FROM THE LAB TO THE FARM: USE OF EXTRACELLULAR VESICLES FROM FOLLICULAR FLUID TO...
FROM THE LAB TO THE FARM: USE OF EXTRACELLULAR VESICLES FROM FOLLICULAR FLUID TO IMPROVE EQUINE EMBRYO PRODUCTION IN VITRO
ESPAÑA ES UNO DE LOS PAISES EUROPEOS CON MAYOR CENSO DE EQUIDOS Y LA CALIDAD GENETICA DE ALGUNAS DE NUESTRAS RAZAS COMO LA PURA RAZA ESPAÑOLA ES RECONOCIDA INTERNACIONALMENTE. EN LA ACTUALIDAD, EXISTE UN CRECIENTE INTERES A NIVEL...
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Financiación
concedida
El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto
el día 2020-01-01
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Descripción del proyecto
ESPAÑA ES UNO DE LOS PAISES EUROPEOS CON MAYOR CENSO DE EQUIDOS Y LA CALIDAD GENETICA DE ALGUNAS DE NUESTRAS RAZAS COMO LA PURA RAZA ESPAÑOLA ES RECONOCIDA INTERNACIONALMENTE. EN LA ACTUALIDAD, EXISTE UN CRECIENTE INTERES A NIVEL MUNDIAL EN EL DESARROLLO Y COMERCIALIZACION DE TECNICAS DE REPRODUCCION ASISTIDA (ART) EN CABALLOS QUE PERMITEN UNA MEJOR CONSERVACION Y DISTRIBUCION GENETICA. EL VALOR DE ALGUNOS CABALLOS PUEDE SER MUY ALTO DEBIDO A SUS CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS, RENDIMIENTO DEPORTIVO Y/O AL BAJO NUMERO DE INDIVIDUOS EXISTENTES. LA PRODUCCION DE EMBRIONES IN VITRO ES MAS RENTABLE Y EFICIENTE QUE LA PRODUCCION IN VIVO, QUE IMPLICA EL ALOJAMIENTO DE ANIMALES, ESTIMULACION HORMONAL, VISITAS DEL VETERINARIO A LA GRANJA PARA REALIZAR LA INSEMINACION ARTIFICIAL, EL SEGUIMIENTO DE CICLO, LAVADOS UTERINOS Y TRANSFERENCIA DE EMBRIONES. SIN EMBARGO, LA PRODUCCION IN VITRO DE EMBRIONES EQUINOS MEDIANTE FECUNDACION IN VITRO CONVENCIONAL (FIV) NO DA BUENOS RESULTADOS Y LA UNICA FORMA DE OBTENER EMBRIONES IN VITRO COMERCIALMENTE ES MEDIANTE INYECCION INTRACITOPLASMATICA DE ESPERMATOZOIDES O ICSI, QUE ES COSTOSA, DIFICIL DE ESTABLECER Y SU EFICIENCIA ES TODAVIA MUY MODERADA (EL PORCENTAJE DE EMBRIONES OBTENIDOS POR ICSI NO ALCANZA EL 25% DE LOS OVOCITOS INYECTADOS). ESTOS MALOS RESULTADOS PUEDEN ATRIBUIRSE EN PARTE AL HECHO DE QUE LOS MEDIOS UTILIZADOS DURANTE LA MADURACION IN VITRO (MIV) NO SE HAN DESARROLLADO ESPECIFICAMENTE PARA LOS OVOCITOS EQUINOS. UN ESTUDIO RECIENTE LLEVADO A CABO EN NUESTRO LABORATORIO HA DEMOSTRADO QUE LA COMPOSICION METABOLOMICA DE LOS MEDIOS DE MIV EQUINOS DIFIERE DE LA QUE SE ENCUENTRA DENTRO DEL FOLICULO PRE-OVULATORIO. POR ELLO, EN ESTE PROYECTO PRETENDEMOS MEJORAR LOS PROTOCOLOS DE MADURACION IN VITRO ACTUALES UTILIZADOS EN OVOCITOS EQUINOS CON EL FIN DE AUMENTAR EL NUMERO DE EMBRIONES PRODUCIDOS TRAS LA FIV CONVENCIONAL Y LA ICSI. PARA ELLO, AISLAREMOS LAS MICROVESICULAS EXTRACELULARES (MVES) DEL LIQUIDO FOLICULAR PRE-OVULATORIO DE YEGUAS OBTENIDO POR ASPIRACION TRANSVAGINAL DE OVOCITOS GUIADA POR ECOGRAFIA (OVUM PICK UP U OPU). LOS OVOCITOS EQUINOS OBTENIDOS POR OPU O DE OVARIOS POST-MORTEM SE MADURARAN IN VITRO EN PRESENCIA DE LAS MVES A DIFERENTES CONCENTRACIONES Y TIEMPOS DE INCUBACION. ADEMAS, EVALUAREMOS EL TAMAÑO Y EL ORIGEN EXOCITICO DE LAS MVES MEDIANTE NANOPARTICLE TRACKING, MICROSCOPIA ELECTRONICA Y LA EXPRESION DE TETRASPANINAS. TAMBIEN LLEVAREMOS A CABO ENSAYOS GENOMICOS, METABOLOMICOS Y PROTEOMICOS PARA DETERMINAR LA COMPOSICION DE LAS MVES. DESPUES DE LA CARACTERIZACION DE LAS MVES, EVALUAREMOS LA INTERNALIZACION DE ESTAS VESICULAS EN LOS OVOCITOS, LA MADURACION NUCLEAR Y CITOPLASMATICA, EL ENDURECIMIENTO DE LA ZONA PELUCIDA (ZP) DE LOS OVOCITOS, Y FINALMENTE EVALUAREMOS LA CAPACIDAD DE DESARROLLO DE LOS OVOCITOS DESPUES DE LA FIV CONVENCIONAL Y LA ICSI. ADEMAS, SE ANALIZARA LA EXPRESION DE GENES RELACIONADOS CON LA CALIDAD EMBRIONARIA EN LOS BLASTOCISTOS PRODUCIDOS Y SE TRANSFERIRAN LOS EMBRIONES A YEGUAS RECEPTORAS PARA EVALUAR SU CAPACIDAD DE DAR LUGAR A PREÑEZ. EN RESUMEN, EN ESTE PROYECTO PRETENDEMOS MEJORAR LOS PROTOCOLOS DE MADURACION DE LOS OVOCITOS EQUINOS, INTENTANDO IMITAR LAS CONDICIONES DEL FOLICULO CON EL FIN DE INCREMENTAR LAS TASAS DE DESARROLLO EMBRIONARIO Y LA TASA DE GESTACION A PARTIR DE EMBRIONES EQUINOS OBTENIDOS POR FIV CONVENCIONAL E ICSI. ESTOS DATOS SE TRANSFERIRAN DIRECTAMENTE A LA INDUSTRIA EQUINA PARA MEJORAR LA EFICIENCIA DE LA PRODUCCION DE EMBRIONES IN VITRO. ABALLO\MADURACION\OOCITO\VESICULAS EXTRACELULARES\REPRODUCCION ASISTIDA