Descripción del proyecto
EL VIRUS DE LA HEPATITIS C (VHC) SE CARACTERIZA POR SU CAPACIDAD PARA PERSISTIR COMO UNA INFECCION CRONICA QUE A LA LARGA SUELE PRODUCIR CIRROSIS E INCLUSO CANCER HEPATICO, NO OBSTANTE, HASTA UN 25% DE LOS INDIVIDUOS LOGRAN ELIMINAR EL VIRUS DURANTE LA FASE AGUDA DE LA INFECCION, ESTE ACLARAMIENTO VIRAL SE ASOCIA A UNA FUERTE RESPUESTA DE LOS LINFOCITOS T CD8 (LT CD8), POR TANTO, LOS EPITOPOS DE LT CD8 (EPITOPOS CD8) DE VHC CONSTITUYEN UNA BASE PARA EL DESARROLLO DE UNA VACUNA FRENTE AL VIRUS, CON ESTE FIN HEMOS APLICADO UN ANALISIS BIOINFORMATICO QUE NOS HA PERMITIDO LA SELECCION DE EPITOPOS CD8 CUASI-INVARIANTES DE VHC, Y, ENTRE ESTOS, COMBINACIONES DE EPITOPOS QUE INDUCIRIAN LA RESPUESTA DE LOS LT DE CUALQUIER INDIVIDUO, INDEPENDIENTEMENTE DE LAS MOLECULAS HLA DE CLASE I (HLAI) QUE EXPRESEN, PARA VERIFICAR ESTOS RESULTADOS, EN ESTE PROYECTO ANALIZAREMOS POR EL ENSAYO DE ELISPOT IFNGAMMA; LA RESPUESTA INMUNE FRENTE A LAS COMBINACIONES DE EPITOPOS IDENTIFICADAS IN SILICO DE LT DE INDIVIDUOS NAIF EXPANDIDOS DE PERIPHERAL BLOOD MONONUCLEAR CELLS¿ (PBMC) POR ESTIMULACION CON LOS CORRESPONDIENTES GRUPOS DE EPITOPOS, ESTOS MISMOS EXPERIMENTOS TAMBIEN SE REALIZARAN EN INDIVIDUOS INFECTADOS CON VHC EN DISTINTOS ESTADIOS DE LA ENFERMEDAD (INCLUYENDO INDIVIDUOS QUE SE HAN CURADO), Y EN ESTOS, ADEMAS SE DETERMINARA LA RESPUESTA DE MEMORIA DE LOS LT FRENTE A LOS EPITOPOS DE VHC USANDO PBMC SIN ESTIMULAR, PARA CARACTERIZAR LA ESPECIFICIDAD Y FUNCIONALIDAD DE LOS LT EXPANDIDOS IN VITRO, SELECCIONAREMOS INDIVIDUOS NAIF E INFECTADOS CON VHC QUE EXPRESEN HLA-A*0201 (A*0201 POSITIVOS) Y AISLAREMOS LT CD8 EXPANDIDOS IN VITRO FRENTE A UNA SELECCION DE EPITOPOS DE VHC RESTRINGIDOS POR LA MOLECULA HLA-A*0201 (EPITOPOS O PEPTIDOS A*0201), ENTONCES DETERMINAREMOS SI ESTOS LT CD8 RECONOCEN ESPECIFICAMENTE A CADA UNO DE LOS EPITOPOS A*0201 Y EXAMINAREMOS SU FUNCION EFECTORA CITOLITICA, LOS RESULTADOS DE ESTA INVESTIGACION SERAN UTILES PARA EL EVENTUAL DESARROLLO DE UNA VACUNA DE EPITOPOS ROBUSTA Y UNIVERSAL FRENTE A VHC, PRINCIPALMENTE PROFILACTICA PERO QUIZAS TAMBIEN TERAPEUTICA, ADEMAS, LOS RESULTADOS QUE OBTENGAMOS SERAN DE INTERES PARA EL ENTENDIMIENTO DE LA INMUNOPATOLOGIA DE LA ENFERMEDAD, VHC\HEPATITIS C\VACUNA\INMUNOTERAPIA\EPITOPO\LT CD8\HLA\INMUNOLOGIA\INMUNOINFORMATICA\BIOMEDICINA