Descripción del proyecto
LA CRIPTOSPORIDIOSIS ESTA RECONOCIDA EN NUESTRO PAIS COMO UNA DE LAS PATOLOGIAS MAS FRECUENTEMENTE IMPLICADAS EN LA ETIOLOGIA DE BROTES DE DIARREA NEONATAL EN EXPLOTACIONES DE RUMIANTES Y SU IMPORTANCIA ECONOMICA ESTA AMPLIAMENTE CONSTATADA EN NUMEROSAS PUBLICACIONES, SIN EMBARGO, LOS ESTUDIOS SOBRE LA CARACTERIZACION DE AISLADOS DE CRYPTOSPORIDIUM MEDIANTE TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR SON PRACTICAMENTE INEXISTENTES, A PESAR DE QUE ESTAS RESULTAN IMPRESCINDIBLES CUANDO SE ABORDAN ESTUDIOS SOBRE LA EPIDEMIOLOGIA DE LA ENFERMEDAD, EN EL PRESENTE TRABAJO DE INVESTIGACION, NOS PROPONEMOS PROFUNDIZAR EN EL CONOCIMIENTO DEL POLIMORFISMO DE LOS AISLADOS DE CRYPTOSPORIDIUM PRESENTES EN NUESTRO PAIS MEDIANTE UN ESTUDIO CON MARCADORES GENETICOS QUE SE HAN DEMOSTRADO DE GRAN INTERES PARA DETERMINAR EL NUMERO DE CEPAS IMPLICADAS EN LOS BROTES DE CRIPTOSPORIDIOSIS, LA POSIBLE FUENTE DE CONTAGIO O SUS REPERCUSIONES POTENCIALES EN SALUD PUBLICA, CON ESTE OBJETIVO, SE PLANTEA EN PRIMER LUGAR LA OPTIMIZACION Y PUESTA A PUNTO DE UNA TECNICA DE ANALISIS DE FRAGMENTOS PARA INVESTIGAR EL POLIMORFISMO DE VARIOS MICROSATELITES (MS) Y MINISATELITES (MN) DE CRYPTOSPORIDIUM, MEDIANTE LA COMPARACION DE DIVERSOS PROTOCOLOS DE PCR Y PRUEBAS DE SECUENCIACION PARA CONFIRMAR EL TAMAÑO DE LOS FRAGMENTOS OBTENIDOS Y LA VALIDEZ DE LA TECNICA PARA DETECTAR INFECCIONES MIXTAS POR VARIOS ALELOS DE UN MISMO LOCUS, ESTA METODOLOGIA SERA POSTERIORMENTE APLICADA, JUNTO CON DIVERSAS TECNICAS MOLECULARES UTILIZADAS CON ANTERIORIDAD POR EL EQUIPO SOLICITANTE EN LA IDENTIFICACION DE ESPECIES (PCR-RFLP Y SECUENCIACION GEN SSU SRNA) Y SUBTIPOS DEL PARASITO (PCR Y SECUENCIACION GEN GP60), PARA INVESTIGAR LA VARIABILIDAD GENETICA DE AISLADOS OBTENIDOS DE RUMIANTES CON DIARREA (TERNEROS, CORDEROS, CABRITOS) MEDIANTE UN ESTUDIO MULTILOCUS CON SEIS MARCADORES: GP60, MICROSATELITES (ML1, ML2, TP14 Y 5B12) Y MINISATELITES (MS5), EL RESULTADO COMBINADO DEL ANALISIS DE FRAGMENTOS (MS, MN) Y SECUENCIACION (GP60) DE LOS SEIS MARCADORES SERA UTILIZADO PARA DETERMINAR LOS SUBTIPOS MULTILOCUS DE C, PARVUM, LOS RESULTADOS OBTENIDOS PROPORCIONARAN INFORMACION EXHAUSTIVA SOBRE LAS CARACTERISTICAS MOLECULARES Y REPERCUSIONES ZOONOTICAS POTENCIALES DE DICHOS AISLADOS, CRYPTOSPORIDIUM\EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR\GP60\MICROSATELITES\MINISATELITES