Descripción del proyecto
LA RUTA MEN (MITOTIC EXIT NETWORK) ES UNA CASCADA DE SEÑALIZACION QUE PROMUEVE LA SALIDA DE MITOSIS EN SACCHAROMYCES CEREVISIAE, MEN REGULA UNA DE LAS ETAPAS CLAVE EN EL CICLO CELULAR, PROMOVIENDO LA SALIDA DE MITOSIS GRACIAS AL MANTENIMIENTO DE UNA LIBERACION PERMANENTE DE LA PROTEINA FOSFATASA CDC14 DESDE EL NUCLEOLO HACIA EL NUCLEO Y EL CITOPLASMA, DONDE FOSFORILA UNA SERIE DE SUSTRATOS CON EL FIN DE PROMOVER LA DEGRADACION DE CICLINAS MITOTICAS, LA RUTA MEN ES UNA CASCADA DE SEÑALIZACION SIMILAR A RAS, LA GTPASA TEM1 Y LA PROTEINA ACTIVADORA DE GTPASA DE DOS COMPONENTES BFA1-BUB2, QUE FUNCIONAN EN LO MAS ALTO DE LA RUTA, SE LOCALIZAN UNICAMENTE EN EL CUERPO POLAR DEL HUSO MITOTICO (SPB, EL EQUIVALENTE DEL CENTROSOMA EN LEVADURAS) QUE ENTRA EN LA CELULA HIJA DURANTE ANAFASE, MIENTRAS QUE SON EXCLUIDAS DEL SPB QUE PERMANECE EN LA CELULA MADRE, SE DESCONOCE LA CAUSA DE ESTA ASIMETRIA, PERO SE HA DEMOSTRADO QUE ES ESENCIAL PARA EL CORRECTO CONTROL TEMPORAL Y ESPACIAL DE MEN Y SE HA CONSERVADO TANTO EN LEVADURAS DE GEMACION COMO EN LEVADURAS DE FISION, NUESTROS RESULTADOS PRELIMINARES SUGIEREN DOS POSIBLES MECANISMOS PARA EL ESTABLECIMIENTO DE LA LOCALIZACION ASIMETRICA DEL COMPLEJO TEM1: (I) QUE LA ASIMETRIA SEA ORIGINADA POR LA FUERZA DE ARRASTRE GENERADA SOBRE LOS SPBS POR LOS MICROTUBULOS DURANTE EL POSICIONAMIENTO DEL HUSO, O (II) QUE ESTE CAUSADA POR DIFERENCIAS EN LA INCORPORACION DEL COMPLEJO SOBRE LOS SPBS, ORIGINADAS EN BASE A INTERACCIONES ESPECIFICAS DE LOS MICROTUBULOS CON EL CORTEX DE LA GEMACION, LOS OBJETIVOS DE ESTE PROYECTO SON: (I) DETERMINAR EL MECANISMO POR EL QUE SE GENERA LA ASIMETRIA EN LA LOCALIZACION DEL COMPLEJO TEM1, Y EVALUAR EL PAPEL JUGADO EN LA MISMA POR PROTEINAS QUE, O BIEN INTERACCIONAN DIRECTAMENTE CON EL COMPLEJO TEM1, O BIEN SON NECESARIAS PARA EL ESTABLECIMIENTO DE POLARIDAD EN LA CELULA; (II) DESARROLLAR ¿SCREENINGS¿ GENETICOS QUE IDENTIFIQUEN GENES REQUERIDOS PARA LA LOCALIZACION ASIMETRICA DE BFA1, BUB2 Y TEM1 A LOS SPBS; (III) IDENTIFICAR LAS REGIONES EN BFA1, BUB2 Y TEM1 QUE SON NECESARIAS PARA SU LOCALIZACION Y PARA LA GENERACION DE ASIMETRIA; Y (IV) COMPROBAR LOS EFECTOS DE LA PERTURBACION DE LA ASIMETRIA EN LA LOCALIZACION DEL COMPLEJO TEM1 SOBRE LA PROGRESION A LO LARGO DEL CICLO CELULAR, LA RESPUESTA A ESTAS CUESTIONES INCREMENTARA NUESTRO CONOCIMIENTO SOBRE LA REGULACION DE LA SALIDA DE MITOSIS Y DE LOS MECANISMOS QUE CONTROLAN EL CICLO CELULAR, PUESTO QUE UNA DE LAS FUNCIONES CLAVE DE MEN ES EL MANTENIMIENTO DE LA PLOIDIA, Y ESTA SE VE A MENUDO AFECTADA EN TUMORES, NUESTRA INVESTIGACION AYUDARA TAMBIEN A ESCLARECER UNA DE LAS ETAPAS CLAVE EN LA INICIACION DE LA FORMACION DE TUMORES, LA PERDIDA DE LA EUPLOIDIA, ciclo celular\mitosis\MEN\Saccharomyces cerevisiae