Descripción del proyecto
SE PROPONE INVESTIGAR A NIVEL CELULAR UN CONJUNTO DE FENOMENOS FISICOS QUE INCLUYEN LA DINAMICA CONFORMACIONAL DE MACROMOLECULAS EN EL INTERVALO TEMPORAL DEL NANOSEGUNDO, LA ORGANIZACION E INTERACCIONES DE COMPLEJOS MULTIPROTEICOS Y LAS FLUCTUACIONES ESTRUCTURALES DE LIPIDOS EN BICAPAS, SE UTILIZARAN CON ESTE FIN METODOS TEORICO-EXPERIMENTALES DE ESPECTROSCOPIA LASER DE FLUORESCENCIA CON RESOLUCION TEMPORAL DE PICOSEGUNDOS, APLICADOS MEDIANTE UN MICROSCOPIO CONFOCAL CON EXCITACION BIFOTONICA, PARA INCORPORAR LA NECESARIA RESOLUCION ESPACIAL, LA INTERPRETACION CUANTITATIVA DE ESTOS EXPERIMENTOS SE BASARA EN MODELOS TEORICOS DE ESTOS FENOMENOS EN DISOLUCION, AUNQUE ADECUADAMENTE MODIFICADOS PARA MEJORAR LA FIABILIDAD DE LA INFORMACION DINAMICA Y ESTRUCTURAL CUANDO SE RECOGE A TRAVES DE UN MICROSCOPIO CONFOCAL DESDE UNA CELULA VIVA, DESDE EL PUNTO DE VISTA EXPERIMENTAL, SE DISEÑARA UN ANALISIS COMBINADO DE INTENSIDADES Y DESPOLARIZACION DE FLUORESCENCIA Y/O TRANSFERENCIA DE ENERGIA RESONANTE, TANTO EN ESTADO ESTACIONARIO COMO CON RESOLUCION TEMPORAL, DE ESTA FORMA SE ESPERA RESOLVER LAS LIMITACIONES MAS IMPORTANTES EN ESTE TIPO DE ESTUDIOS, QUE PROCEDEN PRINCIPALMENTE DE LA ASIMETRIA Y HETEROGENEIDAD DE LAS POBLACIONES FOTOSELECCIONADAS, DEL EFECTO DE LAS ABERRACIONES OPTICAS SOBRE LA EXCITACION Y DETECCION DE LA FLUORESCENCIA POLARIZADA Y DE LA HETEROGENEIDAD EN LOS PARAMETROS FOTOFISICOS DEL FLUOROFORO INCORPORADO A UN COMPLEJO SISTEMA CELULAR, SE DEMOSTRARA LA UTILIDAD DE ESTE NUEVO TIPO DE APROXIMACION MEDIANTE SU APLICACION AL ESTUDIO DE LOS FENOMENOS DINAMICOS Y ESTRUCTURALES MENCIONADOS EN CELULAS DE MAMIFERO Y EN LEVADURAS, UTILIZANDO UN CONJUNTO DE SONDAS Y/O PROTEINAS FLUORESCENTES INCORPORADAS A LAS ESTRUCTURAS DE INTERES, ASIMISMO, SE DESARROLLARAN NUEVAS REACCIONES FLUOROGENICAS QUE FACILITEN LA APLICACION DE LAS TECNICAS DE MICROSCOPIA CONFOCAL DE FLUORESCENCIA AL ESTUDIO DE PROCESOS NEUROQUIMICOS, CON ESTAS NUEVAS REACCIONES SE ESPERA PODER OBTENER EL MARCADO FLUORESCENTE DE VARIOS CATECOLES DE INTERES BIOLOGICO, RELACIONADOS CON EL AMINOACIDO 3,4-DIHIDROXIFENILALANINA (DOPA)