DISEÑO DE UNA CAMARA ESTABILIZADORA PARA LA PRODUCCION Y PURIFICACION DE GRANDES...
DISEÑO DE UNA CAMARA ESTABILIZADORA PARA LA PRODUCCION Y PURIFICACION DE GRANDES CANTIDADES DE PROTEINAS COMPLEJAS PARA ESTUDIOS ESTRUCTURALES.
LA CRISTALOGRAFIA MACROMOLECULAR ASI COMO LAS NUEVAS TECNICAS DE CRYO-MICROSCOPIA DE ALTA RESOLUCION ESTAN PROPORCIONANDO UNA COMPRENSION A NIVEL ATOMICO DE COMO FUNCIONAN LOS SISTEMAS BIOLOGICOS, RESOLVIENDO LAS ESTRUCTURAS TRIDI...
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Descripción del proyecto
LA CRISTALOGRAFIA MACROMOLECULAR ASI COMO LAS NUEVAS TECNICAS DE CRYO-MICROSCOPIA DE ALTA RESOLUCION ESTAN PROPORCIONANDO UNA COMPRENSION A NIVEL ATOMICO DE COMO FUNCIONAN LOS SISTEMAS BIOLOGICOS, RESOLVIENDO LAS ESTRUCTURAS TRIDIMENSIONALES DE LAS PROTEINAS Y COMPLEJOS QUE PARTICIPAN EN EL FUNCIONAMIENTO DE LA MAQUINARIA CELULAR, SIN EMBARGO, LOS GRANDES DESAFIOS DE LA BIOLOGIA (PROTEINAS MULTIMODULARES, COMPLEJOS MULTICOMPONENTE O PROTEINAS DE MEMBRANA) SE VEN A MENUDO OBSTACULIZADOS POR PROBLEMAS EN LA PRODUCCION DE LAS CANTIDADES DE PROTEINA PURA, HOMOGENEA Y ESTABLE QUE SE REQUIEREN PARA LOS ANALISIS ESTRUCTURALES, LAS VAULTS SON NANOPARTICULAS NATURALES, PRESENTES EN LA MAYORIA DE ORGANISMOS EUCARIOTAS, QUE POSEEN UNA ENORME CAVIDAD INTERNA CAPAZ DE SECUESTRAR CENTENARES DE PROTEINAS, POSEEMOS LA TECNOLOGIA PARA PRODUCIR ESTAS PARTICULAS EN GRANDES CANTIDADES, EXPRESANDO LA PROTEINA DE LA ENVUELTA, MVP, DE FORMA RECOMBINANTE EN SISTEMAS EUCARIOTAS (INSECTOS Y MAMIFEROS), EXISTEN ADEMAS HERRAMIENTAS QUE PERMITEN DIRIGIR PROTEINAS EXOGENAS AL INTERIOR DE LA PARTICULA, EN CONCRETO, UN PEPTIDO DERIVADO DE LA PROTEINA MINORITARIA VPARP CONTIENE UNA SECUENCIA DE UNION ESPECIFICA AL INTERIOR DE LA VAULT, EN ESTE PROYECTO PROPONEMOS EXPLORAR EL USO DE VAULTS RECOMBINANTES COMO CAMARAS ESTABILIZADORAS PARA LA PRODUCCION Y LA PURIFICACION DE GRANDES CANTIDADES DE PROTEINAS, CUYA PRODUCCION RESULTA DIFICIL O CASI IMPOSIBLE USANDO LOS SISTEMAS DE SOBRE-EXPRESION Y PURIFICACION ESTANDAR, PLANTEAMOS USAR COMO MODELO LA SOBRE-EXPRESION DE DOS PROTEINAS MULTIMODULARES ALTAMENTE INESTABLES: I) LA RNA POLIMERASA DEPENDIENTE DE RNA L DEL VIRUS EBOLA (250KDA), QUE SERA DIRIGIDA AL INTERIOR DE LA PARTICULA MEDIANTE SU FUSION CON EL PEPTIDO QUE LA DIRIGIRA AL INTERIOR DE LA VAULT Y, II) LA PROTEINA ASOCIADA A TELOMERASA TEP1 (280KDA), UN COMPONENTE MINORITARIO DE LAS VAULTS NATURALES QUE TIENE UN SITIO ESPECIFICO DE UNION EN EL INTERIOR DE LA PARTICULA, EXPRESIÓN DE PROTEINAS\NANOPARTÍCULAS\VAULT\TEP1\EBOV RDRP
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