DESARROLLO DE NUEVOS METODOS DE DIAGNOSTICO BASADOS EN BIOMARCADORES BOVINOS (PR...
DESARROLLO DE NUEVOS METODOS DE DIAGNOSTICO BASADOS EN BIOMARCADORES BOVINOS (PROTEINAS) PARA EL DIAGNOSTICO TEMPRANO DE LA PARATUBERCULOSIS BOVINA
LOS METODOS ACTUALES DE DIAGNOSTICO DE LA PARATUBERCULOSIS BOVINA (PTB) NO SON CAPACES DE DETECTAR INFECCIONES SUBCLINICAS, LO CUAL DIFICULTA ENORMEMENTE EL CONTROL DE LA ENFERMEDAD, LOS BIOMARCADORES BOVINOS SE CONSIDERAN UNA BUE...
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Descripción del proyecto
LOS METODOS ACTUALES DE DIAGNOSTICO DE LA PARATUBERCULOSIS BOVINA (PTB) NO SON CAPACES DE DETECTAR INFECCIONES SUBCLINICAS, LO CUAL DIFICULTA ENORMEMENTE EL CONTROL DE LA ENFERMEDAD, LOS BIOMARCADORES BOVINOS SE CONSIDERAN UNA BUENA ALTERNATIVA PARA LA IDENTIFICACION TEMPRANA DE ANIMALES INFECTADOS CON MYCOBACTERIUM AVIUM SUBSP, PARATUBERCULOSIS (MAP), EL OBJETIVO PRINCIPAL DE ESTE SUBPROYECTO ES IDENTIFICAR BIOMARCADORES (PROTEINAS DEL HOSPEDADOR) CON EL FIN DE DESARROLLAR METODOS DE DIAGNOSTICO MAS SENSIBLES PARA LA DETECCION PRECOZ DE LAS INFECCIONES DE MAP, EN EL PROYECTO ANTERIOR, EL ANALISIS TRANSCRIPTOMICO POR RNASEQ DE MUESTRAS DE SANGRE Y VALVULA ILEOCECAL (ICV) DE ANIMALES INFECTADOS CON DISTINTOS TIPOS DE LESIONES HISTOPATOLOGICAS ASOCIADAS A LA PTB EN SU TEJIDO INTESTINAL PERMITIO LA IDENTIFICACION DE VARIOS GENES SOBREEXPRESADOS, EN ESTE SUBPROYECTO, ALGUNOS DE LOS BIOMARCADORES IDENTIFICADOS SERAN PRE-VALIDADOS MEDIANTE ELISAS COMERCIALES ESPECIFICOS UTILIZANDO MUESTRAS DE PLASMA DE 50 ANIMALES CON LESIONES HISTOPATOLOGICAS FOCALES (TIPICAS DE INFECCIONES LATENTES/TEMPRANAS DE PTB) Y DE 50 ANIMALES CONTROL SIN LESIONES DETECTADAS, SE REALIZARA ANALISIS ROC DE LOS RESULTADOS DE LOS ELISAS PARA SELECCIONAR EL ELISA CON EL MEJOR PODER DISCRIMINATORIO ENTRE LOS DOS GRUPOS DE ANIMALES COMPARADOS, POSTERIORMENTE, SE DESARROLLARA UN ELISA PARA LA DETECCION DEL BIOMARCADOR CON MEJOR PODER DISCRIMINATORIO Y SE REALIZARA UNA VALIDACION A GRAN ESCALA DE DICHO ELISA UTILIZANDO MUESTRAS DE PLASMA (N = 861) DE VACAS INFECTADAS DE FORMA NATURAL DE VARIAS EDADES Y EN VARIAS ETAPAS DE INFECCION PARA DETERMINAR EL VERDADERO VALOR DIAGNOSTICO DEL ENSAYO, TAMBIEN SE ESTUDIARAN LAS POSIBLES REACCIONES CRUZADAS DEL ELISA CON MUESTRAS DE SUERO DE ANIMALES INFECTADOS CON MYCOBACTERIUM BOVIS, ADEMAS, SE COMPARARA EL VALOR DIAGNOSTICO DEL ELISA CON EL DE OTRAS TECNICAS COMO EL CULTIVO BACTERIOLOGICO, LA PCR A TIEMPO REAL Y EL ELISA DE IDEXX, DADO EL NUMERO LIMITADO DE BIOMARCADORES ENCONTRADO UTILIZANDO RNASEQ, SE COMPARARA EL PERFIL PROTEOMICO DE MUESTRAS DE SUERO DE VACAS DE LA RAZA HOLSTEIN FRIESIAN INFECTADAS CON DIVERSOS TIPOS DE LESIONES HISTOPATOLOGICAS ASOCIADAS A LA PTB CON LA FINALIDAD DE IDENTIFICAR NUEVOS BIOMARCADORES BOVINOS, LA EXPRESION DIFERENCIAL DE LAS PROTEINAS IDENTIFICADAS SERA VALIDADA POR ELISA, ANALISIS WESTERN-BLOT E INMUNOHISTOQUIMICA, ASIMISMO, EL POTENCIAL TERAPEUTICO DE ALGUNOS DE LOS BIOMARCADORES IDENTIFICADOS EN EL PRESENTE PROYECTO SERA EVALUADO EN UN MODELO DE CONEJO INFECTADO EXPERIMENTALMENTE CON MAP, PARATUBERCULOSIS\DIAGNÓSTICO\CONTROL\TRANSCRIPTÓMICA\PROTEOMICA\ELISAS\VALIDACIÓN\EFECTO TERAPEUTICO\PATENTE
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