EL GLIOBLASTOMA MULTIFORME (GBM) PRESENTA UNA GRAN HETEROGENEIDAD INTERTUMORAL E INTRATUMORAL CON UNA PROGRESION DRAMATICAMENTE RAPIDA Y UN RESULTADO DEFICIENTE, INCLUSO CON EL MEJOR TRATAMIENTO QUIRURGICO Y MEDICO. LAS CELULAS GB...
EL GLIOBLASTOMA MULTIFORME (GBM) PRESENTA UNA GRAN HETEROGENEIDAD INTERTUMORAL E INTRATUMORAL CON UNA PROGRESION DRAMATICAMENTE RAPIDA Y UN RESULTADO DEFICIENTE, INCLUSO CON EL MEJOR TRATAMIENTO QUIRURGICO Y MEDICO. LAS CELULAS GBM QUIESCENTES REPRESENTAN UNA FUENTE POTENCIAL DE RECURRENCIA DEL TUMOR, PERO SE SABE POCO SOBRE SUS FUNDAMENTOS MOLECULARES DEBIDO A LA FALTA DE MODELOS CEREBRALES HUMANOS FIABLES. LA INVESTIGACION DE NUEVAS TERAPIAS REQUIERE UN MODELO QUE PUEDA EMULAR DE MANERA REALISTA LA HETEROGENEIDAD PARADIGMATICA, LA PROGRESION Y LA INTERACCION NATURAL ENTRE GBM Y EL TEJIDO CEREBRAL CIRCUNDANTE. UTILIZANDO CELULAS DE GBM DE GLIOBLASTOMA DERIVADAS DE PACIENTES GENETICAMENTE MODIFICADAS MEDIANTE LA INCORPORACION DE UN CASETE LENTIVIRAL CON RFP Y CYPRIDINE LUCIFERASE JUNTO CON LA ACTIVACION ASISTIDA POR CRISPR/CAS9 DE UN REPORTERO INDUCIBLE DE HISTONE H2B-GFP (IH2B-GFP), RASTREAREMOS EL HISTORIAL DE DIVISION CELULAR Y PODREMOS CUANTIFICAR LAS CELULAS RESTANTES DESPUES DEL TRATAMIENTO QUIMIOTERAPEUTICO IN VITRO EN CELULAS VIVAS MEDIANTE LA MEDICION DE LA LUCIFERASA DE CIPRIDINA SECRETADA. USAREMOS ESTAS LINEAS DE CELULAS GBM MODIFICADAS GENETICAMENTE PARA INVADIR ORGANOIDES VASCULARIZADOS HUMANOS PARA COMPRENDER MEJOR SUS MECANISMOS INVASIVOS, SUS NICHOS Y LAS SEÑALES DEL MICROAMBIENTE DENTRO DEL TEJIDO CEREBRAL, Y SUS PERFILES DE EXPRESION GENICA TISULAR IN SITU UTILIZANDO LA TRANSCRIPTOMICA ESPACIAL VISIUM 10 X GENOMICS DEL CENTRO NACIONAL DE ANALISIS GENOMICO (CNAG).LA VASCULARIZACION DEL ORGANOIDE CEREBRAL SE PROBARA A TRAVES DE DIFERENTES ENFOQUES, MEDIANTE EL CULTIVO CONJUNTO DE IPSC CON CELULAS ENDOTELIALES DE LA VENA UMBILICAL HUMANA (HUVEC) DURANTE LA DIFERENCIACION DEL ORGANOIDE CEREBRAL, MEDIANTE LA DIFERENCIACION DE IPSC EN ORGANOIDES ENDOTELIALES Y LUEGO ENSAMBLADOS A LOS ORGANOIDES CEREBRALES Y POR EL ENSAYO CHORIALLANTOIDEO.ESTOS ASAMBLOIDES DE CEREBRO VASCULARIZADOS DE GLIOBLASTOMA HUMANO EN 3D IN VITRO PROPORCIONARAN UNA MEJOR COMPRENSION DE LA RECURRENCIA DEL GLIOBLASTOMA, LO QUE NOS PERMITIRA DISEÑAR MEJORES ESTRATEGIAS TERAPEUTICAS DESTINADAS A ACTIVAR LAS CELULAS QUIESCENTES A PROLIFERATIVAS ANTES DEL TRATAMIENTO QUIMIOTERAPEUTICO, ASI COMO BLOQUEAR LAS SEÑALES MICROAMBIENTALES QUE PERMITEN LA SUPERVIVENCIA DE LAS CELULAS QUIESCENTES RESTANTES. ORGANOIDES CEREBRALES\TRANSCRIPTOMICA\GLIOBLASTOMAver más
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