Descripción del proyecto
EL SISTEMA INMUNOLOGICO SE ENCARGA DE PATRULLAR, DETECTAR Y DESTRUIR AMENAZAS CONSTITUIDAS TANTO POR ENFERMEDADES TRANSMISIBLES Y COMO POR NO TRANSMISIBLES, Y PUEDE VERSE AFECTADO POR EL ENVEJECIMIENTO DE CIERTAS CELULAS, COMO SON LOS LINFOCITOS Y, EN PARTICULAR, LAS CELULAS T CD4. LA VIDA MEDIA DE DICHAS CELULAS PUEDE AFECTAR A LA CAPACIDAD DEL ORGANISMO PARA LUCHAR CONTRA AMENAZAS EXTERNAS E INTERNAS, ESENCIAL PARA UNA VIDA SALUDABLE. LAS CELULAS T CD4 ESCANEAN CONSTANTEMENTE SU ENTORNO EXTRACELULAR, POR LO QUE ESTAN EXPUESTAS A PATRONES MOLECULARES, BIEN SOLUBLES COMO CITOQUINAS, BIEN PRESENTADOS EN EL CONTEXTO DE CELULAS PRESENTADORAS DE ANTIGENO, QUE PUEDEN REPROGRAMARLAS E IMPACTAR EN SU FUNCION. ESTAS CELULAS SUFREN DE ENVEJECIMIENTO CELULAR O SENESCENCIA QUE PUEDEN CAMBIAR LA FORMA EN QUE RESPONDEN A LAS AMENAZAS. EN ESTO INFLUYE LA HOMEOSTASIS DE COMPONENTES CELULARES, SOMETIDA A UN ESTRICTO CONTROL; EN PARTICULAR, LA HOMEOSTASIS DE LAS PROTEINAS SE CONOCE COMO PROTEOSTASIS. ESTA CONSISTE EN LA SINTESIS DE NUEVAS PROTEINAS TRAS LA TRANSCRIPCION DE SUS GENES, SU CORRECTO PLEGAMIENTO Y SU DEGRADACION O SECRECION PARA MANTENER SU FUNCIONALIDAD. LA PROTEOSTASIS DEL CITOESQUELETO CELULAR, PRINCIPALMENTE EL CITOESQUELETO DE TUBULINA, ESTA REGULADA POR LA ACCION CONJUNTA DE VARIAS CHAPERONAS MOLECULARES, COMO SON CCT Y LOS COFACTORES DE UNION A TUBULINA (TBC). LA CHAPERONINA CCT AYUDA AL PLEGAMIENTO DE PROTEINAS DE NUEVA SINTESIS (DE NOVO), COMO SON LOS ISOTIPOS ALFA Y BETA DE TUBULINA Y LOS TBC EN LA ORGANIZACION DE LOS HETERODIMEROS ALFA-BETA DE TUBULINA. CONSTITUYEN LOS ELEMENTOS FUNDAMENTALES DE LOS MICROTUBULOS, QUE SON ELEMENTOS ESTRUCTURALES DINAMICOS QUE LA CELULA UTILIZA COMO RAILES PARA MOVER COMPONENTES MOLECULARES Y ORGANULOS EN LA CELULA, ORGANIZANDO SU ESTRUCTURA FUNCIONAL.LA PROPUESTA PROTUB4TLIFE COMBINARA EL ANALISIS FUNCIONAL DE CELULAS T CD4 QUE EXPRESAN CANTIDADES REDUCIDAS DE CCT Y/O TBCS MEDIANTE EXPERIMENTACION BIOQUIMICA CON PROTEINAS NATIVAS O PROCESADAS PARA ESTUDIAR SU COMPOSICION DIFERENCIAL EN LA CELULA Y FRACCIONES SUBCELULARES, ASI COMO SUS POSIBLES MODIFICACIONES POST-TRADUCCIONALES. POR OTRO LADO, LAS CELULAS SE ANALIZARAN MEDIANTE OMICAS, EN TERMINOS DE PROTEINAS Y LIPIDOS (PROTEOMICA, LIPIDOMICA), PARA ENTENDER COMO SE VEN AFECTADAS LAS CELULAS T CD4 POR EL ENVEJECIMIENTO EN TERMINOS DE EXPRESION DE CCT Y PROTEOSTASIS DE TUBULINA. ESTA INFORMACION SE COMBINARA CON METODOS DE ULTIMA GENERACION PARA LA ADQUISICION DE IMAGENES DE SUPER-RESOLUCION, CAPACES DE MANIPULAR LAS CELULAS DE MODO QUE SU ESTRUCTURA PERMANEZCA CERCANA A LA NATIVA, COMO SON LAS TECNICAS DE MICROSCOPIA CRIOCORRELATIVA (CRYOCM; INCLUYENDO METODOS CRIOCONFOCALES, PARA DETERMINAR LA ESTRUCTURA Y CONTENIDO CELULAR MEDIANTE TOMOGRAFIA CRIOELECTRONICA DE ALTA RESOLUCION (CRYOET).) O TIRFM IN VIVO, PARA CARACTERIZAR LOS CAMBIOS EN LAS CELULAS ENVEJECIDAS Y REVELAR SU ESTRUCTURA FINA Y LOS CAMBIOS MORFOGENETICOS. SE USARA TAMBIEN MICROSCOPIA STED PARA ANALIZAR CELULAS FIJADAS Y MICROSCOPIA DE EPIFLUORESCENCIA COMBINADA CON DECONVOLUCION PARA AUMENTAR LA CAPACIDAD DE RESOLUCION TEMPORAL DE LAS CELULAS DURANTE LOS PROCESOS REGISTRADOS EN TIEMPO REAL CON CELULAS VIVAS. TAMBIEN SE ESTUDIARAN LOS POSIBLES MECANISMOS QUE EXPLIQUEN LA DISMINUCION FISIOLOGICA DE CCT EN LAS CELULAS, A TRAVES DE PERDIDAS CROMOSOMICAS O CAMBIOS EPIGENOMICOS, ASI COMO LA INFLUENCIA DE LA EDAD Y EL GENERO EN LA POBLACION, A TRAVES DE COHORTES ESPECIFICAS. CHAPERONINA\INMUNIDAD ADAPTATIVA\PROTEOSTASIS\COFACTORES DE TUBULINA\MICROTUBULOS\CCT\MITOCONDRIA\TUBULINA\CELULA T