Descripción del proyecto
EL DESARROLLO DEL PERFIL DE METABOLITOS DE FLUIDOS BIOLOGICOS COMO PLASMA U ORINA ES YA UNA HERRAMIENTA RECONOCIDA PARA INCREMENTAR LAS POSIBILIDADES DE INFORMACION DE LA GENOMICA FUNCIONAL, DICHA HERRAMIENTA PUEDE PERMITIR IDENTIFICAR NUEVOS MARCADORES O EL EFECTO DE UN MEDICAMENTO O UNA PATOLOGIA EN UNA DETERMINADA RUTA METABOLICA E INCLUSO DESCUBRIR NUEVAS RUTAS,LOS METABOLITOS PRESENTAN UNA ENORME DIVERSIDAD QUIMICA CON VARIACIONES NO SOLO EN LA ESTRUCTURA DE LOS GRUPOS FUNCIONALES Y PROPIEDADES FISICO-QUIMICAS, SINO TAMBIEN EN EL RANGO DE CONCENTRACIONES, LO QUE HACE SU ANALISIS UN VERDADERO RETO, NO EXISTE HOY EN DIA UNA UNICA TECNICA CAPAZ DE ABORDAR EL PROBLEMA, AUNQUE NUEVAS PLATAFORMAS COMO LCXLC ESTAN TODAVIA POR EXPLORAR, UNA VEZ QUE SE HAYAN SUPERADO LOS RETOS DEL TRATAMIENTO DE LA MUESTRA (MANTENIENDO TODOS LOS METABOLITOS, PERO ELIMINANDO LAS INTERFERENCIAS DE LA TECNICA, COMO LAS PROTEINAS EN EL PLASMA) Y DE LA TECNICA ANALITICA, TODAVIA QUEDA LA MANIPULACION DE LA INGENTE CANTIDAD DE DATOS GENERADOS,LOS OBJETIVOS DEL PROYECTO BUSCAN CUBRIR TODOS LOS PASOS DEL PROCESO ANALITICO PARA GARANTIZAR UNA APROXIMACION HOLISTICA AL DESARROLLO DEL PERFIL DE METABOLITOS DE PLASMA Y ORINA, CON LA FINALIDAD DE CLASIFICARLAS CON RESPECTO A SU SITUACION PATOLOGICA O CONTROL O AL EFECTO DE UN TRATAMIENTO, PARA POSTERIORMENTE BUSCAR LOS MARCADORES CONCRETOS DE ESA SITUACION, PARA ELLO PRETENDEMOS:1,-OPTIMIZAR EL TRATAMIENTO DE LA MUESTRA (PRINCIPALMENTE PLASMA, YA QUE LA ORINA SE PUEDE MEDIR CON SOLO DILUIR SALVO EN GC) EVITANDO LA PERDIDA DE METABOLITOS Y BUSCANDO EL EMPLEO DE UNA SOLA ALICUOTA A TRAVES DE DIVERSAS TECNICAS, VALIDAR EL TRATAMIENTO EN CUANTO A RECUPERACION Y REPRODUCIBILIDAD,2,-OPTIMIZAR Y APLICAR DIFERENTES TECNICAS ANALITICAS: CE CON DIFERENTES MODOS DE SEPARACION Y POLARIDADES; LC-MS Y GC-MS PARA OBTENER LA IMAGEN MAS GENERAL DE LA MUESTRA POSIBLE,3,-DESARROLLAR UN SISTEMA DE CROMATOGRAFIA LIQUIDA BIDIMENSIONAL CON DETECTOR DE MASAS (2D LC-MS) PARA INTENTAR OBTENER TODA LA INFORMACION EN UNA SOLA OPERACION, LA PRIMERA APROXIMACION SE DESARROLLARA CON PATRONES REPRESENTATIVOS DE LA COMPOSICION DEL PLASMA Y LA ORINA CUBRIENDO UN AMPLIO RANGO DE POLARIDADES Y CARACTERISTICAS QUIMICAS, 4,-EVALUAR METODOS DE PRE-TRATAMIENTO DE DATOS YA EXISTENTES (CORRECCION DE LINEA BASE, ALINEAMIENTO, ESCALADO Y NORMALIZADO) PARA DESCUBRIR EN LA PRACTICA LAS APORTACIONES, VENTAJAS Y LIMITACIONES DE LAS DISTINTAS POSIBILIDADES Y ESTABLECER UN PROTOCOLO CON EL PROCEDIMIENTO MAS ADECUADO5,-CORRELACIONAR LOS CAMBIOS EN LOS PERFILES DE METABOLITOS Y ASOCIARLOS AL ESTADO FISIOLOGICO, PREVIO AL EXACTO CONOCIMIENTO DE LOS COMPONENTES INDIVIDUALES DEL PERFIL, PARA A CONTINUACION DISCRIMINAR LOS COMPUESTOS QUE DAN LUGAR A LA CLASIFICACION Y ESTABLECER LAS RELACIONES BIOLOGICAS ENTRE ELLOS,EN RESUMEN, EL OBJETIVO GLOBAL DEL PROYECTO NO ES ABORDAR EL ESTUDIO DE UNA PATOLOGIA, SINO IMPLEMENTAR LAS HERRAMIENTAS ANALITICAS Y MATEMATICAS PARA DETERMINAR LAS RELACIONES EXISTENTES ENTRE EXPRESION GENETICA Y PROCESO METABOLICO EN CUALQUIER SITUACION EN ESTUDIO, Plataforma analítica\quimiometría\perfiles metabólicos\fluidos biológicos\metabolómica\LC-MS\GC-MS\CE