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SAF2009-11614

Financiado
MODULACION POR EL PH DE LA TRANSMISION ELECTRICA MEDIADA POR LA CONEXINA-36. IMP...
MODULACION POR EL PH DE LA TRANSMISION ELECTRICA MEDIADA POR LA CONEXINA-36. IMPLICACIONES EN LA GENESIS DE LOS RITMOS CEREBRALES Y LA EPILEPSIA ANTECEDENTES, LA TRANSMISION NERVIOSA A TRAVES DE SINAPSIS DE TIPO ELECTRICO CONTRIBUYE A LA SINCRONIZACION DE LAS DESCARGAS ENTRE NEURONAS, A LA GENERACION DE LA ACTIVIDAD RITMICA EN LOS CIRCUITOS NEURALES Y ,EN LA EPILEPSIA, A L... ANTECEDENTES, LA TRANSMISION NERVIOSA A TRAVES DE SINAPSIS DE TIPO ELECTRICO CONTRIBUYE A LA SINCRONIZACION DE LAS DESCARGAS ENTRE NEURONAS, A LA GENERACION DE LA ACTIVIDAD RITMICA EN LOS CIRCUITOS NEURALES Y ,EN LA EPILEPSIA, A LA HIPERSINCRONIZACION DE LA ACTIVIDAD ELECTRICA, LA CONEXINA-36 (CX36) ES EL PRINCIPAL COMPONENTE DE SINAPSIS ELECTRICAS EN LAS NEURONAS CENTRALES, AL GEN DE LA CX36 SE LE CONSIDERA UN EXCELENTE CANDIDATO DE LA EPILEPSIA MIOCLONICA JUVENIL, YA QUE, LOCALIZA EN EL LOCUS 15Q14, EN UNO DE LOS LOCI DE SUSCEPTIBILIDAD IDENTIFICADOS POR LINAJE, UN ASPECTO FUNDAMENTAL DE LA TRANSMISION ELECTRICA ES SU PLASTICIDAD, A ESTE RESPECTO, HEMOS PUBLICADO RECIENTEMENTE QUE LOS CANALES DE CX36 SE CIERRAN POR ALCALOSIS, A DIFERENCIA DE OTROS CANALES DE CONEXINA QUE LO HACEN POR ACIDOSIS, ESTE HALLAZGO CONSTITUYE UN NUEVO PARADIGMA EXPERIMENTAL EN EL ESTUDIO DE LA MODULATION DE LA NEUROTRANSMISION ELECTRICA POR CAMBIOS EN EL PH Y DE CUAL ES LA RELEVANCIA DE ESTE TIPO DE REGULACION PARA EL FUNCIONAMIENTO DEL SNC EN CONDICIONES FISIOLOGICAS Y PATOLOGICAS, OBJETIVOS: 1) IDENTIFICAR LOS DETERMINANTES MOLECULARES Y ESTRUCTURALES DEL MECANISMO DE COMPUERTA REGULADO POR PH EN LOS CANALES DE CONEXINA-36,2) DETERMINAR LA RELEVANCIA FISIOLOGICA Y LAS CONSECUENCIAS PATOLOGICAS DE LA MODULACION DE LA TRANSMISION ELECTRICA POR LOS CAMBIOS ALCALOTICOS DEL PH EN LA GENERACION DE LOS RITMOS CEREBRALES Y LA EPILEPSIA, 3) DEMOSTRAR LA PATOGENICIDAD DE UNA MUTACION IDENTIFICADA EN EL GEN DE LA CONEXINA-36 EN UNA FORMA FAMILIAR DE EPILEPSIA MIOCLONICA JUVENIL MEDIANTE LA GENERACION DE UN MODELO DE RATON TRANSGENCO PORTADOR DE ESTA MUTACION, DISEÑO EXPERIMENTAL, LAS BASES MOLECULARES Y ESTRUCTURALES DEL MECANISMO DE COMPUERTA DE PH SE ANALIZARAN COMBINANDO LA MUTAGENESIS Y EL ENSAYO FUNCIONAL EN EL SISTEMA DE PARES DE OOCITOS DE XENOPUS CON LA ESPECTROSCOPIA DE RNM DE ALTA RESOLUCION, SE ESTUDIARA LA SENSIBILIDAD A PH DE LAS SINAPSIS DE CX36 ENTRE PARES DE NEURONAS INHIBITORIAS EN RODAJAS DE HIPOCAMPO, Y EL EFECTO DE LA ALCALINIZACION SOBRE EL RITMO GAMMA Y LAS DESCARGAS EPILEPTIFORMES INDUCIDAS POR EL KAINATO EN RATONES DEFICIENTES EN CX36, MEDIANTE REGISTROS DE EEG, SE DETERMINARA LA SUSCEPTIBILIDAD EPILEPTOGENICA DE LOS RATONES SIN CX36 VS, CONTROLES EN RESPUESTA A LA ALCALOSIS AGUDA INDUCIDA MEDIANTE HIPERVENTILACION E HIPERAMONEMIA, UTILIZANDO REGISTROS CRONICOS POLISOMNOGRAFICOS Y ANALISIS CUANTITATIVO DEL EEG SE EVALUARAN LAS POSIBLES ALTERACIONES EN LOS RITMOS CEREBRALES Y CIRCADIANOS (CICLO VIGILIA-SUEÑO) EN EL RATON SIN CX36 Y SUS MODIFICACIONES DURANTE LA HIPERAMONEMIA CRONICA (ALCALOSIS CRONICA), SE GENERARA Y CARACTERIZARA UN RATON TRANSGENICO QUE DE FORMA CONSTITUTIVA EXPRESE LA MUTACION IDENTIFICADA EN PACIENTES EPILEPTICOS,METODOLOGIA, CONSTRUCCION DE VECTORES DE EXPRESION Y DE RECOMBINACION HOMOLOGA, MUTAGENESIS DE LA CX36, EXPRESION Y REGISTRO DE LOS CANALES DE CX36 MUTADOS EN PARES DE OOCITOS DE XENOPUS, RMN DE ALTA RESOLUCION, MEDIDA DE LA CONDUCTANCIA INTERCELULAR CON LA TECNICA DE DOBLE FIJACION DE VOLTAJE, MEDIDAS DEL ACOPLAMIENTO ELECTRICO/CONDUCTANCIA INTERCELULAR MEDIANTE EL REGISTRO DE PARES DE INTERNEURONAS DEL HIPOCAMPO CON LA TECNICA DE PARCHES DE MEMBRANA EN SU CONFIGURACION DE CELULA ENTERA, MEDIDA DEL PH INTRACELULAR CON SNARF-1, EEG CORTICAL E HIPOCAMPICO, ANALISIS CUANTITATIVO DEL EEG, POLISOMNOGRAFIA, WESTERN BLOTTING, INMUNOCITOQUIMICA Y OTRAS TECNICAS HISTOLOGICAS, CONEXINA-36\CANALES INTERCELULARES\REGULATION POR PH\MUTAGENESIS\RMN\ALCALOSIS\RITMOS CEREBRALES\EPILEPSIA\ENCEFALOPATIA HIPERAMONEMICA\RATON KNOCK-OUT Y KNOCK-IN ver más
01/01/2009
FUNDACION PARA LA...
194K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2009-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 194K€
Líder del proyecto
FUNDACION PARA LA INVESTIGACION BIOMEDICA DEL... Otra investigación y desarrollo experimental en ciencias naturales y técnicas asociacion
Perfil tecnológico TRL 4-5 130K