Descripción del proyecto
AL SER SESILES, LA SUPERVIVENCIA DE LAS PLANTAS DEPENDE EN GRAN MEDIDA DE SU CAPACIDAD PARA ADAPTARSE AL AMBIENTE. LA REGULACION DE LA TRADUCCION JUEGA UN PAPEL CLAVE EN ESTA ADAPTACION DADO QUE PERMITE LA ELABORACION DE RESPUESTAS RAPIDAS A LOS ESTIMULOS AMBIENTALES SIN LA NECESIDAD NUEVA SINTESIS DE ARN. SIN EMBARGO, ES POCO LO QUE SE CONOCE ACERCA DE COMO SE INTEGRAN LAS SEÑALES QUE LA PLANTA RECIBE TANTO DEL ENTORNO COMO DE SU PROPIO ESTADIO DE DESARROLLO PARA PODER ADAPTAR LA SINTESIS PROTEICA EN CONSECUENCIA.DOS MUTANTES DE ARABIDOPSIS, EAD1 Y EAD2, CONSTITUYEN UN NEXO DE UNION ENTRE LAS RESPUESTAS HORMONALES Y LA REGULACION DE LA TRADUCCION.NUESTROS RESULTADOS PRELIMINARES INDICAN QUE EAD1 Y EAD2 SON NECESARIOS PARA RESPUESTAS NORMALES A ETILENO Y AUXINA; QUE EAD1 Y EAD2 SON LOS ORTOLOGOS DE LOS REGULADORES TRADUCCIONALES MCT-1 Y DENR (HUMANOS) Y TMA20 Y TMA22 (LEVADURAS); QUE EAD1 Y EAD2 INTERACCIONAN ENTRE SI; QUE SI BIEN SON UBICUOS, SE EXPRESAN MAS EN LOS TEJIDOS EN PROLIFERACION; QUE LA FUNCION DE EAD1 ES NECESARIA PARA LA TRADUCCION ADECUADA DE CIENTOS DE GENES QUE CONTIENEN UORF, PERO LA TRADUCCION GLOBAL NO PARECE ESTAR ALTERADA EN LOS MUTANTES DE EAD1; Y QUE EAD1 SE ASOCIA CON RIBOSOMAS.LOS UORF ESTAN SOBRERREPRESENTADOS EN GENES CON IMPORTANTES FUNCIONES REGULADORAS, COMO PROTEINAS DE SEÑALIZACION, FACTORES DE TRANSCRIPCION O PROTEINA QUINASAS. FUNCIONAN REGULANDO LA TRADUCCION DE SU MARCO ABIERTO DE LECTURA PRINCIPAL. LOS MENSAJEROS QUE CONTIENEN UORFS TIENEN MENOR EFICIENCIA DE TRADUCCION QUE AQUELLOS SIN UORF. SI BIEN LOS UORF REPRIMEN LA TRADUCCION DE GENES REGULADORES IMPORTANTES EN TODO EL GENOMA, HAY INDICIOS QUE SUGIEREN LA EXISTENCIA DE MECANISMOS CELULARES QUE PERMITEN QUE LOS RIBOSOMAS SUPEREN ESTA REPRESION CUANDO, DEBIDO A LA ACTIVACION DE RUTAS DE SEÑAL ESPECIFICAS, SE NECESITA LA TRADUCCION DE ESTOS GENES. UNO DE ESTOS MECANISMOS PODRIA SER LA ACTIVACION DEL COMPLEJO EAD1 / EAD2. EL COMPLEJO EAD1 / EAD12 ACTIVADO SE UNIRIA A LOS RIBOSOMAS Y ESTO PERMITIRIA LA TRADUCCION DE UN SUBCONJUNTO DE GENES REGULADORES QUE CONTIENEN UORF.POR TANTO, LAS HIPOTESIS DE LA PROPUESTA SON:1) EL COMPLEJO EAD1 / EAD2 RECONOCE Y REGULA LA TRADUCCION DE UN SUBCONJUNTO ESPECIFICO DE ARNM EN LA CELULA QUE TIENEN CARACTERISTICAS ESTRUCTURALES IDENTIFICABLES EN SU 5¿UTR.2) LA UNION DE EAD1 Y EAD2 A LA SUBUNIDAD RIBOSOMICA 40S ES CONDICIONAL Y REQUIERE SU ACTIVACION POSTRADUCCIONAL.3) EL COMPLEJO EAD1 / EAD2 REPRESENTA UN CENTRO REGULADOR DONDE CONVERGEN MULTIPLES VIAS DE SEÑALIZACION PARA ACTIVAR O REPRIMIR RAPIDAMENTE LA TRADUCCION DE CONJUNTOS ESPECIFICOS DE TRANSCRIPCIONES ALTERANDO DIRECTAMENTE LA ACTIVIDAD DE EAD1 / EAD2.PARA PROBAR ESTAS HIPOTESIS, LLEVAREMOS A CABO LOS SIGUIENTES OBJETIVOS:1) IDENTIFICAR LOS ELEMENTOS REGULADORES CIS IMPLICADOS EN LA REGULACION DE LA TRADUCCION DEPENDIENTE DE EAD1 Y CARACTERIZAR SU IMPORTANCIA BIOLOGICA.2) CARACTERIZAR LOS MECANISMOS POR LOS CUALES EL COMPLEJO EAD1 / EAD2 SE UNE A LOS RIBOSOMAS.3) IDENTIFICAR POSIBLES MECANISMOS DE REGULACION DE LA ACTIVIDAD EAD1 Y EAD2LOS RESULTADOS OBTENIDOS ARROJARAN LUZ SOBRE EL PAPEL REGULADOR DE LOS UORF Y LAS PROTEINAS REGULADORAS DE LA TRADUCCION, Y DEFINIRAN NUEVAS CAPAS EN EL CONTROL DE LA EXPRESION GENICA. TAMBIEN ABRIRAN UN NUEVO CAMPO DE INVESTIGACION PARA LA GENERACION DE HERRAMIENTAS BIOTECNOLOGICAS NOVEDOSAS CON CLARAS IMPLICACIONES TANTO EN LA AGRICULTURA COMO EN LA INDUSTRIA FARMACEUTICA. RABIDOPSIS\FACTORES DE RECICLAJE\FACTORES DE INICIACION\REINICIACION\UORFS\REGULACION DE LA TRADUCCION