Innovating Works

BFU2011-24843

Financiado
CRISTALOGRAFIA DE FIBRAS DE BACTERIOFAGOS Y DE ADENOVIRUS
LA SELECCION DE LA CELULA CORRECTA A INFECTAR ES UN PASO CRUCIAL EN LA INFECCION VIRAL. EN LOS ADENOVIRUS Y EN MUCHOS BACTERIOFAGOS, ESTE RECONOCIMIENTO INICIAL SE REALIZA A TRAVES DE PROTEINAS FIBRILARES. EN ESTE PROYECTO PROPONE... LA SELECCION DE LA CELULA CORRECTA A INFECTAR ES UN PASO CRUCIAL EN LA INFECCION VIRAL. EN LOS ADENOVIRUS Y EN MUCHOS BACTERIOFAGOS, ESTE RECONOCIMIENTO INICIAL SE REALIZA A TRAVES DE PROTEINAS FIBRILARES. EN ESTE PROYECTO PROPONEMOS RESOLVER LAS ESTRUCTURAS DE FIBRAS DE BACTERIOFAGOS Y ADENOVIRUS USANDO CRISTALOGRAFIA DE RAYOS X Y LOS COMPLEJOS FORMADOS CON SUS MOLECULAS RECEPTORAS NATURALES O ANALOGOS DE LAS MISMAS. LOS ADENOVIRUS Y LOS FAGOS T4, T5, T7 Y LAMBDA SON MODELOS IMPORTANTES EN BIOLOGIA MOLECULAR, PERO LOS RESULTADOS QUE ESPERAMOS OBTENER TAMBIEN SERAN RELEVANTES POR SUS POSIBLES APLICACIONES, COMO LA TERAPIA GENICA CON ADENOVIRUS O LA IDENTIFICACION Y ELIMINACION DE BACTERIAS USANDO BACTERIOFAGOS.LOS FAGOS T4, T5, T7 Y LAMBDA RECONOCEN LA BACTERIA HOSPEDADORA MEDIANTE PROTEINAS FIBRILARES. LAS FIBRAS LARGAS DE LA COLA DE T4 SON COMPLEJOS FORMADOS POR UN TRIMERO DE GP34 (EL MUSLO), UN MONOMERO DE GP35 (LA RODILLA) Y FINALMENTE UN TRIMERO DE GP36 Y OTRO DE GP37 (LOS DOS ULTIMOS FORMAN CONJUNTAMENTE LA PANTORRILLA Y EL PIE). RECIENTEMENTE HEMOS DETERMINADO LA ESTRUCTURA DEL FRAGMENTO DE GP37 QUE CONSTITUYE EL EXTREMO FINAL DE LA FIBRA, EL CUAL MOSTRO UN NUEVO PLEGAMIENTO MEDIADO POR LA UNION DE CATIONES DE HIERRO. TAMBIEN HEMOS CONSTRUIDO CLONES DE EXPRESION DE GP37 CASI COMPLETA, DE GP36 Y DE GP35, Y OBTENIDO CRISTALES DE UN FRAGMENTO C-TERMINAL DE GP34. PROPONEMOS MEJORAR LOS CRISTALES DE GP34, OBTENER CRISTALES DE GP35, GP36 Y DE FRAGMENTOS DE MAYOR TAMAÑO DE GP37 Y RESOLVER SU ESTRUCTURA. TAMBIEN INTENTAREMOS COCRISTALIZAR EL DOMINIO DE UNION AL RECEPTOR DE GP37 CON SACARIDOS ANALOGOS A SUS RECEPTORES LIPOPOLISACARIDOS Y, SI ES POSIBLE, CON SU OTRO RECEPTOR OMPC.LOS FAGOS T5, T7 Y LAMBDA POSEEN FIBRAS FORMADAS POR HOMOTRIMEROS DE PB1, GP17 Y STF, RESPECTIVAMENTE. CONSTRUIREMOS CLONES DE EXPRESION PARA PB1 DE T5 (TAMBIEN LLAMADA LTF) CON EL OBJETIVO DE OBTENER PROTEINA SOLUBLE PARA PRUEBAS DE CRISTALIZACION. PARA GP17 DE T7 YA HEMOS CONSTRUIDO CLONES DE EXPRESION QUE PRODUCEN MILIGRAMOS DE PROTEINA SOLUBLE Y OBTENIDO LOS PRIMEROS CRISTALES. EN TODOS LOS CASOS INTENTAREMOS OBTENER CRISTALES QUE PERMITAN LA RESOLUCION DE LAS ESTRUCTURAS MEDIANTE CRISTALOGRAFIA DE RAYOS X. YA HEMOS OBTENIDO UN CLON DE EXPRESION PARA LA FIBRA DEL FAGO LAMBDA (STF), QUE PRODUCE PROTEINAS SOLUBLES CORRECTAMENTE PLEGADAS E INTENTAREMOS SU CRISTALIZACION.LOS ADENOVIRUS SE UTILIZAN COMO VACUNAS EXPERIMENTALES Y COMO VECTORES EN TERAPIA GENICA Y TRATAMIENTOS ANTICANCERIGENOS. EN LA ACTUALIDAD NO SE CONOCE LA ESTRUCTURA DE NINGUNA FIBRA DE DOS GENERA DE ADENOVIRUS, LOS ATADENOVIRIDAE Y SIADENOVIRIDAE. EL GRUPO DE LA DRA. CARMEN SAN MARTIN DEL CNB ESTA REALIZANDO LA RECONSTRUCCION TRIDIMENSIONAL MEDIANTE CRIOMICROSCOPIA ELECTRONICA DEL ADENOVIRUS 1 DE SERPIENTE, UN ATADENOVIRUS. CLONAREMOS Y EXPRESAREMOS LA PROTEINA QUE CONSTITUYE LA FIBRA DE ESTE VIRUS CON EL OBJETIVO DE RESOLVER SU ESTRUCTURA. OTRO ATADENOVIRUS DE INTERES ES EL ADENOVIRUS OVINO TIPO 7, QUE ESTA SIENDO INVESTIGADO COMO VECTOR PARA TERAPIA GENICA HUMANA Y EL ADENOVIRUS DE PATO TIPO 1 POR SU INTERES VETERINARIO. TAMBIEN INTENTAREMOS OBTENER UN CLON DE EXPRESION DE UNA FIBRA DE ALGUN SIADENOVIRUS, EL ADENOVIRUS DE RANA 1 O EL ADENOVIRUS DE PAVO 3. EL CONOCIMIENTO DE NUEVAS ESTRUCTURAS DE FIBRAS DE ADENOVIRUS AMPLIARA EL CONJUNTO DE HERRAMIENTAS A DISPOSICION DE LOS INVESTIGADORES QUE BUSCAN DIRIGIR VECTORES BASADOS EN ADENOVIRUS HACIA CELULAS ESPECIFICAS. DENOVIRUS\VIROLOGIA\UNION AL RECEPTOR\CRISTALOGRAFIA DE PROTEINAS\PROTEINAS FIBROSA\FIBRA\BACTERIOFAGO ver más
01/01/2011
CSIC
140K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2011-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 140K€
Líder del proyecto
AGENCIA ESTATAL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGA... No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.
Perfil tecnológico TRL 2-3 552M