Descripción del proyecto
LA MAYORIA DE LOS ESTUDIOS SOBRE LAS PROTEINAS INSECTICIDAS DE BT REALIZADOS HASTA LA FECHA SE HAN CENTRADO EN LA DE LAS FAMILIAS CRY1A, CRY1F, CRY2A Y CRY3, DADO QUE ESTAS FUERON LAS PRIMERAS EN SER DESCUBIERTAS Y CARACTERIZADAS A FINALES DE LOS AÑOS 60, Y CUYOS GENES FUERON POSTERIORMENTE INTRODUCIDO Y EXPRESADO CON EXITO EN PLANTAS ("CULTIVOS BT"), SIN EMBARGO, SE HA PRESTADO MUCHA MENOS ATENCION A OTRAS PROTEINAS INSECTICIDAS DE BT, TALES COMO LAS DE LA FAMILIA VIP3, A PESAR DEL HECHO DE QUE EL GEN VIP3AA YA HA SIDO INTRODUCIDO EN CULTIVOS BT COMO COMPLEMENTARIO A LOS GENES CRY, ADEMAS, LOS ESTUDIOS SOBRE EL MODO DE ACCION DE LAS PROTEINAS CRY, DISTINTAS DE LAS MENCIONADAS ANTERIORMENTE, SON RELATIVAMENTE POCO ABUNDANTES,EN EL PROYECTO ANTERIOR (AGL215-70584-C2-R) HEMOS DESARROLLADO UN NUEVO BIOINSECTICIDA BASADO EN LA COMBINACION DE DOS CEPAS AUTOCTONAS BT, QUE SE COMPLEMENTAN ENTRE SI CON RESPECTO A LAS PROTEINAS CRY QUE EXPRESAN (Y, POR LO TANTO, TIENEN ACTIVIDADES INSECTICIDAS COMPLEMENTARIAS), ADEMAS DE EXPRESAR PROTEINAS VIP3AA, TAMBIEN ESTUDIAMOS EL MODO DE ACCION DE LAS PROTEINAS CRY Y VIP, EL EFECTO DE LOS COMPUESTOS SINERGICOS Y LA BASE BIOQUIMICA DE LA RESISTENCIA A LAS TOXINAS BT EN CEPAS DE INSECTOS RESISTENTES,EN EL PROYECTO ACTUAL, QUEREMOS CONTINUAR CON ESTAS LINEAS DE INVESTIGACION, PARA CONTRIBUIR AUN MAS A UN MEJOR CONOCIMIENTO SOBRE COMO LAS TOXINAS BT FUNCIONAN E INTERACTUAN ENTRE SI Y CON OTRAS MOLECULAS, Y OPTIMIZAR UN PRODUCTO BASADO EN BT HASTA EL PUNTO DE PODER TRANSFERIR LOS RESULTADOS PARA QUE PUEDA ALCANZAR EL MERCADO,EL MODO DE ACCION DE LAS PROTEINAS DE LA FAMILIA VIP3 ES POCO CONOCIDO, DADO QUE LAS DOS CEPAS SELECCIONADAS EN EL PRESENTE PROYECTO EXPRESAN PROTEINAS VIP3AA, UN PRIMER OBJETIVO SERA ESTUDIAR LAS CARACTERISTICAS ESTRUCTURALES DE VIP3AA QUE SON CRITICAS PARA SU MODO DE ACCION, HEMOS GENERADO QUIMERAS POR BARAJADO DE DOMINIOS Y TENEMOS UNA COLECCION DE CLONES QUE CONTIENEN SUSTITUCIONES DE AMINOACIDOS DE LA PROTEINA DE TIPO SALVAJE, ESTE VALIOSO MATERIAL SE UTILIZARA PARA ESTUDIAR MAS A FONDO LA ESTRUCTURA-FUNCION DE LAS PROTEINAS VIP3, LA CEPA SELECCIONADA EN EL PROYECTO ANTERIOR LO013,1 MOSTRO SECUENCIAS PARCIALES DE GENES QUE NO SE EXPRESAN EN MEDIOS ESTANDAR DE CULTIVO, ESTOS GENES PERTENECEN A FAMILIAS MUY POCO ESTUDIADAS Y PODRIAN EXPRESARSE EN CONDICIONES DE MEDIO DE CULTIVO APROPIADAS, COMO SEGUNDO OBJETIVO CLONAREMOS Y EXPRESAREMOS ESTOS GENES CRY PARA DETERMINAR EL ESPECTRO DE ACTIVIDAD Y EL MODO DE ACCION DE LASA PROTEIANS QUE CODIFICAN, PARALELAMENTE, ABORDAREMOS EL MODO DE ACCION GENERAL DESARROLLANDO METODOLOGIAS PARA LA DISECCION MOLECULAR DE SUCESOS SUCESIVOS, TALES COMO LA OLIGOMERIZACION, LA UNION A RECEPTORES Y LA VIA DE MUERTE CELULAR, LA INTERACCION DE COMPUESTOS SINERGICOS TAMBIEN SERA ABORDADA,DADO QUE LA EVOLUCION DE LA RESISTENCIA DE LAS POBLACIONES DE INSECTOS ES LA MAYOR AMENAZA PARA EL USO DE INSECTICIDAS BT Y CULTIVOS BT, ES DE SUMA IMPORTANCIA ESTUDIAR EL MODO EN QUE LOS INSECTOS DESARROLLAN RESISTENCIA CONTRA LAS TOXINAS BT A FIN DE IMPLEMENTAR ESTRATEGIAS PARA EVITARLA O RETRASARLA, EL GRUPO S1 HA SIDO, DURANTE MUCHO TIEMPO, UN LABORATORIO DE REFERENCIA PARA EL ANALISIS DE INSECTOS RESISTENTES, ESPECIALMENTE DEBIDO AL USO DE 125I EN EL MARCAJE DE TOXINAS PARA ESTUDIOS DE UNION, UN TERCER OBJETIVO SERA CONTINUAR ESTA LINEA DE INVESTIGACION MEDIANTE EL ANALISIS DE CEPAS RESISTENTES A CRY Y VIP DE LABORATORIOS COLABORADORES DE TODO EL MUNDO, BIOINSECTICIDA\PROTEÍNAS INSECTICIDAS\MEDIOS DE CULTIVO\RESISTENCIA EN INSECTOS\MODO DE ACCIÓN\PROTEÍNAS VIP Y CRY