Descripción del proyecto
LA NANOTECNOLOGIA PUEDE SER CONSIDERADA COMO UNA DE LAS RAMAS EMERGENTES EN LA CIENCIA MODERNA Y LA TECNOLOGIA. A PESAR DE TODOS SUS BENEFICIOS, EL USO GENERALIZADO Y POR TANTO LA EMISION DE NANOMATERIALES PUEDE TENER UN IMPORTANTE IMPACTO EN LOS SISTEMAS BIOLOGICOS Y MEDIOAMBIENTALES. AUNQUE SU USO ESTA MUY ESTENDIDO, AUN EXISTE UN CONTROL LIMITADO SOBRE EL EFECTO BIOLOGICO DE LAS NANOPARTICULAS EN FUNCION DE SU TAMAÑO Y SU ASOCIACION A MOLECULAS BIOLOGICAS. POR TANTO, ES NECESARIO EL DESARROLLO URGENTE DE METODOS ANALITICOS QUE POSIBILITEN LA DETECCION Y DETERMINACION DE ESTAS NANOPARTICULAS EN DIFERENTES TIPOS DE MUESTRAS.EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES EL DESARROLLO DE ESTRATEGIAS ANALITICAS PARA EL ANALISIS NANOPARTICULAS METALICAS CON ESPECIAL ENFASIS EN NANOPARTICULAS DE ORO Y DE PLATA EN SISTEMAS BIOLOGICOS. SERAN EMPLEADAS TECNICAS HIBRIDAS JUNTO CON TECNICAS DE ESPECTROMETRIA DE MASAS ELEMENTAL Y ORGANICA (PRINCIPALMENTE ESPECTROMETRIA DE MASA DE PLASMA DE ACOPLAMIENTO INDUCTIVO, ICP-MS, ESPECTROMETRIA DE MASAS DE IONIZACION POR ELECTROSPRAY, ESI-MS, Y ESPECTROMETRIA DE MASAS DE DESORPCION E IONIZACION POR LASER ASISTIDA POR MATRIZ, MALDI-MS) PARA EL ANALISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO DE ESTAS NANOPARTICULAS METALICAS Y SUS CORRESPONDIENTES ESPECIES METALICAS DE BAJO PESO MOLECULAR, QUE NO ESTAN ENLAZADAS A LAS NANOPARTICULAS. DENTRO DE ESTA TAREA, SON DE ESPECIAL INTERES: LA PUESTA A PUNTO DE UNA METODOLOGIA DE PREPARACION DE MUESTRA ADECUADA, Y LOS METODOS DE SEPARACION CON DETECCION POR ESPECTROMETRIA DE MASAS. BASADOS EN ESTOS ESTUDIOS FUNDAMENTALES Y EN PROCESOS DE OPTIMIZACION, LA APLICABILIDAD DE LOS METODOS DESARROLLADOS SERA PROBADA EN EL ANALISIS DE MUESTRAS BIOLOGICAS.EL ANALISIS DE ESPECIES BIOLOGICAS ES DE ESPECIAL INTERES YA QUE EL CONOCIMIENTO SOBRE LA DISTRIBUCION MOLECULAR DE LAS NANOPARTICULAS ES AUN MUY LIMITADO. AQUI, EL PROYECTO ASPIRA A DAR NUEVAS RESPUESTAS DE COMO LAS NANOPARTICULAS ESTAN UNIDAS A LAS BIOMOLECULAS, PRINCIPALMENTE A PROTEINAS. ESTE OBJETIVO DEBE SER ABORDADO MEDIANTE ELECTROFORESIS EN GEL EN DOS DIMENSIONES BAJO CONDICIONES NO DESNATURALIZANTES CON LA SUBSECUENTE IMAGING (PROCESADO DE IMAGEN) MEDIANTE ICP-MS CON ABLACION LASER, Y LA COMPLEMENTARIA DIGESTION EN-GEL SEGUIDA DE LA IDENTIFICACION DE PROTEINAS POR ESI-MS Y MALDI-MS Y BUSQUEDA DE BASES DE DATOS. ESTO DARA LUGAR A NUEVAS APORTACIONES DENTRO DE LA IDENTIFICACION DE PROTEINAS ASOCIADAS A NANOPARTICULAS METALICAS EN FLUIDOS CORPORALES (COMO EN PLASMA SANGUINEO HUMANO) Y EN TEJIDOS (PROVISTAS MEDIANTE APLICACION INTRAVENOSA Y ORAL A RATAS).ESTOS ESTUDIOS SERAN ACOMPAÑADOS POR PRUEBAS FISIOLOGICAS. LA DISTRIBUCION LOCAL DE LAS NANOPARTICULAS EN DIFERENTES ORGANOS Y FLUIDOS CORPORALES SERA INVESTIGADA Y ASOCIADA A DATOS TOXICOLOGICOS. PARAMETROS A DETERMINAR SERAN LA DETERMINACION DEL ESTRES OXIDATIVO DEL DNA Y LA DETERMINACION DEL ESTADO ANTIOXIDANTE TOTAL. ES MUY IMPORTANTE QUE LOS METODOS ANALITICOS PERMITAN DISTINGUIR ENTRE NANOPARTICULAS ENLAZADAS A METALES, E IONES METALICOS LIBRES. ESTE ENFOQUE PROVEERA, POR TANTO, IMPORTANTES DATOS DE LA RELACION ENTRE LA DISTRIBUCION DEL METAL Y SU ACUMULACION COMO SE HA MENCIONADO ANTERIORMENTE, ASI COMO DE SU INFLUENCIA FISIOLOGICA. ECNICAS HIBRIDAS\COMPLEJOS PROTEINAS NANOPARTICULAS\HPLC\ELECTROFORESIS EN GEL\ESI-MS\ICP-MS\NANOPARTICULAS METALICAS