Descripción del proyecto
LOS METODOS ACTUALES DE SEGUIMIENTO DE LA INTERACCION PATOGENO-HOSPEDADOR ESTAN MUY LEJOS DE SER IDEALES PARA PODER ENTENDER LOS PROCESOS BIOLOGICOS QUE OCURREN EN LOS ANIMALES IN VIVO, EN LOS ENSAYOS CONVENCIONALES DE INTERACIONES PATOGENO-HOSPEDADOR SE REQUIERE QUE LOS ANIMALES EXPERIMENTALES SEAN EUTANASIADOS A TIEMPOS VARIABLES PARA IDENTIFICAR LOS SITIOS DE INFECCION Y PODER CUANTIFICAR LAS CANTIDADES DE PATOGENO EN DISTINTOS LUGARES ANATOMICOS, ESTE DESARROLLO ESTRATEGICO UTILIZADO PARA ANALIZAR LA PATOGENESIS Y EL TRATAMIENTO, TIENE GRANDES LIMITACIONES PARA PODER SER APLICADO AL ESTUDIO DE LA INFECCION Y LA EFICACIA DE NUEVOS FARMACOS, ENTRE LAS LIMITACIONES CABE DESTACAR: I) EL ANALISIS INDIVIDUAL DE ANIMALES A VARIOS TIEMPOS PUNTUALES, EXCLUYE UN SEGUIMIENTO REAL EN LA PROGRESION ESPACIO-TEMPORAL EN INFECCIONES EN EL MISMO ANIMAL, QUE PUEDEN REVELAR VARIACIONES BIOLOGICAMENTE RELEVANTES EN LA INTERACCION PATOGENO-HOSPEDADOR, II) LA DISEMINACION DE UN PATOGENO A UN SITIO INESPERADO DE INFECCION SE PUEDE PERDER YA QUE EL TEJIDO INFECTADO NO FUE RECOGIDO Y ANALIZADO, III) ENSAYOS CONVENCIONALES DE PATOGENESIS REQUIEREN UN ENORME NUMERO DE ANIMALES PARA OBTENER DATOS ESTADISTICAMENTE SIGNIFICATIVOS EN TODOS LOS PUNTOS DE TIEMPO DEL ENSAYO, PARA INVESTIGAR MEJOR LA EXPANSION DEL PARASITO, AMBOS EX VIVO E IN VIVO EN CELULAS, DE FORMA REAL, NO DESTRUCTIVA, SE NECESITAN METODOS DE MONITORIZACION EN TIEMPO REAL, QUE SEAN ADAPTABLES A LOS MODELOS DE EXPERIMENTACION ANIMAL, CON ESTE FIN LOS GENES REPORTEROS OFRECEN UN METODO DE MARCADO DEL MICROORGANISMO NO INVASIVO QUE ES INOCUO Y PERMITE LA DETECCION SENSIBLE DE CELULAS METABOLICAMENTE ACTIVAS POR IMAGEN BIOFOTONICA, ESTE PROYECTO SE SOLICITA COMO CONTINUACION DEL CONCEDIDO EN LA CONVOCATORIA ANTERIOR (AGL2009-11935; PATOGENESIS DE LA LEISHMANIOSIS VISCERAL Y CUTANEA MEDIANTE IMAGEN IN VIVO A TIEMPO REAL: APLICACIONES AL DESARROLLO DE NUEVOS FARMACOS, AUNQUE EL PROYECTO COMIENZA EN EL 2010 TENEMOS ALGUNOS RESULTADOS PREVIOS QUE SE ADJUNTAN COMO ANEXO Y PRETENDEMOS DESARROLLAR NUEVOS OBJETIVOS RELACIONADOS CON LAS INFECCIONES TANTO IN VIVO COMO IN VITRO:1, CONFIRMAR LA ESTABILIDAD DE LOS REPORTEROS EN LOS PARASITOS RECOGIDOS DE LA LESION,2, CONFIRMAR QUE LA CEPA SALVAJE Y RECOMBINANTES PRODUCEN EL MISMO PROCESO CLINICO EN RATONES BALB/C (TAMAÑO Y VELOCIDAD DE DESARROLLO DE LA LESION)3, ANALIZAR LAS FORMAS DE EXPRESION DE LOS REPORTEROS EN CADA ESTADO DEL DESARROLLO (PROMASTIGOTE, AMASTIGOTE DE LESION, AMASTIGOTE DE ANIMAL)4, VALIDAR LOS ENSAYOS UTILIZANDO DROGAS DE ACTIVIDAD CONOCIDA SOBRE LEISHMANIA COMO LA MILTEFOSINA,5, PROBAR OTROS COMPUESTOS QUE EJERCEN SU ACCION SOBRE LA DNA TOPOISOMERASA IB (DIANA RECONOCIDA EN EL PARASITO, HTTP://WWW,TDRTARGETS,ORG/),