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SAF2008-00337

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MODULACION TERAPEUTICA EXPERIMENTAL DE LA EXPRESION GENICA CARDIACA: SILENCIAMIE...

MODULACION TERAPEUTICA EXPERIMENTAL DE LA EXPRESION GENICA CARDIACA: SILENCIAMIENTO DEL GEN REGULADOR MYOCARDIN POR INTERFERENCIA DE ARN EN EL MODELO PORCINO DE INSUFICIENCIA CARDIACA LA INSUFICIENCIA CARDIACA (IC) SE ACOMPAÑA POR LA ACTIVACION DE UN GRUPO DE GENES FETALES CARDIACOS REGULADOS POR EL FACTOR DE TRANSCRIPCION ESPECIFICO DEL MUSCULO CARDIACO Y DEL MUSCULO LISO, MYOCARDIN (MYOCD), EN ESTA DIRECCION,... ver más

01/01/2008

UDC

133K€

Presupuesto del proyecto: 133K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE A CORUÑA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 86

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2008-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE A CORUÑA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 86

Presupuesto del proyecto 133K€

Descripción del proyecto LA INSUFICIENCIA CARDIACA (IC) SE ACOMPAÑA POR LA ACTIVACION DE UN GRUPO DE GENES FETALES CARDIACOS REGULADOS POR EL FACTOR DE TRANSCRIPCION ESPECIFICO DEL MUSCULO CARDIACO Y DEL MUSCULO LISO, MYOCARDIN (MYOCD), EN ESTA DIRECCION, NUESTRO GRUPO Y OTROS HAN REVELADO QUE EL INCREMENTO DE LA EXPRESION DE MYOCD ES UNA CARACTERISTICA COMUN DE LA IC DE DIFERENTES ETIOLOGIAS CARDIOVASCULARES, RECIENTEMENTE, HEMOS MOSTRADO QUE LA SOBRE-EXPRESION DE MYOCD SE ASOCIA CON UNA FUNCION SISTOLICA ALTERADA Y CON LA ACTIVACION DEL ¿PATRON DE EXPRESION GENICO FETAL¿, POR LO TANTO, LA PROPUESTA DEL PROYECTO ES ENFOCAR COMO POTENCIAL DIANA-TERAPEUTICA DE LA ENFERMEDAD LA EXPRESION GENICA CARDIACA REGULADA POR MYOCD, REDUCIENDO LOS NIVELES DE EXPRESION DE MYOCD MEDIANTE INTERFERENCIA DE ARN (IARN) EN UN MODELO EXPERIMENTAL DE IC, EL DESARROLLO DE LA PROPUESTA SE HA ARTICULADO EN LOS SIGUIENTES TRES OBJETIVOS CONCRETOS: (1) ARN HORQUILLADO CORTO (ARNHC) DE INTERFERENCIA PARA SILENCIAR EL GEN MYOCD EN MODELOS CELULARES IN VITRO, TENIENDO EN CUENTA QUE NO EXISTEN ARNHC VALIDADOS FRENTE AL GEN PORCINO MYCOD, SE CONSTRUIRAN 10 PLASMIDOS CODIFICANTES DE ARNHC Y SE SELECCIONARAN LOS MAS EFECTIVOS EN EXPERIMENTOS DE COTRANSFECCION EN LINEAS CELULARES EPITELIALES Y CARDIACAS, LA GENERACION Y CARACTERIZACION DE ARNHC PARA CONSEGUIR UN EFECTIVO Y ESPECIFICO SILENCIAMIENTO DE MYOCD EN MODELOS CELULARES SERA DE GRAN UTILIDAD PARA SU POSTERIOR APLICACION EN EXPERIMENTOS DE ANALISIS FUNCIONAL DE MYOCD EN DIFERENTES MODELOS CELULARES Y ANIMALES, (2) SILENCIAMIENTO IN VIVO DEL GEN ENDOGENO MYOCD EN EL MIOCARDIO VENTRICULAR PORCINO: CONSECUENCIAS MOLECULARES, MEDIANTE LA APLICACION DE NUESTRO PROTOCOLO PARA LA ENTREGA GENICA IN VIVO, LOS PLASMIDOS DE EXPRESION ARNHC EFECTIVOS EN OPOSICION AL GEN MYOCD SERAN DIRECTAMENTE INYECTADOS EN EL MIOCARDIO VENTRICULAR DE CERDOS NEONATALES, LA EFICACIA DEL SILENCIAMIENTO DE LA EXPRESION ENDOGENA DE MYOCD, ASI COMO SUS CONSECUENCIAS MOLECULARES EN LOS GENES DIANA, SERAN ANALIZADAS MEDIANTE RT-PCR EN TIEMPO REAL Y WESTERN BLOT, LA MODULACION DE LA EXPRESION GENICA GLOBAL DEL MIOCARDIO TRANSFECTADO CON MYOCD-ARNHC VERSUS CONTROL SE ANALIZARA MEDIANTE TECNOLOGIAS MICROARRAY, EL CONOCIMIENTO ADQUIRIDO DE LA INTERFERENCIA DE ARN DE MYOCD IN VIVO SERVIRA PARA IDENTIFICAR, POR LA PRIMERA VEZ, LOS GENES QUE RESPONDEN AL KNOCKDOWN DEL GEN MYOCD EN EL CORAZON LATIENTE, (3) APLICACION TRANSLACIONAL DE LA ESTRATEGIA ELABORADA DE SILENCIAMIENTO DE MYOCD EN LA IC EXPERIMENTAL, ESTE OBJETIVO SE EJECUTARA APLICANDO UN DOBLE SISTEMA EXPERIMENTAL PARA ANALIZAR LAS CONSECUENCIAS MOLECULARES Y FISIOPATOLOGICAS DE LA IARN DE MYOCD EN LA IC EXPERIMENTAL, EMPLEANDO NUESTRO MODELO DE IC INDUCIDA POR LA ADMINISTRACION DEL TOXICO-CARDIACO DOXORUBICINA A CERDOS NEONATALES, PROVOCAREMOS EL SILENCIAMIENTO DEL GEN MYOCD IN VIVO UNA VEZ QUE LA ENFERMEDAD ESTE DESARROLLADA, SE DESARROLLARAN ESTUDIOS CINETICOS PARA ANALIZAR LAS CONSECUENCIAS DEL SILENCIAMIENTO DE MYOCD EN TERMINOS DE NORMALIZACION DE LA EXPRESION CARDIACA GLOBAL Y EN TERMINOS DE FUNCIONALIDAD CARDIACA EN EL MODELO DE IC, LOS RESULTADOS ESPERADOS SERVIRAN PARA: (A) DEMOSTRAR, POR LA PRIMERA VEZ, SI LA SUPRESION DE LA SOBREEXPRESION DE MYOCD EN LA IC IN VIVO PODRIA SER BENEFICIOSO DESDE UN PUNTO DE VISTA TERAPEUTICO Y (B) FACILITAR LA APLICACION TRANSLACIONAL DE LOS RESULTADOS PARA EL DISEÑO DE ESTRATEGIAS TERAPEUTICAS DE LA IC A NIVEL DE LA MODIFICACION DE LA EXPRESION GENICA CARDIACA, expresión génica\myocardin\interferencia ARN\miocardium\insufencia cadiaca

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