Descripción del proyecto
EL OBJETIVO PARTICULAR DE ESTE SUBPROYECTO, COMO PARTE DEL PROYECTO COORDINADO DIMEXT, ES EL DESARROLLO E IMPLEMENTACION DE HERRAMIENTAS DE ADQUISICION Y ANALISIS DE IMAGEN Y SU USO PARA LA CUANTIFICACION DE LA EXTRAVASACION E INVASION CELULAR EN DISPOSITIVOS MICROFLUIDICOS, LOS RESULTADOS DE LA CUANTIFICACION SERAN DE UTILIDAD PARA ALIMENTAR CON DATOS CUANTITATIVOS LOS MODELOS COMPUTACIONALES CELULA-MATRIZ QUE SE DESARROLLARAN EN EL OTRO SUBPROYECTO DE ESTE PROYECTO COORDINADO Y PERMITIRAN UN CORRECTO DISEÑO Y DIMENSIONAMIENTO DEL DISPOSITIVO SIMPLIFICADO PARA LA MEDIDA DE LA CAPACIDAD DE EXTRAVASACION DE LAS CELULAS TUMORALES, PAR CONSEGUIR ESTE OBJETIVO GENERAL SE PLANTEAN LOS SIGUIENTES OBJETIVOS CONCRETOS: 1, DESARROLLAR Y REFINAR METRICAS BASADAS EN ANALISIS DE IMAGEN PARA CARACTERIZAR LA MIGRACION CELULAR, LA MORFOLOGIA CELULAR NUCLEO Y CITOPLASMA-, LA ESTRUCTURA DE LA MATRIZ EXTRACELULAR Y SU REMODELACION DURANTE LA MIGRACION CELULAR, A DISTINTOS NIVELES DE RESOLUCION, 2, UTILIZANDO DISPOSITIVOS MICROFLUIDICOS FISIOLOGICOS, REALIZAR EXPERIMENTOS DE EXTRAVASACION DE CELULAS DE LINEAS DE CANCER DE PULMON, MAMA Y PROSTATA A HIDROGELES BIOMIMETICOS DEL TEJIDO OSEO, CON DISTINTA COMPOSICION Y RIGIDEZ Y EN DISTINTAS CONDICIONES QUIMICAS -PRESENCIA O NO DE FACTORES QUIMICOS- 3, A PARTIR DE LOS EXPERIMENTOS REALIZADOS EN DISPOSITIVOS FISIOLOGICOS, DETERMINAR LOS UMBRALES DE LAS PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS ESTUDIADAS QUE LIMITAN LA EXTRAVASACION DE LAS CELULAS, ESTA INFORMACION SE UTILIZARA EN EL MODELADO Y FABRICACION DE UN DISPOSITIVO SIMPLIFICADO QUE EVALUE CON RAPIDEZ LA CAPACIDAD METASTATICA DE LAS CELULAS DEL CANCER,4, DESARROLLAR O REFINAR METRICAS BASADAS EN IMAGEN QUE PERMITAN MONITORIZAR EL AVANCE DE LAS CELULAS DEL CANCER EN EL MICRODISPOSITIVO SIMPLIFICADO, 5, DISEÑAR E IMPLEMENTAR UN PROTOTIPO DE DISPOSITIVO DE CAPTURA MICROSCOPICA PORTATIL MINIATURIZADO- PARA REALIZAR EL SEGUIMIENTO DE LA MIGRACION Y DEFORMACION CELULAR EN LOS DISPOSITIVOS SIMPLIFICADOS, ESTE PROTOTIPO SERVIRA COMO PRUEBA DE PRINCIPIO PARA UNA POSIBLE IMPLEMENTACION DEL SISTEMA DE DETECCION EN MODO HIGH-THROUGHPUT, QUE REQUERIRA LA MINIATURIZACION DEL MISMO CON EL FIN ADAPTARLO A LAS RESTRICCIONES DE ESPACIO DEBIDAS A LA INCUBACION Y PARALELIZACION DE LOS PROCESOS- TIPICA DE DICHOS ESCENARIOS DE ALTO RENDIMIENTO,6, REALIZAR EXPERIMENTOS DE EXTRAVASACION DE LAS CELULAS DEL CANCER EN EL DISPOSITIVO SIMPLIFICADO, DETERMINANDO SU CAPACIDAD PARA RECAPITULAR LOS EXPERIMENTOS REALIZADOS EN EL DISPOSITIVO FISIOLOGICO, Y POR LO TANTO SU CAPACIDAD PARA SER UTILIZADO PARA CUANTIFICAR LA CAPACIDAD METASTATICA DE LAS CELULAS DEL CANCER, SE UTILIZARAN INICIALMENTE LINEAS CELULARES DE PULMON, MAMA Y PROSTATA,7, VALIDAR LA UTILIDAD CLINICA DEL DISPOSITIVO SIMPLIFICADO UTILIZANDO (I) CULTIVOS PRIMARIOS DE DERRAMES PLEURALES DE PACIENTES DE PULMON Y MAMA, Y (II) CELULAS TUMORALES CIRCULANTES (CTCS) AISLADAS DE SANGRE DE PACIENTES CON CANCER DE PULMON, MAMA Y PROSTATA, MICROSCOPÍA\ANÁLISIS DE IMAGEN\BIOMECÁNICA\MODELADO COMPUTACIONAL\MICROFLUÍDICA\CÁNCER\METÁSTASIS\EXTRAVASACIÓN\MECANOBIOLOGÍA\MIGRACIÓN CELULAR