Descripción del proyecto
LOS PULGONES SON INSECTOS CHUPADORES DE SAVIA DE LAS PLANTAS CONOCIDOS INTERNACIONALMENTE POR LAS PERDIDAS ECONOMICAS QUE ALGUNAS ESPECIES PLAGA PROVOCAN COMO CONSECUENCIA DE SU PRESENCIA EN LOS CULTIVOS, ADEMAS, LOS PULGONES PRESENTAN UNA SERIE DE CARACTERISTICAS EN SUS CICLOS DE VIDA QUE LOS HACE PARTICULARMENTE INTERESANTES PARA EL ESTUDIO DE DIFERENTES ASPECTOS DE SU BIOLOGIA, COMO SON LOS VARIADOS POLIFENISMOS EXHIBIDOS, DESDE EL AÑO 2010 SE ENCUENTRA DISPONIBLE PARA LA COMUNIDAD CIENTIFICA EL GENOMA DEL PULGON MODELO ACYRTHOSIPHON PISUM, LA DISPONIBILIDAD DE ESTE Y OTROS GENOMAS ES CRUCIAL PARA ABORDAR EL ESTUDIO DE LOS MECANISMOS MOLECULARES QUE CONTROLAN DIFERENTES ASPECTOS DE LA BIOLOGIA DE ESTOS INSECTOS, COMO RESULTADO DE NUESTRAS INVESTIGACIONES PREVIAS, HEMOS IDENTIFICADO Y CARACTERIZADO UNA BATERIA DE GENES CANDIDATOS A PARTICIPAR EN EL CONTROL DE LA INDUCCION DE LA FASE SEXUAL (EQUIVALENTE A LA DIAPAUSA DE OTROS INSECTOS) EN PULGONES, TAMBIEN HEMOS IDENTIFICADO GENES APARENTEMENTE IMPLICADOS EN UN POLIFENISMO RELACIONADO CON LA MIRMECOFILIA EN EL PULGON PARACLETUS CIMICIFORMIS, SIN EMBARGO, LA PARTICIPACION DE ALGUNOS DE ESTOS GENES EN LOS POLIFENISMOS MENCIONADOS NO HA QUEDADO TODAVIA DEMOSTRADA POR LA CARENCIA DE UN METODO ROBUSTO QUE PERMITA EL ESTUDIO DE FUNCIONES GENICAS EN PULGONES, LO QUE CONDICIONA EL AVANCE EN ESTOS ESTUDIOS, UNA HERRAMIENTA UTIL EN LA CARACTERIZACION DE FUNCIONES GENICAS, QUE EN OTROS INSECTOS SE VIENE UTILIZANDO CON EXITO, ES EL SILENCIAMIENTO GENICO MEDIANTE RNA DE INTERFERENCIA (RNAI), ALGUNOS TRABAJOS HAN PUESTO DE MANIFIESTO LA DIFICULTAD DE IMPLEMENTAR RNAI EN PULGONES USANDO LAS TECNICAS HABITUALES BASADAS EN PROPORCIONAR UN DSRNA COMPLEMENTARIO DE UN FRAGMENTO DEL GEN A SILENCIAR A TRAVES DE DIETAS ARTIFICIALES O MEDIANTE MICROINYECCION, LA METODOLOGIA CRISPR/CAS TAMBIEN SE ESTA USANDO CON EXITO EN ESTUDIOS SOBRE FUNCIONES GENICAS DE DIFERENTES INSECTOS, EN ESTE PROYECTO PLANTEAMOS EL DESARROLLO DE DOS TIPOS DE HERRAMIENTAS PARA ESTUDIAR FUNCIONES GENICAS EN PULGONES, POR UN LADO, SE PLANTEA DESARROLLAR UNA METODOLOGIA RNAI ALTERNATIVA, SE TRATA DE GARANTIZAR EL SUMINISTRO CONTINUO DEL DSRNA NECESARIO PARA ACTIVAR EL RNAI MEDIANTE SU INCLUSION EN UN VIRUS VEGETAL QUE INFECTA A LA PLANTA DE LA QUE EL PULGON SE ALIMENTA DE MANERA NATURAL, ESTA TECNICA, DENOMINADA VIGS (VIRUS INDUCED GENE SILENCING), ES UNA HERRAMIENTA UTILIZADA EN EL SILENCIAMIENTO DE GENES DE PLANTAS, EN SEGUNDO LUGAR, PRETENDEMOS DESARROLLAR LA METODOLOGIA CRISPR/CAS EN PULGONES, ADEMAS DE INVESTIGAR LA EXTENSION DE ESTAS TECNICAS A LOS PULGONES, INVESTIGAREMOS EL PAPEL DE LOS GENES CANDIDATOS QUE HEMOS IDENTIFICADO HASTA LA FECHA EN LOS PROCESOS EN LOS QUE PRESUNTAMENTE PARTICIPAN, DE MANERA COLATERAL, EVALUAREMOS LA UTILIDAD DEL SILENCIAMIENTO DE GENES DE LA RUTA DE SINTESIS DE CAROTENOIDES, EXCLUSIVOS DE PULGONES, EN EL CONTROL DE SUS POBLACIONES, EL EXITO DEL PROYECTO PROPORCIONARA HERRAMIENTAS PARA ESTUDIAR NUMEROSOS GENES DE INTERES ASI COMO UNA POSIBLE NUEVA ESTRATEGIA SEGURA DE LUCHA CONTRA ESPECIES PLAGA BASADA EN PLANTAS TRANSGENICAS PARA FRAGMENTOS DE GENES DE PULGONES, PULGONES\RNAI\CRISPR\VIGS\FOTOPERIODISMO\POLIFENISMO