ESTUDIO DE NUEVOS GENES IMPLICADOS EN LA NEUROGENESIS DESDE CELULAS TRONCALES NE...
ESTUDIO DE NUEVOS GENES IMPLICADOS EN LA NEUROGENESIS DESDE CELULAS TRONCALES NEURALES HUMANAS DE SUSTANCIA NEGRA, Y RECOMBINACION HOMOLOGA EN ESTAS CELULAS MEDIANTE ZF-NUCLEA
LA GENERACION DE NEURONAS DOPAMINERGICAS HUMANAS (HDAN) DE SUSTANCIA NIGRA (SN) A PARTIR DE CELULAS TRONCALES NEURALES (HNSCS) PARA SU EVENTAL USO CLINICO EN TERAPIA CELULAR SE ENFRENTA CON UNOS POCOS PROBLEMAS QUE AUN QUEDAN POR...
LA GENERACION DE NEURONAS DOPAMINERGICAS HUMANAS (HDAN) DE SUSTANCIA NIGRA (SN) A PARTIR DE CELULAS TRONCALES NEURALES (HNSCS) PARA SU EVENTAL USO CLINICO EN TERAPIA CELULAR SE ENFRENTA CON UNOS POCOS PROBLEMAS QUE AUN QUEDAN POR RESOLVER, SIENDO UNO DE LOS MAS IMPORTANTES LA ESCASA CAPACIDAD NEUROGENICA DE HNSCS DE ESA REGION (PROBLEMA QUE TAMBIEN AFECTA A CELULAS HES UNA VEZ INSTRUIDAS), ES MAS, ESTA CAPACIDAD NEUROGENICA SE PIERDE CON LA PROLIFERACION DE LAS CELULAS MADRE (PASES EN CULTIVO), LO QUE DIFICULTA LA GENERACION REPRODUCIBLE DE HDAN, EN UN ESTUDIO RECIENTE HACIENDO USO DE UNA LINEA DE HNSCS DE SN A PASE ALTO Y BAJO, ASI COMO MODIFICADAS GENETICAMENTE CON BCL-XL PARA FAVORECER LA NEUROGENESIS, HEMOS IDENTIFICADO UN CONJUNTO DE GENES (APROX, 30, AUN POR CONCRETAR) QUE, POR SU EXPRESION DIFERENCIAL, PARECEN SER RELEVANTES EN UN MOMENTO MUY TEMPRANO DE INICIACION DE LA DIFERENCIACION, ESTOS GENES, EN GENERAL, SE EXPRESAN MENOS EN MUESTRAS DE HNSCS CON POCO POTENCIAL NEUROGENICO, LA SELECCION PRELIMINAR DE GENES SE HA HECHO EN BASE A AQUELLOS QUE CAMBIAN SU EXPRESION CON LOS PASES EN CULTIVO, LOS QUE A PASE ALTO SE EXPRESAN DE FORMA DISTINTA +/- BCL-XL (LIGADOS A RESCATE DE NEUROGENESIS), Y AQUELLOS QUE IDENTIFICAN LAS MUESTRAS MAS NEUROGENICAS, POR TANTO, COMO PRIMER OBJETIVO, PRETENDEMOS AVERIGUAR LA FUNCION DE ESTOS GENES EN HNSCS, TANTO DESDE EL PUNTO DE VISTA DE MANTENIMIENTO DE CELULAS TRONCALES (¿NICHO¿), INICIACION DE NEUROGENESIS, COMO DE MADURACION DE LAS HDAN GENERADAS, EN SEGUNDO LUGAR, DESARROLLAREMOS EN NUESTRO GRUPO LA TECNOLOGIA DE NUCLEASAS ZINC-FINGER PARA AUMENTAR LA FRECUENCIA DE EVENTOS DE RECOMBINACION HOMOLOGA EN HNSCS, EL ESTUDIO A NIVEL DE CELULA UNICA DE LA DIFERENCIACION DE HNSCS DE SN SE VERIA MUY FAVORECIDO SI SE PUDIESEN MARCAR CON UNA ESPECIFICIDAD DEL 100% LAS NEURONAS CONFORME SE PROGRESA EN SU DIFERENCIACION CON SISTEMAS DEL ESTILO PROMOTOR DE UN GEN DIRIGIENDO LA EXPRESION DE UN REPORTER FLUORESCENTE (COMO EN UN ANIMAL TRANSGENICO), UNA MODIFICACION ASI NOS PERMITIRA NO SOLO IDENTIFICAR IN VITRO E IN VIVO LAS NEURONAS DURANTE SU GENERACION EN DISTINTOS ESTADIOS (CAMBIANDO EL PROMOTOR), SINO TAMBIEN PURIFICAR ESAS CELULAS (POR FACS) PARA SU ESTUDIO BIOQUIMICO O SU TRANSPLANTE EN MODELOS DE ROEDOR DE ENFERMEDAD DE PARKINSON, EL DESARROLLO DE ESTE SISTEMA DE RECOMBINACION HOMOLOGA, POR SER DIRIGIDO A UN SITIO GENICO, PERMITIRA TAMBIEN EN EL FUTURO LA MODIFICACION GENETICA DE LAS HNSCS DE UNA FORMA REGULADA Y SEGURA, APTA PARA LA CLINICA,ver más
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