Descripción del proyecto
LA FECUNDACION IN VITRO (FIV) ES UNA TECNICA EMPLEADA HOY EN DIA EN LA MAYORIA DE LAS ESPECIES ANIMALES DE INTERES ZOOTECNICO Y EN LA ESPECIE HUMANA, EN LAS DIFERENTES ESPECIES ESTUDIADAS, EL RENDIMIENTO DE LA FIV ESTA MUY POR DEBAJO DEL PORCENTAJE DE EXITO QUE SE OBTIENE EN CONDICIONES DE FECUNDACION NATURAL, PRECISAMENTE POR ESTE MOTIVO, LA TECNICA NO DEJA DE ESTAR EN CONTINUA EVOLUCION Y SER OBJETO DE INVESTIGACION PARA MEJORARLA A TODOS LOS NIVELES, DIFERENTES ESTUDIOS VAN ENCAMINADOS A INTRODUCIR CAMBIOS Y MEJORAS EN LOS MEDIOS DE CULTIVO, MANEJO DE LOS GAMETOS Y EMBRIONES QUE INTENTAN EN CIERTO MODO REPRODUCIR LAS CONDICIONES ENCONTRADAS IN VIVO, LA FECUNDACION Y EL DESARROLLO TEMPRANO DEL EMBRION TIENEN LUGAR EN UN CONDUCTO ESPECIALIZADO DENOMINANDO OVIDUCTO (TROMPA UTERINA O DE FALOPIO), EL CONOCIMIENTO DETALLADO DE LOS PROCESOS QUE ACONTECEN EN EL OVIDUCTO ES DE ESPECIAL RELEVANCIA PARA PODER ENTENDER COMO SE PRODUCE LA MADURACION DE LOS GAMETOS, TRANSPORTE DE GAMETOS Y EMBRIONES, LA FECUNDACION Y DEL DESARROLLO EMBRIONARIO TEMPRANO, EL OVIDUCTO ES RESPONSABLE DE LA SECRECION DE DIFERENTES COMPONENTES CUYA IDENTIDAD Y FUNCION NO ES DEL TODO CONOCIDA, ASI, UNA DE LAS PROTEINAS CARACTERISTICAS PRODUCIDAS POR LAS CELULAS SECRETORAS DEL EPITELIO QUE TAPIZA EL OVIDUCTO SE DENOMINA OVIDUCTINA (OVGP1), LA OVIDUCTINA JUEGA UN PAPEL IMPORTANTE EN LA FECUNDACION, BLOQUEO DE LA POLISPERMIA Y DESARROLLO EMBRIONARIO, LA POLISPERMIA ES UN PROCESO QUE SE PRODUCE DE UN MODO FRECUENTE IN VITRO EN DIFERENTES ESPECIES, ESTE HECHO CONTRASTA CON LO QUE OCURRE IN VIVO, SIENDO RESPONSABLE EN PARTE DE LA MENOR EFICIENCIA DE LA FIV, LA OVIDUCTINA JUEGA UN PAPEL CLAVE EN EL ENDURECIMIENTO DE LA ZONA PELUCIDA (ZP), ESTE ENDURECIMIENTO DE LA ZP SE OBSERVA EN LOS OVOCITOS OVIDUCTALES HECHO QUE NO SE PRODUCE EN LOS OVOCITOS OVARICOS, EN NUESTRO ESTUDIO, DEMOSTRAMOS QUE EL ENDURECIMIENTO DE LA ZP MEDIADO POR EL USO DEL FLUIDO OVIDUCTAL ES RESPONSABLE DE UN IMPORTANTE DESCENSO DE LA TASA DE POLISPERMIA, UNO DE LOS OBJETIVOS QUE NOS PLANTEAMOS EN NUESTRO PROYECTO ES LA MEJORA DE LOS MEDIOS DE CULTIVO PARA MEJORAR LA FIV; PARA ELLO, PRETENDEMOS INCLUIR OVIDUCTINA COMO UNO DE SUS COMPONENTES, ES NECESARIO PRODUCIR CANTIDADES SUFICIENTES DE ESTA PROTEINA NO SIENDO VIABLE PARA UN USO COMERCIAL O AMPLIO LA UTILIZACION DE LA OVIDUCTINA PURIFICADA DIRECTAMENTE A PARTIR DE LOS OVIDUCTOS OBTENIDOS EN MATADERO, PARA ELLO, VAMOS A PRODUCIR OVIDUCTINA BOVINA Y PORCINA RECOMBINANTE EN CELULAS DE MAMIFERO (HEK 293T Y CHO), ESTA PROTEINA RECOMBINANTE SERA UTILIZADA PARA VER SU INFLUENCIA EN LA FECUNDACION, POLISPERMIA Y DESARROLLO EMBRIONARIO, ADEMAS QUEREMOS PROFUNDIZAR EN EL MECANISMO DE ACCION DE LA OVIDUCTINA ESTUDIANDO LAS DIFERENTES GLICOFORMAS DESCRITAS PARA LA OVIDUCTINA ASI COMO ESTUDIANDO LA OVIDUCTINA RECOMBINANTE DE RATON, EL RATON PUEDE SER UN BUEN MODELO PARA ANALIZAR LA FUNCION DE LA OVIDUCTINA PUESTO QUE ES SECRETADA IGUALMENTE POR EL OVIDUCTO PERO A DIFERENCIA DE LO QUE OCURRE EN EL CERDO Y LA VACA NO SE UNE A LA ZP DE OVOCITOS DE RATON, IGUALMENTE LA COMPOSICION DE LA ZP DE RATON ES DIFERENTE A LA DE LA ZP DE VACA Y CERDO, CABE DESTACAR QUE LA OVIDUCTINA DE RATON ES UNA PROTEINA MAS LARGA QUE LA DE VACA Y CERDO, POR ELLO, QUEREMOS PRODUCIR UNA OVIDUCTINA RECOMBINANTE DE RATON ASI COMO UNA VERSION TRUNCADA PARA VER SU EFECTO SOBRE EL ENDURECIMIENTO DE LA ZP EN RATON, VACA Y CERDO ASI COMO SU EFECTO SOBRE LA FECUNDACION Y EL DESARROLLO EMBRIONARIO, OVIDUCTINA\OVGP1\OVIDUCTO\ZONA PELUCIDA\BLOQUEO DE LA POLISPERMIA\ENDURECIMIENTO\FECUNDACION\DESARROLLO EMBRIONARIO\IVF