Descripción del proyecto
¿COMO SE LIBERA EL CONTENIDO DE LAS VESICULAS SECRETORAS? ESTA PREGUNTA ES FUNDAMENTAL PARA ENTENDER COMO SE COMUNICAN LAS CELULAS ENTRE SI PARA LA FORMACION DE TEJIDOS Y ORGANOS DE TAMAÑO Y FUNCION CORRECTA, PARA DISEÑAR NUEVAS TERAPIAS EN ENFERMEDADES RELACIONADAS CON DEFECTOS DE SECRECION DE PROTEINAS TALES COMO INSULINA, FACTORES DE CRECIMIENTO, NEUROTRANSMISORES Y ENDORFINAS, ESTAS PROTEINAS, UNA VEZ SECRETADAS POR LA CELULA CONTROLAN PROCESOS BIOLOGICOS QUE NOS PERMITEN CRECER, PENSAR, DORMIR Y COMBATIR ENFERMEDADES, DISEÑAMOS UN AMPLIO CRIBAJE GENOMICO PARA IDENTIFICAR NUEVAS PROTEINAS NECESARIAS PARA EL TRANSPORTE Y ORGANIZACION DEL GOLGI (BARD ET AL, 2006), ENTRE ESTAS SE INCLUYEN TANGO1,NECESARIA PARA EL TRANSPORTE DEL COLAGENO ; EG5, QUINASA NECESARIA PARA EL TRANSPORTE DE CARTS, Y TWINSTAR O COFILINA, NECESARIOS PARA EL CORTE DE LOS FILAMENTOS DE ACTINA, LA PROTEINA COFILINA ES NECESARIA EN EL PAPEL DINAMICO QUE JUEGAN EL CITOESQUELETO DE ACTINA EN LA CLASIFICACION DE PROTEINAS DE SECRECION, EL SILENCIAMIENTO DE COFILINA MEDIANTE SIRNA, TUVO COMO RESULTADO LA SECRECION ALEATORIA DE PROTEINAS EN CELULAS HELA, MUCHAS DE LAS PROTEINAS DE SECRECION QUEDABAN RETENIDAS EN EL TGN, OTRAS ERAN SECRETADAS A RITMO NORMAL O INCLUSO MAS RAPIDO Y ALGUNAS DE LAS HIDROLASAS LISOSOMALES ERAN SECRETADAS, LA MAYOR SORPRESA FUE COMPROBAR QUE UNA PROTEINA SOLUBLE DE DEL GOLGI, CAB45, ERA SECRETADA (VON BLUME ET AL,, 2009), LA INMUNOPRECIPITACION DE COFILINA, RESULTO EN LA COINMUNOPRECIPITACION DE SPCA1, UNA BOMBA DE CA, CON MULTIPLES DOMINIOS TRANSMEMBRANALES , DEMOSTRAMOS QUE SPCA1 LOCALIZADA EN EL TGN, ERA NECESARIA PARA EL IMPORTE DE CA2+ DENTRO DEL TGN Y PARA LA CLASIFICACION DE LAS PROTEINAS SECRETORAS (VON BLUME ET AL,, 2011), DEMOSTRAMOS QUE SPCA1 CO-PRECIPITA CON CAB45, ENCONTRAMOS QUE LA UNION DE CAB45 A LAS PROTEINAS DE SECRECION ES DEPENDIENTE DE CA2+ Y ESTA INTERACCION SE PIERDE AL MUTAGENIZAR LOS DOMINIOS DE UNION A CA2+ DE CAB45 (VON BLUME ET AL,, 2012), LOS ORTOLOGOS DE COFILINA Y SPCA1 EN SACCHAROMYCES CEREVISIAE, TAMBIEN SON NECESARIOS PARA LA CLASIFICACION DE PROTEINAS DE SECRECION EN LAS CISTERNAS DEL APARATO DE GOLGI (CURWIN ET AL,, 2012), EN BASE A ESTOS RESULTADOS, PROPONEMOS QUE EL COMPLEJO COFILINA-ACTINA DINAMICA-SPCA1-CA2+-CAB45, ES NECESARIO PARA LA CLASIFICACION DE PROTEINAS DE SECRECION QUE TIENE LUGAR EN EL TGN, ESTOS RESULTADOS PERMITEN PLANTEAR MUCHAS CUESTIONES RELEVANTES, POR EJEMPLO: ¿EN QUE MEDIDA LA UNION DE PROTEINAS DE CARGO A CAB45, AYUDA A LA CLASIFICACION Y EMPAQUETAMIENTO DE DICHAS PROTEINAS PARA LA SALIDA DEL TGN?, ¿POR QUE CAB45 NO SE SECRETA, MIENTRAS LA PROTEINA DE CARGA UNIDA A ELLA, LO ES?,HEMOS IDENTIFICADO UNA NUEVA CLASE DE PROTEINAS TRANSPORTADORAS QUE SE FORMAN EN EL TGN Y QUE CONTIENEN PROTEINAS DE SECRECION Y DE MEMBRANA PLASMATICA, ESTOS TRANSPORTADORES, LLAMADOS CARTS, CONTIENEN PROTEINAS COMO LA LYSOZYMA C Y DESMOGLEIN, QUE SE UNEN A CAB45 DE FORMA CA2+ DEPENDIENTE (WAKANA ET AL,, 2012), ESTOS TRANSPORTADORES, PERMITEN DAR UNA EXPLICACION A POR QUE PROTEINAS DE TRANSPORTE UNIDAS A CAB45 SON EXPORTADAS DEL GOLGI, MIENTRAS QUE CAB45 QUEDA EN EL PROPIO ORGANULO,TODO JUNTO, NUESTROS RESULTADOS AYUDARAN A PONER AL DESCUBIERTO EL MECANISMO DE CLASIFICACION DE LAS PROTEINAS EN EL TGN, ESTO ES ESENCIAL PARA COMPRENDER EL MECANISMO POR EL CUAL PROTEINAS COMO INSULINA, MUCINAS, COLAGENO, ANTICUERPOS FACTORES DE CRECIMIENTO Y HORMONAS SON CLASIFICADAS EN EL TGN Y SECRETADAS, CLASIFICACIÓN PROTEINAS\ SELECCIÓN Y SECRECIÓN DE PROTEINAS\ COFILIN\ SPCA1\ ACTIN\ CAB45\ CARTS\ EG5\ MEMBRANAS DE GOLGI