PLATAFORMA MICROFLUIDICA DE CRIBADO DE ALTO RENDIMIENTO PARA ESTUDIOS ADHERENTES
LOS ESTUDIOS DE CELULAS INDIVIDUALES HAN PUESTO DE MANIFIESTO LA HETEROGENEIDAD DEL COMPORTAMIENTO DE LAS CELULAS DE UN MISMO TIPO. INFORMACION, QUE A MENUDO, QUEDA ENMASCARADA EN LOS ESTUDIOS A NIVEL DE POBLACION QUE RESULTAN EN...
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Financiación
concedida
El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto
el día 2016-01-01
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Descripción del proyecto
LOS ESTUDIOS DE CELULAS INDIVIDUALES HAN PUESTO DE MANIFIESTO LA HETEROGENEIDAD DEL COMPORTAMIENTO DE LAS CELULAS DE UN MISMO TIPO. INFORMACION, QUE A MENUDO, QUEDA ENMASCARADA EN LOS ESTUDIOS A NIVEL DE POBLACION QUE RESULTAN EN UN VALOR PROMEDIO QUE COMBINA LAS SEÑALES DE CELULAS DIFERENTES. LAS MICROTECNOLOGIAS HAN PROPICIADO ESTOS CRIBADOS DE ALTO RENDIMIENTO A TRAVES DE ARRAYS DE CELULAS INDIVIDUALES SUSPENDIDAS EN MICROCAVIDADES INDEPENDIENTES Y AISLADAS. ESTAS METODOLOGIAS, AL IGUAL QUE LA CITOMETRIA DE FLUJO, NO PERMITEN ESTUDIAR LOS SISTEMAS CELULARES DURANTE UN PROCESO TAN FUNDAMENTAL COMO ES LA ADHESION CELULAR, Y ESTAN LIMITADAS A MEDIDAS DE FLUORESCENCIA. NUESTRO OBJETIVO ES EL DESARROLLO DE UNA HERRAMIENTA ANALITICA PARA LA MONITORIZACION AUTOMATIZADA CON ALTA RESOLUCION TEMPORAL Y ESPACIAL DEL SECRETOMA DE CELULAS ADHERENTES. PROPONEMOS LA FABRICACION DE SUBSTRATOS MULTIFUNCIONALES, QUE COMBINAN ZONAS DE ADHESION DE CELULAS INDIVIDUALES Y EL PRECISO POSICIONAMIENTO DE NANOSENORES OPTICOS "LABEL-FREE" ALREDEDOR DE CADA UNA DE ELLAS, EN CONCRETO NANOPARTICULAS (NP) DE ORO. LA FABRICACION DE ESTOS EXCLUSIVOS SUBSTRATOS SE BASARA EN UN METODO DESARROLLADO POR NUESTRO EQUIPO, QUE PERMITE EL POSICIONAMIENTO DE NP DE ORO Y PROTEINAS EN POSICIONES ADJACENTES EN UNA SUPERFICIE SOLIDA, SE DENOMINA "PRINTING AND VACUMM LITHOGRAPHY" (PNV LITHOGRAPHY). DICHOS SUBSTRATOS SE INTEGRARAN EN PLATAFORMAS MICROFLUIDICAS QUE PERMITAN EL SUMINISTRO DEL MEDIO FLUIDICO PARA LA ESTIMULACION Y VIABILIDAD CELULAR. LAS PROPIEDADES OPTICAS DE LAS NPS METALICAS, ESTAN DETERMINADAS POR SU COMPOSICION Y TAMAÑO, PERMITEN SU USO COMO NANOSENSORES OPTICOS A TRAVES DE MEDIDAS ESPECTROSCOPICAS, PARA LA DETECCION DIRECTA DE ANALITOS QUIMICOS O BIOMOLECULAS EN CONCENTRACIONES POR DEBAJO DEL RANGO PICOMOLAR. EN ESTE PROYECTO NOS CENTRAREMOS EN DETERMINAR LAS CONDICIONES OPTIMAS PARA EL USO DE NANOPARTICULAS DE ORO INMOVILIZADAS EN UNA SUPERFICIE COMO NANOSENSORES OPTICOS "LABEL FREE" PARA LA DETECCION DE BIOMOLECULAS SEGREGADAS POR CELULAS. UTILIZAREMOS UNA NUEVA TECNICA ESPECTROSCOPICA ULTRASENSITIVA DENOMINADA "PLASMON RESONANCE ENERGY TRANSFER" (PRET) QUE CONSISTE EN DETECTAR LOS PICOS DE ABSORCION DE UNA MOLECULA SITUADA SOBRE UNA NP DE ORO EN EL ESPECTRO DE SCATTERING DE LA NP. ES DECIR ES POSIBLE DETECTAR ANALITOS SOBRE LA SUPERFICIE DE NPS DE ORO SIMPLEMENTE IRRADIANDOLAS CON LUZ BLANCA Y REGISTRANDO SU ESPECTRO. HASTA AHORA SOLO EXISTEN EJEMPLOS DE PRET USANDO PARTICULAS EN DISOLUCION, NOSOTROS APLICAREMOS PRET EN NP INMOVILIZADAS. ESTA HERRAMIENTA PERMITIRIA DETECTAR MOLECULAS SEGREGADAS POR CELULAS INDIVIDUALES, CON RESOLUCION ESPACIAL (¿POR DONDE?), Y A LA VEZ CON ALTA RESOLUCION TEMPORAL (¿CUANDO?) PUES LA MISMA ZONA PUEDE SER INTERROGADA EN SUCESIVAS OCASIONES.ESTA PROPUESTA CONSTITUYE LA BASE DE GENERACION DE CONOCIMIENTO CIENTIFICO Y TECNOLOGICO PARA EL DESARROLLO DE UNA TECNOLOGIA EMERGENTE, CON APLICACION EN CAMPOS DE ALTO IMPACTO, DESDE LA MEDICINA REGENERATIVA HASTA EL DESARROLLO DE FARMACOS. ESTA LIDERADA POR DOS INVESTIGADORES JOVENES CON AMPLIA EXPERIENCIA INTERNACIONAL, SE BENEFICIA DE LA ACTIVIDAD SINERGICA DE TRES EQUIPOS DE INVESTIGACION DE LA UNIVERSIDAD DEL PAIS VASCO, ASI COMO DE LA PARTICIPACION DE INVESTIGADORES DE LA UNIVERSIDAD DE LINKOPING EN SUECIA. ES UN PROYECTO MULTIDISCIPLINAR, Y ESTABLECERA EN ESPAÑA UN NICHO DE INVESTIGACION EN UN AREA DE ALTO IMPACTO INTERNACIONAL. ELULAS INDIVIDUALES\MICROFLUIDICA\NANOSENSORES\LITOGRAFIA\PATTERNING\MONOTORIZACION\ARRAY\MSCS\PLAQUETAS