Descripción del proyecto
EN ESTE PROYECTO DE INVESTIGACION SE ESTUDIARA EL DETERMINISMO DEL SEXO Y LA DIFERENCIACION GONADAL EN ANFIBIOS UTILIZANDO XENOPUS TROPICALIS Y BUFO BUFO COMO ANIMALES MODELO,SE HA ESCOGIDO LA ESPECIE X, TROPICALIS POR LAS VENTAJAS QUE OFRECE, AL TRATARSE DE UN MODELO DIPLOIDE EN ANFIBIOS PARA EL QUE SE HAN DESARROLLADO NUMEROSAS HERRAMIENTAS METODOLOGICAS, EN CUANTO A LA ESPECIE B, BUFO, COMO TODAS LAS ESPECIES DE SU GENERO, TIENE LA PARTICULARIDAD DE DESARROLLAR OVARIOS INDIFERENCIADOS (LLAMADOS ORGANOS DE BIDDER) EN LA REGION CRANEAL DE LAS GONADAS MASCULINAS Y FEMENINAS, ESTA CARACTERISTICA NOS PERMITIRA ESTUDIAR COMO SE PRODUCE EL DESARROLLO OVARICO EN UN ENTORNO MASCULINO, Y COMO SE REGULA LA ENTRADA EN MEIOSIS DE LAS CELULAS GERMINALES LOCALIZADAS EN EL ORGANO DE BIDDER, QUE PROPORCIONA UN AMBIENTE FEMENINO EN UN ENTORNO SOMETIDO A LAS SEÑALES DEL TESTICULO,PARA IDENTIFICAR EL SISTEMA CROMOSOMICO DE DETERMINISMO DEL SEXO EN X, TROPICALIS SE ANALIZARA LA PROPORCION DE SEXOS OBTENIDA EN DISTINTOS TIPOS CRUZAMIENTOS (GINOGENESIS Y PROGENITORES DE SEXO REVERTIDO), EN EL CASO DE LA ESPECIE B, BUFO, LA BUSQUEDA DE LA PAREJA DE CROMOSOMAS SEXUALES SE REALIZARA MEDIANTE TECNICAS CITOGENETICAS, PONIENDO DE MANIFIESTO LAS DIFERENCIAS QUE HAYAN SURGIDO ENTRE LOS CROMOSOMAS Z Y W DE ESTA ESPECIE MEDIANTE HIBRIDACION GENOMICA COMPARATIVA (CGH) Y BUSCANDO REGIONES DE HOMOLOGIA CON LOS CROMOSOMAS SEXUALES DE B, MARINUS (ZZ/ZW HETEROMORFICOS) MEDIANTE ¿CHROMOSOME PAINTING¿,CON EL FIN DE FACILITAR LA EJECUCION DE ESTE PROYECTO, Y COMO DESARROLLO DE NUEVAS HERRAMIENTAS DE UTILIDAD EN EL ESTUDIO DE ANFIBIOS, EN AMBAS ESPECIES SE BUSCARAN MARCADORES MOLECULARES ESPECIFICOS DE CROMOSOMAS SEXUALES QUE PERMITAN DETERMINAR EL SEXO GENETICO DE UN INDIVIDUO MEDIANTE PCR (EVITANDO ASI LA NECESIDAD DE ANALIZAR HISTOLOGICAMENTE LAS GONADAS EN DESARROLLO),FINALMENTE, EL ESTUDIO DEL DESARROLLO GONADAL SE REALIZARA MEDIANTE DOS APROXIMACIONES, POR UN LADO, EN AMBAS ESPECIES SE CLONARAN GENES ORTOLOGOS A GENES CON EXPRESION DIFERENCIAL EN GONADAS EN DESARROLLO EN OTROS VERTEBRADOS, EL ANALISIS DEL PATRON DE EXPRESION DE ESTOS GENES EN RELACION CON LOS CAMBIOS MORFOLOGICOS QUE TIENEN LUGAR EN LA GONADA DURANTE SU DESARROLLO NOS PERMITIRA ESTABLECER EL PAPEL DE LOS MISMOS EN ESTE PROCESO, COMO SEGUNDA APROXIMACION, SE BUSCARAN NUEVOS GENES CON EXPRESION DIFERENCIAL DURANTE EL DESARROLLO GONADAL EN X, TROPICALIS MEDIANTE EXPERIMENTOS CON MICROARRAYS, EL ANALISIS DE LOS DATOS OBTENIDOS REVELARA NUEVOS GENES IMPLICADOS EN ESTE PROCESO EN ANFIBIOS, Y ABRIRA NUEVAS VIAS DE ESTUDIO, CROMOSOMAS SEXUALES\DESARROLLO GONADAL\ANFIBIOS\OGANO DE BIDDER\XENOPUS\BUFO