Descripción del proyecto
PROPONEMOS EL DESARROLLO DE NUEVAS HERRAMIENTAS ESPECTROSCOPICAS, CON ALTA RESOLUCION ESPACIAL (NM-UM) Y TEMPORAL (PS-MS), APLICADAS AL ESTUDIO CUANTITATIVO, A NIVEL MOLECULAR, DE SISTEMAS BIOLOGICOS COMPLEJOS, EN ENTORNOS PROXIMOS A SU SITUACION IN VIVO, ESTAS HERRAMIENTAS ESTAN BASADAS EN LOS METODOS DE MICRO-ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA LASER, ACTUALMENTE EN PLENO DESARROLLO INSTRUMENTAL Y METODOLOGICO, COMBINAN LOS METODOS DE ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA RESUELTA EN EL TIEMPO Y LA MICROSCOPIA OPTICA CONFOCAL/MULTI-FOTONICA, ESTAN RESULTANDO SER INDISPENSABLES EN EL ESTUDIO DE LAS BASES MOLECULARES DE LA FUNCION BIOLOGICA, YA QUE PERMITEN CUANTIFICAR LOS ASPECTOS ENERGETICOS Y DINAMICOS DE LAS BIOMOLECULAS Y SUS COMPLEJOS FUNCIONALES, TANTO IN VITRO, EN DISOLUCION, COMO DIRECTAMENTE EN CELULAS VIVAS, CON ALTA RESOLUCION ESPACIAL Y TEMPORAL, Y SENSIBILIDAD DE UNA SOLA MOLECULA, EN CONCRETO NOS CENTRAREMOS EN LOS METODOS DE FLUCTUACION DE FLUORESCENCIA, FCS, FCCS E HISTOGRAMA, PCH, HOMO-TRANSFERENCIA DE ENERGIA RESONANTE TIPO FORSTER , HOMO-FRET, DESPOLARIZACION DE FLUORESCENCIA CON RESOLUCION TEMPORAL DE PS, TRA, EN UN PUNTO Y MEDIDAS DE BARRIDO, OBTENCION DE IMAGENES DE VIDAS MEDIAS, FLIM Y DE ANISOTROPIA DE FLUORESCENCIA, TRA-IM, CON EXCITACION DE DOS FOTONES, 2PE, EL ANALISIS GLOBAL MULTI-PARAMETRICO DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS NOS PERMITIRA MOSTRAR IMAGENES DINAMICAS DE LOS SUCESOS EN ESTUDIO, LAS APLICACIONES BIOLOGICAS PROPUESTAS INCLUYEN I) EL ESTUDIO DE LA ENERGETICA Y DINAMICA DE LAS INTERACCIONES, Y LA ORGANIZACION ESPACIAL Y DINAMICA DE LOS COMPLEJOS MULTI-PROTEICOS, IMPLICADOS EN LA FUNCION DE LAS DIANAS FARMACOLOGICAS PPAR Y II) LA MOVILIDAD, LOCALIZACION Y DISTRIBUCION DE LAS DIFERENTES POBLACIONES DE RIBOSOMAS EN LEVADURAS Y EL ESTUDIO DE LA DINAMICA LOCAL DE LOS COMPONENTES DEL TALLO RIBOSOMICO, DOMINIO FUNCIONAL DE LA SUBUNIDAD RIBOSOMICA MAYOR, ESTOS SISTEMAS SE ESTUDIARAN A DIFERENTES NIVELES DE COMPLEJIDAD, EN DISOLUCION DILUIDA, EN MEDIOS AGLOMERADOS QUE SIMULEN LAS CONDICIONES FISIOLOGICAS, Y EN SU ENTORNO NATURAL, LA CELULA, DESARROLLAREMOS ADEMAS LAS ADAPTACIONES METODOLOGICAS NECESARIAS PARA GENERALIZAR EL USO DE ESTOS METODOS PARA EL ESTUDIO DE SISTEMAS DINAMICOS NANOESTRUCTURADOS, SUSCEPTIBLES DE PODER SER MARCADOS ESPECIFICAMENTE CON SONDAS FLUORESCENTES, MICRO-ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA\EXCITACION DOS FOTONES\INTERACCIONES BIO-MOLECULARES\DINAMICA\MOVILIDAD\DISTRIBUCION\FUNCION\TALLO RIBOSOMICO\RECEPTORES NUCLEARES PPAR\CELULA VIVA