Descripción del proyecto
LA CONSERVACION EX SITU DE ESPECIES SILVESTRES Y RAZAS DOMESTICAS AMENAZADAS REQUIERE UNA OPTIMIZACION DE LOS PROCEDIMIENTOS PARA LA CRIOPRESERVACION DE ESPERMATOZOIDES. A PESAR DE LOS AVANCES RECIENTES EN ESTE CAMPO, LAS TASAS DE FERTILIDAD EN PEQUEÑOS RUMIANTES DOMESTICOS Y SILVESTRES, CUANDO SE UTILIZAN ESPERMATOZOIDES CRIOPRESERVADOS, SUELEN SER BAJAS, DESCONOCIENDOSE LOS MECANISMOS SUBYACENTES QUE DETERMINAN LA VARIACION EN LA CRIORRESISTENCIA. SE PUEDEN OBTENER ESPERMATOZOIDES VIABLES DEL EPIDIDIMO DE ANIMALES MUERTOS O CASTRADOS, PERO ESTE RECURSO ES LIMITADO Y LA FUERTE ESTACIONALIDAD EN SU ACTIVIDAD REPRODUCTIVA LIMITA LA RECOLECCION DE ESPERMATOZOIDES, CASI DE FORMA EXCLUSIVA, A LA TEMPORADA DE CELO. EN ESOS CASOS, LA CRIOPRESERVACION DE TEJIDO TESTICULAR PUEDE OFRECER UNA ALTERNATIVA DE OBTENCION DE CELULAS GERMINALES, DENTRO DE UN ABORDAJE GLOBAL DE PROGRAMAS DE CONSERVACION EX SITU. NUESTRO GRUPO DE INVESTIGACION HA DEMOSTRADO QUE EL ESTADO ENDOCRINO PUEDE AFECTAR EL DAÑO CRIOGENICO DE LOS ESPERMATOZOIDES. LOS ALTOS NIVELES DE TESTOSTERONA AFECTAN LA CRIO-RESISTENCIA DE ESPERMATOZOIDES DE MACHOS CABRIOS, CARNEROS, MUFLONES Y CABRAS MONTESAS. LOS ESPERMATOZOIDES DE PEQUEÑOS RUMIANTES DOMESTICOS Y SILVESTRES EXPRESAN ACUAPORINAS (AQP3, AQP7 Y QP10), QUE INTERVIENEN EN LA REGULACION DEL VOLUMEN DE ESPERMATOZOIDES. PRESUMIMOS QUE LA TESTOSTERONA PUEDE AFECTAR LA UBICACION Y LA REDISTRIBUCION DEL AQP Y EL METABOLISMO DE LOS ESPERMATOZOIDES, MODIFICANDO LA CRIO-RESISTENCIA DE LOS ESPERMATOZOIDES.POR OTRO LADO, LOS ESPERMATOZOIDES EPIDIDIMARIOS MUESTRAN MAYOR CRIORRESISTENCIA QUE LOS ESPERMATOZOIDES EYACULADOS; EL PROTEOMA DEL ESPERMA PARECE AFECTAR LA CRIO-RESISTENCIA CELULAR. ANTERIORMENTE, HEMOS INVESTIGADO LAS DIFERENCIAS DE LA CAPACIDAD DE CONGELACION DE LOS ESPERMATOZOIDES Y EL PROTEOMA ENTRE LOS ESPERMATOZOIDES EPIDIDIMARIOS Y EYACULADOS EN UNGULADOS DE MONTAÑA (MACHO MONTES, REBECO, MUFLON). LAS COMPARACIONES ENTRE ESPECIES REVELARON ALGUNAS PROTEINAS QUE ERAN MAS ABUNDANTES EN EL EPIDIDIMO QUE EN EL ESPERMA EYACULADO; MUCHAS DE ELLAS (P. EJ., LACTOFERRINA, FOSFOGLICERATO MUTASA 2) TIENEN PROPIEDADES ANTI-APOPTOTICAS, PARTICIPAN EN LA HOMEOSTASIS REDOX Y, POR TANTO, PODRIAN ESTAR ASOCIADOS CON UNA MAYOR CAPACIDAD DE CRIO-RESISTENCIA. PARA DISMINUIR EL RIESGO DE FORMACION DE CRISTALES DE HIELO INTRA-CITOPLASMATICOS QUE CONDUCEN A LA DESTRUCCION DE LOS ORGANOIDES, SE ESPERA QUE UNA TASA DE ENFRIAMIENTO CRECIENTE EN DOS PASOS, A 60 ° C / MIN DESDE -10 ° C (DESPUES DE LA NUCLEACION DEL HIELO), PODRIA PROPORCIONAR UNA MEJOR SUPERVIVENCIA CELULAR. LA SUPLEMENTACION DEL MEDIO DE CONGELACION CON ESTAS PROTEINAS, ADEMAS DE LAS TASAS DE ENFRIAMIENTO OPTIMIZADAS, PODRIA MEJORAR LA CRIOPRESERVACION DE ESPERMA Y TEJIDO TESTICULAR EN PEQUEÑOS RUMIANTES. LOS OBJETIVOS PRINCIPALES DEL PROYECTO SON: I) INVESTIGAR EL PAPEL DE LOS ANDROGENOS, EL METABOLISMO DE LOS ESPERMATOZOIDES Y LA LOCALIZACION DE LOS AQP EN LA CRIORRESISTENCIA DE LOS ESPERMATOZOIDES; II) EXPLORAR NUEVOS PROCEDIMIENTOS PARA CRIOPRESERVAR ESPERMATOZOIDES Y TEJIDO TESTICULAR EN RUMIANTES. UMIANTES\TESTICULO\METABOLISMO ESPERMATICO\ACUAPORINAS\ANDROGENOS\CRIORRESISTENCIA\ESPERMATOZOIDES