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AGL2016-77163-R

Financiado
REGULACION DE LA BIOSINTESIS DE FACTORES DE NODULACION POR RHIZOBIUM TROPICI CIA...
REGULACION DE LA BIOSINTESIS DE FACTORES DE NODULACION POR RHIZOBIUM TROPICI CIAT899: IMPLICACIONES DE SU APLICACION COMO INOCULANTE MOLECULAR EN LEGUMINOSAS Y CEREALES. R. TROPICI CIAT899 TIENE LA PECULIARIDAD DE SINTETIZAR FACTORES DE NODULACION (LCOS) EN AUSENCIA DE FLAVONOIDES Y PRESENCIA DE SAL. ESTE NUEVO CIRCUITO REGULADOR PARECE MEDIADO POR LOS GENES NODD2 Y ARAC, EN TANTO QUE EL GEN NODD1... R. TROPICI CIAT899 TIENE LA PECULIARIDAD DE SINTETIZAR FACTORES DE NODULACION (LCOS) EN AUSENCIA DE FLAVONOIDES Y PRESENCIA DE SAL. ESTE NUEVO CIRCUITO REGULADOR PARECE MEDIADO POR LOS GENES NODD2 Y ARAC, EN TANTO QUE EL GEN NODD1 ESTA DIRECTAMENTE IMPLICADO EN LA ACTIVACION DE LOS GENES DE NODULACION EN PRESENCIA DE FLAVONOIDES. UNO DE LOS OBJETIVOS PROPUESTOS ES LA REALIZACION DE ESTUDIOS TRANSCRIPTOMICOS DE MUTANTES EN LOS GENES NODD1, NODD2 Y ARAC, PARA CONOCER LOS ARNM DIFERENCIALMENTE EXPRESADOS EN CONDICIONES CONTROL, EN PRESENCIA DEL FLAVONOIDE APIGENINA (3,7 µM) Y EN PRESENCIA DE ESTRES SALINO (NACL 300 MM) Y CONOCER QUE GENES ESTAN BAJO LA INFLUENCIA DE ESTOS REGULADORES TRANSCRIPCIONALES. LOS GENES DE INTERES SE MUTARAN Y SE ESTUDIARA SU FENOTIPO SIMBIOTICO Y OTRAS CARACTERISTICAS COMO LA PRODUCCION DE EPS, LA MOVILIDAD O LA PRODUCCION DE AHL, QUE PUEDEN SER IMPORTANTES EN COLONIZACION. OTRA PECULIARIDAD DE CIAT899 ES QUE PRESENTA TRES COPIAS DEL GEN NODA EN SU PLASMIDO SIMBIOTICO, Y A FECHA DE HOY NO SE CONOCE SI TODAS SON COPIAS FUNCIONALES. POR ELLO, SE PRETENDE HACER MUTACIONES NO POLARES MEDIANTE DELECION POR PCR DEL GEN NODA1, LOCALIZADO EN EL OPERON NODA1BCSUIJHPQ, Y DETERMINAR SI ESTE MUTANTE ES AUN CAPAZ DE NODULAR JUDIA Y LEUCENA. EN ESTE CASO, SE DETERMINARA SI EL GEN RESPONSABLE DE ESTE FENOTIPO ES NODA2 Y/O NODA3. SE CONTEMPLA LA POSIBILIDAD DE CONSTRUIR UN TRIPLE MUTANTE EN LOS GENES NODA E INTRODUCIR UNA A UNA LAS COPIAS SILVESTRES DE LOS TRES GENES NODA CON OBJETO DE DETERMINAR LA FUNCION DE CADA UNO DE ELLOS EN LA SIMBIOSIS Y COMO SE AFECTA EN CADA CASO LA PRODUCCION DE LOS LCOS.SE CONOCE QUE LOS LCOS APLICADOS EN LOS INOCULANTES COMERCIALES TANTO EN FORMA RADICAL COMO FOLIAR AFECTAN POSITIVAMENTE A LA PRODUCTIVIDAD DE LOS CULTIVOS, SI BIEN SE DESCONOCE QUE MECANISMOS MOLECULARES DESENCADENAN EN LAS PLANTAS. EN ESTE CONTEXTO, ADEMAS DE DETERMINAR MEDIANTE MALDI-IMAGING SI LOS LCOS, APLICADOS DE FORMA RADICAL Y FOLIAR, PENETRAN EN LOS TEJIDOS DE LA PLANTA, SE ESTUDIARA SI DISPARAN UNA RESPUESTA DEFENSIVA EN LA PLANTA, COMO PUEDE SER EL INCREMENTO DE ESPECIES REACTIVAS DE OXIGENO (ROS) Y SI MODIFICAN PARAMETROS COMO EL CONTENIDO EN CLOROFILA O EN NITROGENO TOTAL DE LAS PLANTAS. EN ESTOS ESTUDIOS SE UTILIZARA UNA LEGUMINOSA (JUDIA) Y UNA CEREAL (MAIZ).POR ULTIMO, Y DADO QUE LA SIMBIOSIS CIAT899/JUDIA PRESENTA UNA ESCASA PRODUCTIVIDAD COMPARADA CON OTRAS ASOCIACIONES SIMBIOTICAS, SE PRETENDE REALIZAR ESTUDIOS DE INOCULACION CON FORMULADOS DE CIAT899 CON ALTA DENSIDAD BACTERIANA Y ESTABILIDAD, CON BACTERIAS PRE-ACTIVADAS EN LA BIOSINTESIS DE LCOS EN PRESENCIA DE ESTRES SALINO Y EN EXPERIMENTOS DE COINOCULACION UTILIZANDO BACTERIAS PROMOTORAS DEL CRECIMIENTO VEGETAL, COMO SON LOS AZOSPIRILOS. ESTOS MISMOS ESTUDIOS SE REALIZARAN, IGUALMENTE EN PLANTAS DE MAIZ. ADEMAS A ESTOS INOCULANTES SE LES INCORPORARAN MOLECULAS DE LCOS, PARA DETERMINAR SU EFICACIA EN LA PROMOCION DEL CRECIMIENTO VEGETAL. LOS LCOS TAMBIEN SE APLICARAN DE FORMA FOLIAR. SABEMOS QUE CIERTOS MUTANTES DE CIAT899 PRODUCEN UNA MAYOR DIVERSIDAD DE LCOS QUE LA ESTIRPE PARENTAL, POR LO QUE SE DETERMINARA EL EFECTO DE ESTOS LCOS EN JUDIA Y MAIZ Y SE COMPARARAN CON LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON LOS LCOS DE CIAT899. SE PRESTARA ESPECIAL ATENCION A LA FORMULACION DE ESTOS INOCULANTES INNOVADORES. STRÉS SALINO\PRODUCTIVIDAD VEGETAL.\SIMBIOSIS\INOCULANTES MOLECULARES\GENES REGULADORES\LCOS ver más
01/01/2016
US
169K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2016-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 169K€
Líder del proyecto
UNIVERSIDAD DE SEVILLA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.
Total investigadores 3670