ABA-GE, JA-ME, JA-ILE). ASI MISMO SE DETERMINARAN LAS FORMAS OXIDADAS DEL ABA COMO SON EL ACIDO FASEICO Y EL DIHIDROFASEICO. LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON PLANTAS TRANSFORMADAS DE ARABIDOPSIS NOS PERMITIRAN HACER UN ESTUDIO DETALLADO DE LA INTERACCION ENTRE EL ESTADO REDOX Y HORMONAS EN LA REGULACION DE LAS RESPUESTAS DE LAS PLANTAS AL ESTRES HIDRICO Y POSTERIOR RECUPERACION.EN CONDICIONES DE CAMPO CONTINUAREMOS NUESTROS ESTUDIOS SOBRE ESTRES HIDRICO-ESTRES OXIDATIVO EN PLANTAS DE CISTUS ALBIDUS SOMETIDAS A UNA SITUACION DE SEQUIA Y POSTERIOR RECUPERACION HIDRICA. PROFUNDIZAREMOS SOBRE: (I) FACTORES QUE HAN INTERVENIDO EN LA MEMORIZACION O ACLIMATACION AL ESTRES; (II) CARBONILACION DE PROTEINAS COMO MEJOR INDICADOR DE ESTRES; (III) IDENTIFICACION DE LAS PROTEINAS EXPRESADAS Y LAS QUE SUFREN PROCESOS DE OXIDACION; (IV) ACTIVIDAD ENZIMATICA ABA 8-HIDROXLASA. LOS ESTUDIOS A REALIZAR SON INNOVADORES TANTO POR LO QUE ATAÑE A LA DETERMINACION REAL DE LAS VARIACIONES DEL ESTADO REDOX DE CITOSOL Y MITOCONDRIAS EN DISTINTOS MUTANTES DE ARABIDOPSIS COMO A LA CONTRIBUCION DE HORMONAS LIBRES Y CONJUGADAS EN LA REGULACION DE LAS RESPUESTAS DE LAS PLANTAS AL ESTRES.