Descripción del proyecto
UNA DE LAS PREGUNTAS FUNDAMENTALES EN LOS CAMPOS DE LA EMBRIOLOGIA Y LAS CELULAS MADRE ES COMO SE VA RESTRINGIENDO EL POTENCIAL DE LAS CELULAS EMBRIONARIAS TEMPRANAS PARA DIFERENCIARSE A DISTINTOS TIPOS CELULARES A LO LARGO DEL DESARROLLO, COMO EN OTROS PROCESOS EMBRIONARIOS, ESTA PERDIDA PROGRESIVA EN EL POTENCIAL DE DIFERENCIACION ES PROBABLEMENTE DEBIDA A UNA REMODELACION PROFUNDA DE LOS TRANSCRIPTOMAS MEDIANTE DIVERSOS MECANISMOS DE REGULACION TRANSCRIPCIONAL Y POST-TRANSCRIPCIONAL, ENTRE LOS MECANISMOS QUE INTEGRAN ESTE ULTIMO GRUPO, EL SPLICING ALTERNATIVO EL PROCESAMIENTO DIFERENCIAL DE LOS INTRONES Y EXONES PARA DAR LUGAR A MULTIPLES ISOFORMAS DE MRNA Y PROTEINAS ES EL MAS COMUN ENTRE LOS MAMIFEROS, OBSERVANDOSE EN MAS DE UN 90% DE LOS GENES HUMANOS, NO OBSTANTE, POCO SE SABE SOBRE SU PAPEL EN LA REGULACION DE LA PLURIPOTENCIA Y DIFERENCIACION CELULAR, EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES ESTUDIAR EL PAPEL QUE EL SPLICING ALTERNATIVO JUEGA EN ESTOS PROCESOS, PARA ELLO, EN PRIMER LUGAR, USAREMOS SECUENCIACION MASIVA DE RNA MEDIANTE TECNICAS DE NUEVA GENERACION (RNA-SEQ) PARA TRES ESPECIES DE MAMIFEROS CON EL FIN DE IDENTIFICAR EXONES ALTERNATIVOS QUE MUESTREN UNA REGULACION DINAMICA Y CONSERVADA DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO TEMPRANO, EN SEGUNDO LUGAR, APROVECHAREMOS LA TECNOLOGIA EMERGENTE DEL CRISPR-CAS9 PARA GENERAR MUTACIONES ESPECIFICAS EN UN SET DE ESTOS EXONES ALTERNATIVOS EN EMBRIONES DE RATON, CON EL OBJETIVO DE TESTAR SU PAPEL DURANTE EL DESARROLLO TEMPRANO, FINALMENTE, USAREMOS CELULAS MADRE DE RATON PARA PROFUNDIZAR EN LOS MECANISMOS DE ACCION DE ESTAS ISOFORMAS, E INVESTIGAR SI TIENEN FUNCIONES CONCRETAS EN EL MANTENIMIENTO DE LA PLURIPOTENCIA EN ESTAS CELULAS, LOS RESULTADOS DE ESTOS EXPERIMENTOS NOS DARAN UNA PRIMERA VISION DEL IMPACTO QUE EL SPLICING ALTERNATIVO TIENE EN LA PLURIPOTENCIA Y EL DESARROLLO EMBRIONARIO TEMPRANO EN UN CONTEXTO IN VIVO, POR ELLO, ESTE PROYECTO COMPLETARA UN VACIO DE CONOCIMIENTO QUE EXISTE EN LA ACTUALIDAD EN NUESTRA COMPRENSION DE COMO LAS REDES GENICAS EN LAS MULTIPLES CAPAS DE REGULACION CONTROLAN, POR UN LADO, EL DESARROLLO TEMPRANO Y, POR OTRO, LA PLURIPOTENCIA Y LA CAPACIDAD DE RENOVACION DE LAS CELULAS MADRE, LAS CUALES SON ESENCIALES PARA SU USO EFECTIVO Y SEGURO EN APLICACIONES TERAPEUTICAS, TOTIPOTENCIA\PLURIPOTENCIA\SPLICING ALTERNATIVO\STEM CELLS\DESARROLLO PRE-IMPLANTACIÓN