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SAF2008-02536

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ESTUDIO DE LA EXPRESION DIFERENCIAL DE GENES IMPLICADOS EN EL CICLO CELULAR BETA...

ESTUDIO DE LA EXPRESION DIFERENCIAL DE GENES IMPLICADOS EN EL CICLO CELULAR BETA-PANCREATICO ASOCIADA A LA INSULITIS EXISTENTE EN LA DIABETES DE TIPO 1 (T1D). EL OBJETIVO PRINCIPAL DEL PRESENTE PROYECTO ES DETERMINAR LA RELEVANCIA DE LA CICLINA D3 Y LA CDK11 EN LA HOMEOSTASIS DE LA MASA BETA CELULAR PANCREATICA EN LA DIABETES AUTOINMUNE, MEDIANTE EL USO DE LA TECNOLOGIA DE MICROARRAYS H... ver más

01/01/2008

UDL

163K€

Presupuesto del proyecto: 163K€

Líder del proyecto

UNIVERSITAT DE LLEIDA CCT No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Sin perfil tecnológico

Fecha límite participación Sin fecha límite de participación.

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2008-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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UDL

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Líder del proyecto

UNIVERSITAT DE LLEIDA CCT No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Sin perfil tecnológico

Presupuesto del proyecto 163K€

Fecha límite de participación Sin fecha límite de participación.

Descripción del proyecto EL OBJETIVO PRINCIPAL DEL PRESENTE PROYECTO ES DETERMINAR LA RELEVANCIA DE LA CICLINA D3 Y LA CDK11 EN LA HOMEOSTASIS DE LA MASA BETA CELULAR PANCREATICA EN LA DIABETES AUTOINMUNE, MEDIANTE EL USO DE LA TECNOLOGIA DE MICROARRAYS HEMOS IDENTIFICADO UNA SERIE DE GENES CUYA EXPRESION SE VE ALTERADA EN LAS CELULAS ENDOCRINAS DE LOS ISLOTES PANCREATICOS POR LA INFILTRACION LINFOCITARIA AUTOINMUNE EN LOS RATONES NOD (NON OBESE DIABETIC), EN EL PRESENTE PROYECTO NOS CENTRAREMOS PRINCIPALMENTE EN LA CICLINA D3, TAMBIEN ESTUDIAREMOS LA, CDK11, LA ENTRADA AL CICLO CELULAR EN CELULAS EUCARIOTAS DE MAMIFEROS ESTA COORDINADA POR LAS CICLINAS DEL TIPO D (DELTA) DE LAS QUE SE CONOCEN 3: CICLINA D1, D2 Y D3, LAS CICLINAS DEL TIPO D INTERACTUAN CON LAS KINASAS DEPENDIENTES DE CICLINA CORRESPONDIENTES, CDK4 Y CDK6, PARA FORMAR UN COMPLEJO HOLOENZIMATICO CUYA ACTIVIDAD HACE PROGRESAR LA CELULA A TRAVES DE LA FASE G1 DEL CICLO CELULAR HACIA LA FASE S, DEBIDO A QUE LA CICLINA D3 Y LA CDK11 SE HIPOREXPRESAN EN CELULAS ENDOCRINAS DE ISLOTES DE HEMBRAS NOD (INFILTRADOS) COMPARADO CON AQUELLOS DE HEMBRAS NOD/SCID (NO INFILTRADOS), NUESTRA HIPOTESIS DE TRABAJO EN EL PRESENTE PROYECTO DEFIENDE QUE TANTO LA CICLINA D3 COMO LA CDK11 SON MOLECULAS-CLAVE EN EL MANTENIMIENTO DE LA MASA BETA-CELULAR PANCREATICA Y QUE EL INFILTRADO LINFOCITICO DIABETOGENICO, MEDIANTE LA ACCION DE DIFERENTES CITOKINAS PRO-INFLAMATORIAS, INHIBE LA EXPRESION DE AMBAS, PARANDO EL CICLO CELULAR E INDUCIENDO LA POSTERIOR APOPTOSIS DE LAS CELULAS BETA PANCREATICAS, ENTONCES, SI CONSEGUIMOS MANTENER LA EXPRESION DE CICLINA D3 Y/O CDK11(P58 Y/O P130) EN ISLOTES INFILTRADOS MEDIANTE MODIFICACION GENETICA DE LA CEPA NOD, MANTENIENDO ASI EL CICLO CELULAR EN FUNCIONAMIENTO, LA INFILTRACION NO DEBERIA PROVOCAR DIABETES AUTOINMUNE, O CUANDO MENOS, LA APARICION DE ENFERMEDAD DEBERIA VERSE RETARDADA, A TAL EFECTO SE EFECTUARAN LOS SIGUIENTES ESTUDIOS FUNCIONALES: A) IN VITRO, 1, TRANSFECCION PERMANENTE DE LA LINEA CELULAR BETA PANCREATICA DE RATON (MIN6) CON CICLINA D3, CDK11 P58 O CDK11 P130 E INCUBACION EN LA PRESENCIA DE CITOKINAS PRO-INFLAMATORIAS (IFNGAMMA Y IL-1BETA), 2, TRANSFECCION LENTIVIRAL DE CICLINA D3, CDK11 P58 O CDK11 P130 EN ISLOTES AISLADOS A PARTIR DE HEMBRAS NOD DE 4 SEMANAS, E INCUBACION DE LOS MISMOS EN PRESENCIA DE CITOKINAS PRO-INFLAMATORIAS, EN 1 Y 2 SE ANALIZARA EL EFECTO DE LA SOBRE-EXPRESION DE CICLINA D3, CDK11 P58 O CDK11 P130 SOBRE EL CICLO CELULAR ASI COMO SOBRE LOS NIVELES DE APOPTOSIS,B) IN VIVO, 1, GENERACION DE RATONES NOD Y NOD/SCID DEFICIENTES EN CICLINA D3(CCND3 KO), O EN CDK11(CDK11 FLOX/NULL-RIP-CRE), EN AUSENCIA DE CICLINA D3 Y/O CDK11 LOS RATONES NOD/SCID HAN DE SER MAS SUSCEPTIBLES AL DESARROLLO DE DIABETES TRANSFERIDA POR LINFOCITOS DIABETOGENICOS , 2, GENERACION DE RATONES NOD, NOD/SCID Y NOD/CICLINA D3 KO QUE SOBRE-EXPRESEN CICLINA D3 EN LAS CELULAS BETA PANCREATICAS POR TRANSGENESIS, 3, GENERACION DE RATONES NOD, NOD/SCID Y CDK11(FLOX/NULL-RIP-CRE) QUE SOBRE-EXPRESEN CDK11 P58 O CDK11 P130 EN LAS CELULAS BETA PANCREATICAS POR TRANSGENESIS 4, TRANSPLANTE DE ISLOTES DE RATONES NOD/RIP-CICLINA D3, NOD/RIP-CDK11P58, NOD/RIP-CDK11P130, O DE SUS COMPAÑEROS DE CAMADA TRANSGENICOS NEGATIVOS A RECIPIENTES NOD/SCID QUE HAN SIDO ADOPTIVAMENTE TRANSFERIDOS CON ESPLENOCITOS DIABETOGENICOS, EN 1, 2, 3 Y 4 SE MONITORIZARA LA INCIDENCIA DE DIABETES ESPONTANEA ASI COMO REALIZARAN ANALISIS MORFOMETRICOS DE LOS ISLOTES, inflamación\citoquina\muerte de la célula beta pancreática\ciclo celular de la célula beta\ciclina D3\cdk11\NOD\autoimmunidad\diabetes T1

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