Descripción del proyecto
LA LONGEVIDAD DE SEMILLAS DEPENDE DE MUCHOS FACTORES, INCLUYENDO LA PERMEABILIDAD DE LA CUBIERTA Y LA CANTIDAD DE DEFENSAS ANTIOXIDANTES Y ENZIMAS REPARADORAS, UTILIZANDO ESTOS CONOCIMIENTOS PARCIALES SE HAN CONSTRUIDO PLANTAS TRANSGENICAS CON SEMILLAS DE LONGEVIDAD MEJORADA, SIN EMBARGO, LA IDENTIFICACION DE REDES REGULADORAS DE FACTORES DE TRANSCRIPCION (TFS) QUE ACTUEN EN EL DESARROLLO DE LA CUBIERTA DE LA SEMILLA Y EN LA EXPRESION DE DEFENSAS ANTIOXIDANTES Y ENZIMAS REPARADORAS CONSTITUIRA UN PASO ADELANTE PARA ENTENDER EL COMPLEJO FENOMENO DE LA LONGEVIDAD Y PARA DISEÑAR APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS MAS SOFISTICADAS,PARA AUMENTAR EL CONOCIMIENTO DE GENES DETERMINANTES DE LA LONGEVIDAD DE SEMILLAS UTILIZAREMOS UN ABORDAJE FUNCIONAL SELECCIONANDO MUTANTES DE LA PLANTA MODELO ARABIDOPSIS THALIANA CON LONGEVIDAD DE SEMILLAS ALTERADA, TAMBIEN UTILIZAREMOS LOS CENTENARES DE VARIEDADES DE ARABIDOPSIS CON GENOMA SECUENCIADO PARA REALIZAR ASOCIACIONES A LO LARGO DE TODO EL GENOMA ENTRE VARIABILIDAD NATURAL EN LONGEVIDAD DE SEMILLAS Y CAMBIOS EN SECUENCIA, ADEMAS DE ESTOS ESTUDIOS DESPREJUICIADOS REALIZAREMOS ABORDAJES ENFOCADOS BUSCANDO TFS QUE REGULEN LOS TFS Y ENZIMAS CONOCIDOS DEL DESARROLLO DE LA CUBIERTA DE LA SEMILLAS, ASI COMO LOS TFS QUE REGULAN DEFENSASANTIOXIDANTES Y ENZIMAS REPARADORAS, EL DESARROLLO DEL EMBRION Y LA ADQUISICION DE TOLERANCIA A DESECACION QUEDAN FUERA DEL PRESENTE PROYECTO,ESTE PROYECTO TIENE 5 OBJETIVOS PRINCIPALES:1)BUSQUEDA DE NUEVOS GENES INVOLUCRADOS EN LONGEVIDAD DE SEMILLAS MEDIANTE RASTREO DE COLECCIONES DE MUTANTES DE SOBREEXPRESION DE ARABIDOPSIS THALIANA, COMO NUESTROS ESTUDIOS PREVIOS NO UTILIZARON TODAS LAS COLECCIONES DE MUTANTES DISPONIBLES, HAREMOS NUEVOS RASTREOS CON MAS COLECCIONES DE ACTIVACION TRANSCRIPCIONAL Y DE SOBREEXPRESION DE TFS BUSCANDO MUTACIONES DOMINANTES QUE AUMENTEN LA TOLERANCIA DE SEMILLAS A ENVEJECIMIENTO NATURAL Y ACELERADO,2) BUSQUEDA DE GENES INVOLUCRADOS EN LONGEVIDAD DE SEMILLAS MEDIANTE ESTUDIOS DE ASOCIACION ENTRE FENOTIPO DE LONGEVIDAD DE SEMILLAS (TOLERANCIA A ENVEJECIMIENTO NATURAL Y ACELERADO) Y CAMBIOS DE SECUENCIA (SNPS) EN GENES A LO LARGO DE TODO EL GENOMA (GWAS) DE 300 VARIEDADES SECUENCIADAS DE ARABIDOPSIS, EMPLEANDO EL PROGRAMA BIOINFORMATICO GWAPP,3)CARACTERIZACION DE TFS QUE REGULAN EL DESARROLLO DE LA CUBIERTA DE LA SEMILLA, SE INVESTIGARA LA REGULACION DE SU EXPRESION POR EL PROGRAMA DE DESARROLLO DE LA SEMILLA ASI COMO LOS GENES DE LA CUBIERTA REGULADOS POR ESTOS TFS,4)CARACTERIZACION DE LAS REDES QUE REGULAN DEFENSAS ANTIOXIDANTES Y ENZIMAS REPARADORAS, SE ESTUDIARAN LOS PROMOTORES DE LOS GENES DE ESTOS SISTEMAS EXPRESADOS EN SEMILLAS PARA IDENTIFICAR MOTIVOS COMUNES, SE UTILIZARA EL LLAMADO "YEAST ONE-HYBRID" PARA IDENTIFICAR TFS QUE REGULAN ESTE GRUPO DE GENES, SE DETERMINARA EL COCIENTE GSH/GSSG (GSH = GLUTATION) POR HPLC EN SEMILLAS CONTROL Y MUTANTES TRAS ENVEJECIMIENTO NATURAL Y ACELERADO,5)CONSTRUCCION DE UNA RED REGULADORA DEL DESARROLLO DE LA CUBIERTA DE SEMILLAS Y DE LA EXPRESION DE DEFENSAS ANTIOXIDANTES Y ENZIMAS REPARADORAS, SE HARA POR INTEGRACION DE LA INFORMACION OBTENIDA EN LOS OBJETIVOS PREVIOS, LONGEVIDAD DE SEMILLAS\ARABIDOPSIS\MUTANTES\GWAS\FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN\SISTEMAS ANTIOXIDANTES\ENZIMAS REPARADORAS