Descripción del proyecto
EL OBJETIVO DE LA INVESTIGACION PROPUESTA ES LA MEJORA DE LA EFICIENCIA DEL USO DEL AGUA Y DE LA NUTRICION DE K+ EN CONDICIONES DE ESTRES SALINO, SOBRE LA BASE DE UNA ADECUADA REGULACION DE LAS CONCENTRACIONES INTERNAS DE NA+ EN LOS DIFERENTES TEJIDOS, DICHA REGULACION DEBE ESTAR MEDIADA POR DIFERENTES TRANSPORTADORES DE NA+, QUE CONTROLAN TANTO SU EXTRUSION AL MEDIO, COMO LA CARGA Y DESCARGA XILEMATICA Y/O FLOEMATICA, SE UTILIZARA EL TOMATE COMO PLANTA MODELO, CON UN TALLO DESARROLLADO, IDONEA PARA LA INVESTIGACION DEL PROCESO TRANSPORTE DE IONES A LARGA DISTANCIA, ASI COMO POR SU INTERES AGRONOMICO, EN PROYECTOS PREVIOS SE HA VENIDO ESTUDIANDO EL PAPEL QUE JUEGAN EN TALES PROCESOS EN TOMATE, ANTIPORTADORES CATION/H+, SOS1 (Y SUS PROTEINAS REGULADORAS, SOS2 Y SOS3) Y NHAD1, ASI COMO TRANSPORTADORES HKT, MEDIANTE UN ABORDAJE FUNCIONAL IN PLANTA, POR SOBREEXPRESION Y SILENCIAMIENTO GENICO, EN EL PRESENTE PROYECTO SE PRETENDE AVANZAR EN EL CONOCIMIENTO DE LA FUNCION DE LOS TRANSPORTADORES HKT1 DE TOMATE AISLADOS EN NUESTRO LABORATORIO (SLHKT1;1, SLHKT1;2,), QUE COMO TODOS LOS MIEMBROS CARACTERIZADOS DE LA SUBFAMILIA 1, SE CREE QUE TRANSPORTAN NA+ DE MANERA ESPECIFICA, PARTICIPANDO EN SU DESCARGA XILEMATICA Y QUIZA EN SU RECIRCULACION HACIA LA RAIZ, RESULTADOS PREVIOS REVELARON, UNA AGRUPACION DE QTLS MAYORITARIOS EN UNA REGION GENOMICA DEL CROMOSOMA 7, QUE DETERMINAN UN AUMENTO DE LA CONCENTRACION DE NA+ Y UNA DISMINUCION DE LA DE K+ EN TALLOS Y HOJAS BAJO CONDICIONES SALINAS, EN LINEAS RECOMBINANTES PURAS (RILS) DE SOLANUM LYCOPERSICUM VAR CERASIFORME, QUE PORTAN INTROGRESIONES CROMOSOMICAS DERIVADAS DE SU CRUCE CON S, CHEESMANII (UNA ESPECIE HALOTOLERANTE) (VILLALTA ET AL 2008), EN DICHA REGION, Y COINCIDENTES CON LA POSICION DE MAXIMA DE SIGNIFICACION DEL VALOR LOD PARA DICHOS QTLS, PARTICULARMENTE DE LKC7,1, QUE DETERMINA LA CONCENTRACION DE K+ EN HOJA, SE LOCALIZARON LOS GENES HKT1;1, HKT1;2, DADO EL PAPEL ATRIBUIDO A ESTOS TRANSPORTADORES EN EL CONTROL DEL TRANSPORTE DE NA+ A LARGA DISTANCIA Y EN LA HOMEOSTASIS DE K+ EN ARABIDOPSIS Y CEREALES (HORIE ET AL 2009), LAS VARIANTES ALELICAS DE HKT1 DE S, CHEESMANII INTROGRESADAS SON OBVIAS CANDIDATAS A SUBYACER FUNCIONALMENTE EN ESTOS QTLS, CON ESTE FIN, SE INVESTIGARA SU CONTRIBUCION MEDIANTE EL SILENCIAMIENTO ESTABLE DE LA EXPRESION DE CADA UNO DE ELLOS EN DOS LINEAS CASI-ISOGENICAS (NIL) DE TOMATE, DIFERENCIADAS UNICAMENTE EN QUE UNA DE ELLAS PORTA LA INTROGRESION DE LA VARIANTE ALELICA DE CHEESMANII, Y LA OTRA, EL ALELO DE LYCOPERSICUM, SE EVALUARA EL POTENCIAL BIOTECNOLOGICO DE LA SOBREEXPRESION DE LAS VARIANTES ALELICAS DE HKT1; Y HKT1;2, MEDIANTE SILENCIAMIENTO DE SOS1 EN TOMATE HEMOS MOSTRADO LA RELEVANCIA QUE ESTE TRANSPORTADOR JUEGA BAJO CONDICIONES SALINAS EN LA DISTRIBUCION DEL NA+ EN LOS DIFERENTES ORGANOS DE LA PLANTA E INDIRECTAMENTE EN LA NUTRICION DEL K+ (OLIAS ET AL, 2009A, 2009B), NUESTRA HIPOTESIS ES QUE LA ACCION DE SLSOS1 DEBE ESTAR COORDINADA CON LA DE HKT1, PARA CONTROLAR EL TRANSPORTE DE NA+ A LARGA DISTANCIA, E INDIRECTAMENTE EL DE K+, UN ASPECTO QUE ES CLAVE EN LA TOLERANCIA DEL TOMATE A LA SALINIDAD, PARA ELLO, SE LLEVARA A CABO LA LOCALIZACION DE LAS PROTEINAS HKT1 Y SE ANALIZARA EL PERFIL DE EXPRESION DE LOS GENES SOS1 Y HKT1 EN FUNCION DEL ESTADIO DE DESARROLLO DE LOS ORGANOS DE LA PLANTA DE LAS LINEAS NIL, Y EN LA LINEA SILENCIADA DE SOS1, FINALMENTE, SE CONTINUARA CON EL ANALISIS DE LA FUNCION DE NHAD1, UN ANTIPORTADOR PUTATIVO NA+/H+ DE LOCALIZACION PLAST