Descripción del proyecto
LAS FIBRAS DE CROMATINA ESTAN COMPUESTAS POR NUCLEOSOMAS ENVUELTOS POR ADN, DEBIDO A LAS LIMITACIONES DE LOS METODOS MICROSCOPICOS, SE DESCONOCE LA ORGANIZACION DE LOS NUCLEOSOMAS A NIVEL DE NANOESCALA EN CELULAS VIVAS FORMANDO FIBRA DE CROMATINA, UTILIZANDO MICROSCOPIA DE SUPERRESOLUCION CUANTITATIVA, VISUALIZAMOS LA ORGANIZACION GLOBAL DEL NUCLEO INTERFASICO DE CELULAS FIJAS MEDIANTE ESCANEO EN NANOESCALA DE PROTEINAS HISTONICAS, DURANTE EL PROCESO DE DIFERENCIACION EMBRIONARIA Y LA REPROGRAMACION DE CELULAS SOMATICAS OCURRE REMODELACION DE LA CROMATINA Y MODIFICACIONES DEL EPIGENOMA, PARA LA SUBVENCION ERC_COG, PROPUSIMOS DECODIFICAR LAS MODIFICACIONES DE LA FIBRA DE ADN/CROMATINA DINAMICAMENTE DURANTE PROCESOS DE DIFERENCIACION Y REPROGRAMACION CON RESOLUCION NANOMETRICA, MEDIANTE EXPERIMENTOS DE ANALISIS SECUENCIAL EN CELULAS VIVAS, ANALIZAMOS LA DINAMICA A ESCALA NANOMETRICA DEL NUCLEO DE LAS HISTONAS, MODIFICACIONES Y VARIANTES, UNION DE HISTONA H1, REMODELACION DE FIBRA DE ADN, Y PRODUCCION DE ARNM EN TODO EL GENOMA COMO EN GENES ACTIVADOS O SILENCIADOS, PARA ESTA PROPUESTA DE "EUROPA EXCELENCIA" ANALIZAREMOS LA REMODELACION DE LA FIBRA (ADN E HISTONAS) DURANTE LA REPROGRAMACION Y LA DIFERENCIACION, ESTE ES UN PROYECTO MULTIDISCIPLINARIO COMBINANDO UNA SERIE DE TECNOLOGIA PUNTA, INCLUYENDO MICROSCOPIA DE SUPERRESOLUCION BASADA EN LA LOCALIZACION DE UNA MOLECULA INDIVIDUAL (MICROSCOPIA DE RECONSTRUCCION OPTICA ESTOCASTICA [STORM], MICROSCOPIA DE LOCALIZACION FOTOACTIVADA [PALM]), Y MODELOS COMPUTARIZADOS, EN GENERAL, PROPORCIONAREMOS UNA RECONSTRUCCION TRIDIMENSIONAL DEL ENSAMBLAJE DE LA FIBRA DE CROMATINA Y LOS CAMBIOS PRODUCIDOS DURANTE PROCESOS BIOLOGICOS ESENCIALES EN LA DIFERENCIACION Y REPROGRAMACION HACIA LA PLURIPOTENCIA, EL OBJETIVO GENERAL DE ESTA PROPUESTA ES: VISUALIZAR LA FIBRA DE CROMATINA EN NUCLEOS INTACTOS DURANTE ETAPAS CLAVE DE LA DIFERENCIACION EMBRIONARIA Y LA REPROGRAMACION DE CELULAS SOMATICAS UTILIZANDO MICROSCOPIA DE SUPERRESOLUCION, MICROSCOPÍA DE SUPERRESOLUCIÓN\CÉLULAS MADRE\CROMATINA\REPROGRAMACIÓN