Descripción del proyecto
EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO DE INVESTIGACION, ES AUMENTAR EL CONOCIMIENTO DEL EPITELIO Y EL MUSCULO BRONQUIAL HUMANO DE INDIVIDUOS NORMALES O PATOLOGICOS, MEDIANTE TECNICAS IN VITRO Y MODELOS IN VIVO QUE MIMETIZAN EL REMODELADO DE LAS VIAS AEREAS, TODO ESTE CONOCIMIENTO PUEDE AYUDAR A A DESCUBRIR NUEVAS TERAPIAS QUE MEJOREN LA FUNCION PULMONAR EN LOS PACIENTES CON EPOC.FARMACOS A UTILIZAR EN EL PROYECTO DE INVESTIGACION: INHIBIDORES DE LA FOSFODIESTERASA 4 (IPDE4) Y ANTIMUSCARINICOS (LAMA) Y AGONISTAS βADRENERGICOS (LABA) .MODELOS EXPERIMENTALES:ESTUDIOS IN VITRO EN CELULAS EPITELALES DE BRONQIO HUMANO, PROCEDENTE DE RESECCIONES QUIRURGICAS POR CANCER DE PULMON DE PACIENTES CLASIFICADOS EN: A) NO FUMADORES; B) FUMADORES CON FUNCION PULMONAR NORMAL Y QUE HAN FUMADO MAS DE 10 PAQUETES/AÑO; Y C) PACIENTES CON EPOC, QUE HAN FUMADO MAS DE 10 PAQUETES/AÑO Y UNA FUNCION PULMONAR DISMINUIDA (VEMS < 80 % Y UNA RELACION VEMS/CAPACIDAD VITAL < 70 %)CULTIVOS DE CELULAS EPITELIALES DIFERENCIADAS DE LOS TRES GRUPOS DE PACIENTES. ESTUDIO DEL EFECTO DEL HUMO DEL TABACO (1,2.5 Y 5 %). PARAMENTROS A DETERMINAR: ESTUDIO DE EMT (EXPRESION DE COLAGENO, FIBRONECTINA, α ACTINA Y E-SELECTINA); ESTUDIO DE LA PRODUCCION DE ESPECIES REACTIVAS DE OXIGENO, CAMBIOS DE LA HISTONA DEACETILASA, APOTOSIS, PROLIFERACION Y EXPRESION DE CITOQUINAS (IL-1β, TNF-α., IL-6, IL-13, GM-CSF), QUIMIOQUINAS (IL-8, FRACTALKINE), MOLECULAS DE ADHESION (ICAM-1 AND VCAM-1), EXPRESION DE LA INOS Y MUC5AC. ESTUDIO DEL MOVIMIENTO CILIAR.CULTIVOS PRIMARIOS DE CELULAS MUSCULARES. ESTUDIO DEL EFECTO DEL HUMO DEL TABACO (1,2.5 Y 5 %). PARAMETROS A DETERMINAR: PROLIFERACION, APOPTOSIS, MIGRACION/QUIMIOTAXIS, COLAGENO. PREPARACION DE RODAJAS DE PULMON PARA DETERMINAR RESPUESTAS FUNCIONALES COMO BRONCOCONSTRICIONCULTIVOS DE FIBROBLASTOS PULMONARES HUMANOS. ESTUDIO DEL EFECTO DEL HUMO DEL TABACO (1,2.5 Y 5 %). PARAMETROS A DETERMINAR: PROLIFERACION, COLAGENO, FIBRONECTINA, αACTINA, CTGF; ICAM-1.MODELO DE REMODELADO DE LAS VIAS AEREAS IN VIVOMODELO DE REMODELADO DE EPOC (EXPOSICION CRONICA HUMO DE TABACO). PARAMENTROS A DETERMINAR: ESTUDIO DE CELULAS, PROTEINAS EN EL LAVADO BRONQUIAL, MARCADORES DE ESTRES OXIDATIVO, CITOQUINAS, MOLECULAS DE ADHESION Y FACTORES DE TRANSCRIPCION. TUNEL, MMP-9, COLAGENO. HISTOLOGIA Y MORFOMETRIA DE LAS LESIONES PULMONARES. INMUNOHISTOQUIMICA. CASPASA 3. RODAJAS DE PULMON PARA DETERMINAR RESPUESTAS FUNCIONALES. ESTUDIO IN VIVO DE IMAGEN MOLECULARES DEL PULMON DE ANIMAL CON CT/PET/SPETMODELO DE DAÑO POR BLEOMICINA. PARAMENTROS A DETERMINAR: ESTUDIO DE CELULAS, COLAGENO, MARCADORES DE ESTER OXIDATIVO, CITOQUINAS, MOLECULAS DE ADHESION Y FACTORES DE TRASNCRIPCION. COAGULACION, MUC5AC. HISTOLOGIA Y MORFOMETRIA DE LAS LESIONES PULMONARES. INMUNOHISTOQUIMICA. CASPASA3. RODAJAS DE PULMON PARA DETERMINAR RESPUESTAS FUNCIONALES. ESTUDIO IN VIVO DE IMAGEN MOLECULARES DEL PULMON DE ANIMAL CON CT/PET/SPET.MODELO DE REMODELADO EN ASMA ALERGICA. PARAMENTROS A DETERMINAR: ESTUDIO DE CELULAS, PROTEINAS EN EL LAVADO BRONQUIAL, MARCADORES DE ESTER OXIDATIVO, CITOQUINAS, MOLECULAS DE ADHESION Y FACTORES DE TRANSCRIPCION. HISTONA DEACETILASA, COLAGENO. HISTOLOGIA Y MORFOMETRIA DE LAS LESIONES PULMONARES. INMUNOHISTOQUIMICA. CASPASA3. ODAJAS DE PULMON PARA DETERMINAR RESPUESTAS FUNCIONALES. ESTUDIO IN VIVO DE IMAGEN MOLECULARES DEL PULMON DE ANIMAL CON CT/PET/SPET. UMO TABACO\IPDE4\LABA\LAMA\EPOC\REMODELADO\PULMON HUMANO