MICROALGAS RECOMBINANTES COMO PLATAFORMAS PARA LA PRODUCCION Y SUMINSTRO DE VACU...
MICROALGAS RECOMBINANTES COMO PLATAFORMAS PARA LA PRODUCCION Y SUMINSTRO DE VACUNAS ORALES Y PEPTIDOS ANTIMICROBIANOS EN ACUICULUTRA
LAS MICROALGAS HAN DEMOSTRADO UN GRAN POTENCIAL COMO FACTORIAS CELULARES PARA LA EXPRESION DE PROTEINAS RECOMBINANTES Y PUEDEN SER UNA EXCELENTE PLATAFORMA PARA LA PRODUCCION Y SUMINISTRO ORAL DE VACUNAS O PEPTIDOS ANTIMICROBIANOS...
LAS MICROALGAS HAN DEMOSTRADO UN GRAN POTENCIAL COMO FACTORIAS CELULARES PARA LA EXPRESION DE PROTEINAS RECOMBINANTES Y PUEDEN SER UNA EXCELENTE PLATAFORMA PARA LA PRODUCCION Y SUMINISTRO ORAL DE VACUNAS O PEPTIDOS ANTIMICROBIANOS, QUE REFUERCEN EL SISTEMA INMUNITARIO DE LAS ESPECIES ACUICOLAS. LA MAYORIA, NO SOLO NO SON PATOGENAS, SINO QUE SON ESPECIES GRAS, Y DIVERSOS ESTUDIOS DEMUESTRAN QUE LA ADICION DE CANTIDADES MODERADAS DE MICROALGAS EN LA DIETA (3-10%) TIENE EFECTOS POSITIVOS EN EL CRECIMIENTO, LA MICROBIOTA INTESTINAL, LA RESISTENCIA A ENFERMEDADES O LA RESPUESTA AL ESTRES DE LAS ESPECIES ACUICOLAS. LAS MICROALGAS PUEDEN TAMBIEN SERVIR COMO VEHICULO PARA EL SUMINISTRO ORAL DE VACUNAS DE DNA. AUNQUE NO EXISTE INFORMACION PREVIA DE VACUNAS DE DNA PRODUCIDAS EN MICROALGAS, SI HAY REFERECIAS DEL USO DE BACTERIAS O LEVADURAS PARA TAL FIN. ENTRE LAS VENTAJAS QUE OFRECEN LAS MICROALGAS PARA EL SUMINISTRO DE VACUNAS ORALES SON: DURA PARED CELULAR QUE OFRECE PROTECCION DE LOS PEPTIDOS, ANTIGENOS O DNA A SU PASO A TRAVES DEL SISTEMA DIGESTIVO DEL HOSPEDADOR; PRESENCIA DE GLUCANOS EN SU PARED CELULAR QUE TIENEN PROPIEDADES ADYUVANTES POTENCIANDO LA RESPUESTA INMUNE; Y EL HECHO DE QUE SU CULTIVO NO OCUPA SUELO FERTIL Y PUEDE REALIZARSE EN REACTORES CERRADOS SIN DISEMINACION AL MEDIO AMBIENTE, ELUDIENDO ASI LAS RETICENCIAS QUE DESPIERTAN LOS CULTIVOS TRANSGENICOS AGRICOLAS.EN ESTE PROYECTO UTILIZAREMOS DOS APROXIMACIONES DIFERENTES PARA CONSEGUIR VACUNAS ORALES FRENTE A NODAVIRUS. POR UNA PARTE TRANSFORMAREMOS LAS MICROALGAS CLOROFITAS CHLAMYDOMAS REINHARDTII Y SCEDESMUS ALMERIENSIS CON UN MODULO DE EXPRESION ANIMAL QUE CONTIENE EL GEN QUE CODIFICA LA PROTEINA DE CAPSIDA DE NODAVIRUS (CP-NNV) FUSIONADA CON LA GFP FLUORESCENTE, LO QUE PERMITIRA LA GENERACION DE VLP-GFP FLUORESCENTES EN LOS JUVENILES ALIMENTADOS CON ESTAS MICROALGAS Y EL SEGUIMIENTO IN VIVO DE LA PRODUCCION DEL ANTIGENO Y DE LA FORMACION DE VLP EN DISTINTOS TEJIDOS DEL PEZ. LA FUSION CON LA GFP NOS PERMITIRA EVALUAR LA EFICIENCIA DE LAS MICROALGAS PARA LA TRANSFECCION DEL DNA EN LA MUCOSA GASTRICA DE LUBINA. POR OTRA PARTE USAREMOS LAS MICROALGAS COMO PLATAFORMA PARA LA PRODUCCION DE LA PROTEINA CP Y PARTICULAS VLP DE NODAVIRUS Y COMO VEHICULO PARA SU ADMINISTRACION ORAL EN LUBINA. EN ESTE CASO UTILIZAREMOS PLASMIDOS, COMO EL PHYCO69 O EL PCHLAMY4, QUE GARANTIZAN ALTOS NIVELES DE EXPRESION EN MICROALGAS MEDIANTE LA FUSION TRADUCCIONAL DEL TRANSGEN CON UN GEN DE RESISTENCIA A UN ANTIBIOTICO MEDIANTE UN PEPTIDO AUTOHIDROLIZABLE. DE ESTE MODO EL PRODUCTO DEL GEN DE FUSION SE AUTOPROCESA DANDO LUGAR A LAS DOS PROTEINAS. EL CRIBADO DE LOS TRANSFORMANTES MEDIANTE CONCENTRACIONES CRECIENTES DE ANTIBIOTICO PERMITE LA SELECCION DE AQUELLOS CON MAYOR PRODUCCION DE LA PROTEINA DE RESISTENCIA Y, CONSECUENTEMENTE, DE LA PROTEINA CP-NNV. ADEMAS OBTENDREMOS CEPAS MICROALGALES PRODUCTORAS DE ALTA CANTIDAD DE AMPS PARA INVESTIGAR SU PAPEL ANTIMICROBIANO Y SU CAPACIDAD PARA REFORZAR EL SISTEMA INMUNITARIO DE LUBINA. Y DISEÑAREMOS NUEVAS ESTRATEGIAS PARA SEGUIR OPTIMIZANDO LA EXPRESION ESTABLE Y EFICIENTE DE PROTEINAS RECOMBINANTES EN MICROALGAS, MEDIANTE LA SELECCION DE NUEVOS PROMOTORES ENDOGENOS PARA SCENEDESMUS, MICROALGA DE GRAN IMPORTANCIA INDUSTRIAL, Y LA OPTIMIZACION DE LA TRANSFORMACION DEL PLASTOMA CLOROPLASTICO. EL OBJETIVO GLOBAL DE ESTE SUBPROYECTO ES OBTENER VACUNAS ORALES ECONOMICAS Y SEGURAS BASADAS EN MICROALGAS PARA LA PREVENCION DE INFECCIONES POR NODAVIRUS EN LUBINA. ICROALGAS\LUBINA\NODAVIRUS\MICROALGAS TRANSGÉNICAS\PROTEINAS RECOMBINANTES\PEPTIDOS ANTIMICROBIANOS\VACUNAS ORALESver más
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