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PGC2018-098532-A-I00

Financiado
MICROSCOPIA RAPIDA Y DE LOCALIZACION MEDIANTE ILUMINACION ESTRUCTURADA PARA EL E...
MICROSCOPIA RAPIDA Y DE LOCALIZACION MEDIANTE ILUMINACION ESTRUCTURADA PARA EL ESTUDIO DE POLARIZACION Y MIGRACION CELULAR MEDIADOS POR EL FLUJO DE ACTINA EN CELULAS VIVAS LA MICROSCOPIA DE SUPER RESOLUCION (SR) HA POSIBILITADO VISUALIZAR DETALLES MOLECULARES DENTRO DE CELULAS PARA ENTENDER LA MATERIA VIVA, SIN EMBARGO, LA ALTA INTENSIDAD DE LUZ DE LOS METODOS CONVENCIONALES DE SR PRODUCE EFECTOS DE... LA MICROSCOPIA DE SUPER RESOLUCION (SR) HA POSIBILITADO VISUALIZAR DETALLES MOLECULARES DENTRO DE CELULAS PARA ENTENDER LA MATERIA VIVA, SIN EMBARGO, LA ALTA INTENSIDAD DE LUZ DE LOS METODOS CONVENCIONALES DE SR PRODUCE EFECTOS DE FOTOBLANQUEADO Y FOTOTOXICIDAD QUE HAN LIMITADO LA CANTIDAD DE INFORMACION MOLECULAR DISPONIBLE OBTENIDA EN CELULAS VIVAS, E INCLUSIVE PUEDE INTERFERIR CON EL COMPORTAMIENTO CELULAR, EN PARTICULAR, LA VISUALIZACION DE CELULAS DINAMICAS DURANTE LA MIGRACION ESTA DIFICULTADA POR SU ALTA SENSIBILIDAD A LA LUZ, RESTRINGIENDO LAS APLICACIONES DE SR ACTUALES PARA EL ESTUDIO DE LA ORGANIZACION DINAMICA DEL CITOESQUELETO DE ACTINA DURANTE LA POLARIZACION Y LA MOTILIDAD, LA MICROSCOPIA DE ILUMINACION ESTRUCTURADA OFRECE UNA APROXIMACION ALTERNATIVA EXCEPCIONAL DE MICROSCOPIA DE SR PERMITIENDO LA ADQUISICION CON UNA MENOR INTENSIDAD DEL LASER DE EXCITACION DE VARIOS ORDENES DE MAGNITUD, Y HA DEMOSTRADO SER CAPAZ DE DETECTAR DETALLES CELULARES DURANTE HORAS SIN COMPROMETER LA FUNCION CELULAR,EN ESTE PROYECTO, NOS PROPONEMOS ESTABLECER UN METODO DE SR DE ILUMINACION ESTRUCTURADA QUE SUPERE EL LIMITE CLASICO DE LA MICROSCOPIA DE LOCALIZACION POR UN FACTOR DE 2, Y QUE SIMULTANEAMENTE PERMITA OBTENER SR EN CELULAS VIVAS POR PERIODOS PROLONGADOS A UNA VELOCIDAD DE ADQUISICION <10MS, EL NUEVO CONCEPTO ESTA BASADO EN LA MODIFICACION DE UN MICROSCOPIO DE ILUMINACION ESTRUCTURADA CON DISPOSITIVOS MICROESPEJADOS DIGITALES PERMITIENDO UN CAMBIO ULTRA RAPIDO DEL PATRON DEL HAZ, DE ESTA FORMA, PERSEGUIMOS UNA NUEVA TECNOLOGIA DE NANOSCOPIA DE CELULAS VIVAS, CON EL POTENCIAL ESPECIFICO DE RESOLVER CARACTERISTICAS MOLECULARES CON UN BAJO COSTO DE FOTONES Y MINIMOS EFECTOS FOTOTOXICOS, COMBINADO CON ILUMINACION ESTRUCTURADA EN TIRF DE ALTA-AN CREAREMOS UN MICROSCOPIO DE SR MULTIMODAL DE DOBLE COLOR CON LA CAPACIDAD DE RESOLVER DETALLES ESTRUCTURALES DINAMICOS A LA VEZ DE DETECTAR MOLECULAS INDIVIDUALES CON UNA RESOLUCION TEMPORAL DE 10MS Y UNA ESPACIAL DE 5-80NM,APLICAREMOS ESTE METODO PARA OBTENER DETALLES MOLECULARES SIN PRECEDENTES SOBRE LAS DINAMICAS NANOSCOPICAS DE LA ORGANIZACION DEL CITOESQUELETO DE ACTINA Y LA POLARIZACION DE CELULAS MOTILES, LA DINAMICA DEL CITOESQUELETO DE ACTINA SIRVE COMO UN REGULADOR CLAVE DE LA MIGRACION CELULAR, CONTROLANDO LA MORFODINAMICA CELULAR, LA VELOCIDAD DE MIGRACION Y LOS PATRONES DE MOVIMIENTO DE LARGO TERMINO DE CELULAS MOTILES, RECIENTEMENTE HEMOS MOSTRADO QUE LOS FLUJOS DE ACTINA EN CELULAS MOTILES INFLUENCIAN LA ESTABILIDAD DE LA POLARIZACION CELULAR Y LOS TIPOS DE MIGRACION (AL AZAR, PERSISTENTE, INTERMITENTE), ASI MODULANDO EL CAMINO DE MIGRACION EXPLORATIVA DE CELULAS INMUNES PARA LA EFICIENTE BUSQUEDA DE DIANAS, SIN EMBARGO, TODAVIA NO SE COMPRENDE COMO LA RED DEL CITOESQUELETO Y LOS FLUJOS DINAMICOS DE ACTINA INFLUENCIAN LA POLARIDAD CELULAR, NOSOTROS APLICAREMOS MICROSCOPIA DE DOBLE/MULTIPLE COLOR A UNA MAXIMA RESOLUCION ESPACIAL Y TEMPORAL DE 80NM-10MS PARA MEDIR LA ORGANIZACION DEL CITOESQUELETO Y LA SEÑALIZACION ASOCIADA, MIENTRAS MONITOREAMOS GLOBALMENTE EL COMPORTAMIENTO DE MIGRACION CELULAR EN CONDICIONES DE ADQUISICION MINIMAMENTE INVASIVAS, ESTO NOS PERMITIRA OBTENER PARAMETROS MOLECULARES CUANTITATIVOS SOBRE LA DINAMICA DE MIGRACION DE CELULAS VIVAS Y ESTABLECER MODELOS MECANISTICOS DE COMO LAS INTERACCIONES MECANO-QUIMICAS EN CELULAS MOTILES DETERMINAN LA POLARIZACION CELULAR Y EL COMPORTAMIENTO DE MIGRACION DE LARGO TERMINO EN VARIOS ENTORNOS 2D AND 3D, MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA AVANZADA\MICROSCOPÍA DE SUPER RESOLUCIÓN\MICROSCOPÍA DE ILUMINACIÓN ESTRUCTURADA\BIOFÍSICA\DINÁMICAS MOLECULARES\CITOESQUELETO\MIGRACIÓN Y POLARIDAD CELULAR\BIOLOGÍA DE SISTEMAS CELULAR ver más
01/01/2018
FUNDACIO INSTITUT...
106K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2018-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 106K€
Líder del proyecto
FUNDACIO INSTITUT DE CIENCIES FOTONIQUES Otra investigación y desarrollo experimental en ciencias naturales y técnicas asociacion
Perfil tecnológico TRL 4-5 50K