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PID2021-123091NB-C22

Financiado

MAPEADO DE PROTEINAS DE UNION ESPERMATICAS Y CARACTERIZACION DEL INTERCAMBIADOR...

MAPEADO DE PROTEINAS DE UNION ESPERMATICAS Y CARACTERIZACION DEL INTERCAMBIADOR NEH-11 (CLC9C2) DURANTE LA FECUNDACION EN MAMIFEROS: MICROSCOPIA DE ALTA RESOLUCION Y TECNOLOGI EL ESPERMATOZOIDE EN MAMIFEROS NECESITA ADQUIRIR LA CAPACIDAD DE FECUNDAR AL OVOCITO MEDIANTE UN PROCESO DENOMINADO CAPACITACION. UNA VEZ CAPACITADO, CUANDO SE ENCUENTRA CON EL OVOCITO, DESPUES DE ATRAVESAR LAS CELULAS DEL CUMULO,... ver más

01/01/2021

143K€

Presupuesto del proyecto: 143K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE ALICANTE No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 1047

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2021-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE ALICANTE No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 1047

Presupuesto del proyecto 143K€

Descripción del proyecto EL ESPERMATOZOIDE EN MAMIFEROS NECESITA ADQUIRIR LA CAPACIDAD DE FECUNDAR AL OVOCITO MEDIANTE UN PROCESO DENOMINADO CAPACITACION. UNA VEZ CAPACITADO, CUANDO SE ENCUENTRA CON EL OVOCITO, DESPUES DE ATRAVESAR LAS CELULAS DEL CUMULO, ES NECESARIO UN RECONOCIMIENTO ENTRE GAMETOS ESPECIE ESPECIFICO EN LA ZONA PELUCIDA (ZP), MEDIADO POR PROTEINAS DE UNION ESPERMATICAS. LA HIPOTESIS MAS RECIENTE DEFIENDE QUE HAY COMPLEJOS MULTIPROTEICOS EN LA SUPERFICIE ESPERMATICA, CON DIFERENTES IMPLICACIONES EN LOS PASOS DE LA FECUNDACION, INCLUSO INVOLUCRADOS EN MAS DE UN EVENTO. LOS HALLAZGOS CONOCIDOS SOBRE ESTOS RECEPTORES SE BASAN EN LA HIPOTESIS EN LA QUE EL RECONOCIMIENTO DE LA ZP SE LLEVA A CABO POR PROTEINAS PRESENTES EN LA CABEZA DEL ESPERMATOZOIDE INTACTO (SIN REACCIONAR) COMO OCURRE EN HUMANOS. SIN EMBRAGO EN ESPECIES COMO EL RATON O CONEJO SE HA DOCUMENTADO QUE EL ESPERMATOZOIDE DESENCADENA LA REACCION ACROSOMICA DURANTE EL PASO A TRAVES DE LAS CELULAS DEL CUMULO O INCLUSO ANTES. POR LO QUE, CUANDO ALCANZA EL OVOCITO EL CONTACTO SERA ENTRE LA MEMBRANA ACROSOMAL INTERNA Y LA ZP DEL GAMETO FEMENINO. ES POR ELLO POR LO QUE NOS PLANTEAMOS ESTUDIAR LA REDISTRIBUCION DE LOS RECEPTORES ESPERMATICOS EN DIFERENTES CONDICIONES FISIOLOGICAS. POR OTRA PARTE, LOS ANIMALES MODIFICADOS GENETICAMENTE SON HERRAMIENTAS MUY UTILES PARA DEMOSTRAR EL PAPEL POSIBLES MOLECULAS IMPLICADAS EN LA FECUNDACION. USANDO LA TECNOLOGIA CRISPR-CAS9, NUEVAS PROTEINAS HAN SIDO PROPUESTAS COMO NECESARIAS PARA LA FECUNDACION. CON RELACION A ESTO, PROPONEMOS EN ESTE SUBPROYECTO EL ANALISIS CUANTITATIVO Y CUALITATIVO DE LAS PROTEINAS ZONADHESIN, IZUMO1, SPACA6, TMEM95, FIMP Y SOF1 EN HAMSTER, CONEJO, BOVINO Y TORO. ADEMAS, PARA CONOCER SI ESTOS MECANISMOS MOLECULARES PUEDEN SER CONSERVADOS EN DIFERENTES ESPECIES DE MAMIFEROS Y EN BASE A LA EXPERIENCIA DE NUESTRO EQUIPO, ESTAS PROTEINAS DE UNION ESPERMATICAS SERAN ANALIZADAS EN LAS ESPECIES MENCIONADAS Y EN LOS ESPERMATOZOIDES HUMANOS TAMBIEN. AL SER UN PROYECTO COORDINADO, NOS PERMITIRA TRANSFERIR LOS RESULTADOS DE ALGUNA DE ESTAS PROTEINAS ANALIZADAS PARA LA MEJORA DEL DESARROLLO IN VITRO EN ALGUNAS ESPECIES DE INTERES COMO LA VACA. EL ANALISIS DE LA DENSIDAD Y DISTRIBUCION TOPOGRAFICA DE ESTOS RECEPTORES, ANTES Y DESPUES DE LA CAPACITACION Y REACCION ACROSOMICA SERA REALIZADO MEDIANTE MICROSCOPIA CONFOCAL Y FIELD EMISSION SCANNING ELECTRON MICROSCOPY (FESEM), COMBINADO CON ORO COLOIDAL. ADEMAS, EN ESTE PROYECTO COORDINADO, EL MODELO DE CONEJO SE USARA PARA ESTUDIAR LOS GENES INVOLUCRADOS EN LA ESPERMATOGENESIS. NOS PROPONEMOS EL RETO TECNOLOGICO DE GENERAR UN MODELO KNOCKOUT EN CONEJO USANDO LA TECNOLOGIA CRISPR-CAS9. EL GEN SELECCIONADO PARA ESTE PROYECTO ES SLC9C2 (TAMBIEN CONOCIDO COMO NHE11, SPERM-SPECIFIC NA + / H + EXCHANGER). EN TRABAJOS PREVIOS SE LOCALIZO SNHE (SLC9C1) EN LA MEMBRANA PLASMATICA DEL FLAGELO EN ESPERMATOZOIDES DE RATON. EN LOS ESPERMATOZOIDES DE SNHE KO DE RATON SE OBSERVO ALTERACIONES EN LA MOTILIDAD ESPERMATICA, Y EN EL METABOLISMO DEL CAMP, PERO NO SE HA ASOCIADO CON LA FERTILIDAD EN HUMANOS. SIN EMBARGO, HASTA LA FECHA, NO SE HA DEMOSTRADO EL PAPEL FUNCIONAL DE SLC9C2. NUESTRO ANALISIS BIOINFORMATICO MOSTRO QUE ESTE GEN, CUYA EXPRESION SE HA VISTO EN PIEL, TEJIDO CONECTIVO Y TESTICULO EN HUMANOS, ESTA AUSENTE EN RATON Y PRESENTE EN CONEJO. POR LO QUE EL RATON ES UN MODELO UTIL PARA CONOCER EL PAPEL DE SLC9C2 EN LA ESPERMATOGENESIS Y FISIOLOGIA DEL ESPERMATOZOIDE. SPERMATOZOIDE\KNOCKOUT\ESPERMATOGENESIS\INMUNOCITOQUIMICA\MICROSCOPIA ELECTRONICA\CRISPR-CAS9\INFERTILIDAD\REACCION ACROSOMICA\CAPACITACION

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