Descripción del proyecto
LAS VACUNAS ORALES SON MUY RECLAMADAS POR EL SECTOR DE LA ACUICULTURA QUE DEMANDA ALTERNATIVAS A LAS VACUNAS INYECTABLES QUE REQUIEREN EL MANEJO INDIVIDUAL DE LOS PECES, LO QUE PROVOCA EN LOS ANIMALES INMUNOSUPRESION MEDIADA POR ESTRES Y MORTALIDADES ASOCIADAS A LA MANIPULACION, A PESAR DE ESTO, LA MAYORIA DE LOS INTENTOS PREVIOS PARA OBTENER VACUNAS ORALES EFECTIVAS HAN FRACASADO TANTO EN PECES COMO EN MAMIFEROS, ESTO PUEDE SER CONSECUENCIA DE LOS ESTRICTOS MECANISMOS DE TOLERANCIA QUE SE DAN EN EL INTESTINO, YA QUE ESTA MUCOSA SE ENCUENTRA EN LA PRIMERA LINEA ANTE UNA EXPOSICION AL ANTIGENO, TENIENDO QUE MANTENER UN EQUILIBRIO DELICADO ENTRE LA TOLERANCIA Y LA RESPUESTA INMUNE EN UN AMBIENTE ACUATICO RICO EN MICROBIOS, LOS ADYUVANTES SE HAN DEFINIDO COMO UN GRUPO DE MOLECULAS ESTRUCTURALMENTE HETEROGENEAS CAPACES DE MODULAR LA INMUNOGENICIDAD INTRINSECA DE UN ANTIGENO, EN ESTE CONTEXTO, NUESTRO PROYECTO ESTA ENFOCADO A LA IDENTIFICACION DE ADYUVANTES APROPIADOS PARA LA VACUNACION ORAL EN PECES, DEFINIENDO CUALES DE ESTOS ADYUVANTES SON CAPACES DE MODIFICAR LA RESPUESTA INMUNE DE ANTIGENOS MODELOS DE TAL FORMA QUE SEAN ENTONCES CAPACES DE BURLAR LA TOLERANCIA INTESTINAL, COMPARAREMOS LA EFICACIA DE UNA AMPLIA SELECCION DE ADYUVANTES INCLUYENDO FLAGELINA, -GLUCANOS, EL TOXOIDE DE ESCHERICHIA COLI LT(R192G/L211A), BACTERIAS PROBIOTICAS Y LPS PARA DESATAR UNA RESPUESTA INMUNE SISTEMICA E INTESTINAL, EN PRIMER LUGAR ESTUDIAREMOS EX VIVO LOS EFECTOS DE ESTOS ADYUVANTES SOBRE LA ACTIVIDAD DE DOS DE LAS CELULAS PRINCIPALES EN EL ESTABLECIMIENTO DE UNA RESPUESTA INMUNE ADAPTATIVA ADECUADA, LAS CELULAS B Y LAS CELULAS DENDRITICAS (DCS), POSTERIORMENTE, ESTUDIAREMOS COMO LA ADMINISTRACION DE ESTOS ADYUVANTES AFECTA AL PORCENTAJE DE LAS DISTINTAS SUBPOBLACIONES LEUCOCITARIAS, SU ACTIVACION Y A LA PRODUCCION DE ANTICUERPOS Y CITOQUINAS, LA RESPUESTA INMUNE SE DETERMINARA INICIALMENTE EN PECES QUE HAN RECIBIDO LOS ADYUVANTES POR VIA ANAL (PARA ASEGURAR UNA DIRECTA ESTIMULACION DE LA MUCOSA) O POR INYECCION PERITONEAL (COMO CONTROL POSITIVO), UNA VEZ SE HAYAN SELECCIONADO DE ESTA FORMA LOS ADYUVANTES MAS ADECUADOS PARA ESTIMULACION DE MUCOSAS, ESTOS SE COMBINARAN CON DISTINTOS ANTIGENOS MODELOS, TALES COMO TNP-FICOLL (ANTIGENO INDEPENDIENTE DE CELULAS T) Y TNP-KLH (ANTIGENO DEPENDIENTE DE CELULAS T), LA ADMINISTRACION SERA ANAL U ORAL (TRAS ENCAPSULACION EN ALGINATO DE LOS ADYUVANTES) Y SE PROCEDERA A ESTUDIAR EN PROFUNDIDAD LA RESPUESTA ESPECIFICA DE ANTIGENO, FINALMENTE, UNA VEZ QUE EN EL SUBPROYECTO 2 SE ESTABLEZCA LA MEJOR ESTRATEGIA PARA LA INMUNIZACION ORAL FRENTE AL VIRUS DE LA NECROSIS PANCREATICA INFECCIOSA (IPNV), AMBOS SUBPROYECTOS COLABORARAN EN UN ULTIMO EXPERIMENTO EN EL QUE SE COMBINARA LA MEJOR ESTRATEGIA PARA PRESENTAR EL ANTIGENO CON EL MEJOR ADYUVANTE ORAL, ADEMAS, EN ESTE ENSAYO SE COMPARARA LA EFICACIA DE DISTINTOS REGIMENES DE ADMINISTRACION DE LA VACUNA, YA QUE POR EL MOMENTO ESTOS ESTUDIOS NUNCA SE HAN LLEVADO A CABO EN PECES A PESAR DE SER ESTE UN FACTOR CLAVE PARA GENERAR UNA RESPUESTA INMUNE ADECUADA, ESTOS ESTUDIOS CONTRIBUIRAN EN GRAN MANERA A LA OPTIMIZACION FUTURA DE VACUNAS ORALES EN PECES YA QUE LA ELECCION DE UN ADYUVANTE ADECUADO ES UN FACTOR ESENCIAL PARA EL OPTIMO FUNCIONAMIENTO DE LAS VACUNAS, VACUNAS ORALES\TRUCHA ARCOÍRIS\ADYUVANTES\INTESTINO\VIRUS DE LA NECROSIS PANCREÁTICA INFECCI