Descripción del proyecto
EN LOS ULTIMOS AÑOS HEMOS ASISTIDO A VARIOS DESCUBRIMIENTOS QUE HAN CAMBIADO DE FORMA SUSTANCIAL LOS MECANISMOS DE REGULACION DE LA TRADUCCION EN CELULAS EUCARIOTICAS, ENTRE ESTOS DESCUBRIMIENTOS PODEMOS CITAR A LOS MICRO-RNAS QUE EXISTEN DE FORMA NATURAL, AL DESARROLLO DE SIRNAS, A LA COMPARTIMENTALIZACION DE LA TRADUCCION DE MRNAS VIRALES Y CELULARES, A LOS NUEVOS MECANISMOS DE INICIACION DE LA TRADUCCION DE MRNAS VIRALES QUE CONTIENEN ELEMENTOS IRES, A LA FALTA DE REQUERIMIENTOS DE DIVERSOS FACTORES DE INICIACION PARA LA TRADUCCION DE MRNAS VIRALES, ETC, NUESTRO GRUPO DE INVESTIGACION ESTA ESTUDIANDO LA REGULACION DE LA TRADUCCION EN CELULAS INFECTADAS POR EL VIRUS SINDBIS, UN TOGAVIRUS PERTENECIENTE AL GENERO ALFAVIRUS QUE POSEE UN RNA DE CADENA SIMPLE Y POLARIDAD POSITIVA COMO MATERIAL GENETICO, RECIENTEMENTE HEMOS PUBLICADO QUE LA TRADUCCION DEL MRNA SUBGENOMICO DE ESTE VIRUS EN CELULAS DE MAMIFERO EN CULTIVO NO SIGUE UN MECANISMO CANONICO, YA QUE NO REQUIERE DE UN EIF2 ACTIVO O DE UN COMPLEJO EIF4F INTACTO, LA TRADUCCION DE ESTE MRNA RESULTA SORPRENDENTE EN DIVERSOS ASPECTOS QUE HACEN QUE SEA UNICO DENTRO DEL CAMPO DE LA REGULACION DE LA TRADUCCION EN CELULAS INFECTADAS POR VIRUS, EN EL PRESENTE PROYECTO PROPONEMOS: 1) ESTUDIAR LOS REQUERIMIENTOS DE FACTORES DE INICIACION PARA LA TRADUCCION DEL MRNA 26S, COMPARAREMOS ESTA TRADUCCION ENTRE LAS CELULAS INFECTADAS Y LAS CELULAS TRANSFECTADAS; 2) SILENCIAMIENTO DE EIFS CON SIRNAS; 3) ANALIZAR LA IMPORTANCIA DE LA ESTRUCTURA DEL MRNA 26S PARA SU TRADUCCION; 4) ESTUDIAREMOS TAMBIEN LA LOCALIZACION SUBCELULAR DE EIFS Y DE RIBOSOMAS EN CELULAS INFECTADAS POR EL VIRUS SINDBIS; 5) PROPONEMOS LA CLONACION Y PURIFICACION DE LAS PROTEINAS TEMPRANAS DEL SV Y 6) LOS ESTUDIOS ANTERIORES SE LLEVARAN A CABO DE FORMA COMPARATIVA CON OTROS VIRUS ANIMALES, TALES COMO EL VIRUS DE LA ESTOMATITIS VESICULAR Y EL VIRUS DE LA ENCEFALOMIOCARDITIS, ESTOS ESTUDIOS SERVIRAN PARA CONOCER MEJOR LOS MECANISMOS DE EXPRESION GENETICA UTILIZADOS POR DIVERSOS VIRUS ANIMALES, MAS EN CONCRETO, SERVIRAN PARA DETERMINAR NUEVOS MECANISMOS USADOS POR LOS VIRUS PARA INICIAR LA TRADUCCION DE SUS MRNAS, POR ULTIMO, A LO LARGO DE ESTE PROYECTO SE OBTENDRA TODA UNA SERIE DE CONSTRUCCIONES GENICAS, DE ANTICUERPOS Y DE OTROS MATERIALES QUE SERAN DE INTERES PARA OTROS GRUPOS INTERESADOS EN EL ESTUDIO DE LA REGULACION DE LA TRADUCCION, SINTESIS DE PROTEINAS\TRADUCCION DE MRNAS\VIRUS SINDBIS\FACTORES DE INICIACION\EIF4G\EIF2\ESTRUCTURA DEL MRNA