DISEÑO Y VALIDACION DE UN MACROARRAY BASADO EN PCR EN TIEMPO REAL PARA EL DIAGNO...
DISEÑO Y VALIDACION DE UN MACROARRAY BASADO EN PCR EN TIEMPO REAL PARA EL DIAGNOSTICO Y TIPADO DE BETANODAVIRUS Y VHSV
AUNQUE LA INDUSTRIA DE LA PISCICULTURA MARINA EN GALICIA SE HA DESARROLLADO FUNDAMENTALMENTE EN TORNO AL RODABALLO, EN LOS ULTIMOS AÑOS EL LENGUADO ESTA OCUPANDO UN LUGAR CRECIENTE ESTA INDUSTRIA, AMBAS ESPECIES SON SUSCEPTIBLES A...
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Descripción del proyecto
AUNQUE LA INDUSTRIA DE LA PISCICULTURA MARINA EN GALICIA SE HA DESARROLLADO FUNDAMENTALMENTE EN TORNO AL RODABALLO, EN LOS ULTIMOS AÑOS EL LENGUADO ESTA OCUPANDO UN LUGAR CRECIENTE ESTA INDUSTRIA, AMBAS ESPECIES SON SUSCEPTIBLES A DIFERENTES ENFERMEDADES VIRALES, SI BIEN LOS AGENTES VIRALES QUE EN LA ACTUALIDAD SE CONSIDERAN DE MAYOR RIESGO SON EL VHSV PARA EL RODABALLO Y LOS BETANODAVIRUS PARA EL LENGUADO, LAS HERRAMIENTAS DE CONTROL DE PATOLOGIAS DISPONIBLES PARA OTROS AGENTES INFECCIOSOS (NO VIRALES) TALES COMO EL TRATAMIENTO O LA VACUNACION, SON POCO EFECTIVOS O INABORDABLES ECONOMICAMENTE, POR ELLO, EL CONTROL DE LAS ENFERMEDADES VIRALES RECAE FUNDAMENTALMENTE EN PROCEDIMIENTOS DE DIAGNOSTICO SENCILLO, RAPIDO Y FIABLE, EN LOS ULTIMOS AÑOS EL DISEÑO DE METODOS DE DIAGNOSTICO HA EVOLUCIONADO RAPIDAMENTE, DANDO EL SALTO A LA OPTIMIZACION DE ESTRATEGIAS MOLECULARES BASADAS FUNDAMENTALMENTE EN LA AMPLIFICACION POR PCR, SIN EMBARGO, A PESAR DE QUE UN GRAN NUMERO DE LABORATORIOS APLICAN ESTAS TECNICAS MUY POCOS LAS HAN OPTIMIZADO Y VALIDADO PARA ASEGURAR SU FIABILIDAD, NUESTRO EQUIPO HA OPTIMIZADO Y VALIDADO LA PCR PARA EL DIAGNOSTICO ENTRE OTROS VIRUS DE VHSV Y BETANODAVIRUS Y HEMOS DESARROLLADO LA TECNICA DE PCR EN TIEMPO REAL (RT-PCR) CON SYBR GREEN PARA LA DETECCION DE CUALQUIER TIPO DE CEPA DEL VIRUS VHSV, AHORA QUEREMOS DAR UN PASO ADELANTE Y PASAR A LA TECNOLOGIA DE ARRAYS, QUE PERMITE REALIZAR MULTIDIAGNOSTICO CON GRAN RAPIDEZ, ESTA TECNICA HA SIDO AMPLIAMENTE UTILIZADA TANTO PARA EL DIAGNOSTICO COMO EL TIPADO DE VIRUS ANIMALES Y HUMANOS Y EN EL AMBITO DE LA ACUICULTURA SE HA APLICADO PARA LA DETECCION DEL VIRUS DE LA VIREMIA PRIMAVERAL DE LA CARPA UTILIZANDO MEMBRANAS DE NYLON, SIN EMBARGO, ESTA TECNOLOGIA ESTA BASADA EN HIBRIDACION POR LO QUE DEBE SER CAPAZ DE DETECTAR LAS CARGAS VIRALES DE UN PROCESO PATOLOGICO AGUDO PERO NO DETECTARIA PROCESOS DE BAJA CARGA VIRAL (QUE SON FRECUENTES EN LOS VIRUS OBJETO DEL PRESENTE PROYECTO), POR ESTE MOTIVO, NOSOTROS HEMOS OPTADO POR EL USO DEL SISTEMA CONOCIDO COMO LOW DENSITY TAQMAN® ARRAYS QUE PERMITE UNA AMPLIFICACION Y DETECCION SIMULTANEAS, BASICAMENTE CONSISTE EN UNA RT-PCR DESARROLLADO EN PLACAS DE MICROTITULACION P96-P384 EN LOS QUE SE HAN FIJADO PREVIAMENTE LAS SONDAS ESPECIFICAS, POR ELLO, LA FASE FUNDAMENTAL DEL PROCESO ES LA SELECCION DE LAS SONDAS ESPECIFICAS PARA DIAGNOSTICO Y TIPADO, BETANODAVIRUS VHSV DIAGNOSTICO TIPADO RT
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