Descripción del proyecto
LA PRINCIPAL TOXINA ASP, EL ACIDO DOMOICO, SE ACUMULA EN LA GLANDULA DIGESTIVA DE LA VIEIRA PECTEN MAXIMUS DURANTE PERIODOS MUCHO MAS LARGOS QUE EN OTROS BIVALVOS, LO CUAL IMPIDE QUE ESTA ESPECIE SEA UTILIZADA EN ACUICULTURA Y DIFICULTA SUSTANCIALMENTE LA EXPLOTACION DE SUS POBLACIONES NATURALES. ESTUDIOS RECIENTES DE ESTE EQUIPO HAN MOSTRADO QUE LA TOXINA SE ENCUENTRA LIBRE EN EL CITOPLASMA DE LAS CELULAS DE DICHO ORGANO, POR LO QUE LA EXPLICACION MAS PROBABLE PARA LA ELEVADA RETENCION DEL COMPUESTO ES LA CARENCIA O INEFICACIA DE TRANSPORTADORES DE MEMBRANA QUE FACILITEN SU EXCRECION. LA ALTA ACUMULACION HACE QUE NO SEA POSIBLE ENCONTRAR INDIVIDUOS SIN TOXINA, LO CUAL DIFICULTA LOS ESTUDIOS EXPERIMENTALES.PARA TRATAR DE ABRIR VIAS DE SOLUCION PARA EL PROBLEMA HEMOS CONSIDERADO INDISPENSABLE CARACTERIZAR, INICIALMENTE, EL/LOS TRANSPORTADORES IMPLICADOS UTILIZANDO TRES ESTRATEGIAS COMPLEMENTARIAS: A) GENOMICA, IDENTIFICANDO LOS POSIBLES GENES IMPLICADOS; B) METABOLOMICA, IDENTIFICANDO ALGUNOS METABOLITOS RELACIONADOS CON LA ACUMULACION DE ACIDO DOMOICO Y C) FISIOLOGICA: IDENTIFICANDO INHIBIDORES DE TRANSPORTADORES DE MEMBRANA O DE PROCESOS ASOCIADOS AL TRANSPORTE, QUE REDUCEN SU TASA DE ELIMINACION EN LAS ESPECIES QUE DEPURAN RAPIDAMENTE.EN EL PROYECTO COORDINADO, UTILIZANDO ESTA ESTRATEGIA COMBINADA SE IDENTIFICARAN LOS CANDIDATOS MAS PROBABLES DE ENTRE LOS TRANSPORTADORES Y SE COMPROBARA LA EXPRESION DE LOS GENES QUE LOS REGULAN CUANDO LOS BIVALVOS ESTAN EXPUESTOS A LA TOXINA. ESTE SUBPROYECTO SE OCUPARA DE LLEVAR A CABO LA PARTE EXPERIMENTAL Y ANALITICA Y LOS ESTUDIOS DE METABOLOMICA NECESARIOS PARA EL DESARROLLO DE LOS DOS SUBPROYECTOS, LLEVANDO A CABO EXPERIMENTOS DE EXPOSICION DE DOS ESPECIES AL ACIDO DOMOICO, DE INHIBICION SELECTIVA DE TRANSPORTADORES DE MEMBRANA Y DE PROSPECCION DE OTROS AMINOACIDOS Y METABOLITOS QUE PUDIERAN TENER RELACION CON LA ACUMULACION DE ACIDO DOMOICO, ESPECIAMENTE EN LA VIEIRA.ADICIONALMENTE SE PROBARA LA CAPACIDAD DE DISTINTAS SUSTANCIAS, ENTRE ELLAS METALES, PARA LIGAR ACIDO DOMOICO Y POR TANTO CON POTENCIALIDAD PARA HABILITAR RUTAS DE ELIMINACION DE LAS CELULAS DIFERENTES DE LAS DE LA MOLECULA LIBRE.LOS ESTUDIOS SE REALIZARAN MEDIANTE LA EXPOSICION DE VIEIRAS Y MEJILLONES A CELULAS TOXICAS Y ACIDO DOMOICO DISUELTO, MEDIANTE EL ANALISIS DETALLADO DE POBLACIONES NATURALES DE VIERA Y MEDIANTE LA EXPOSICION DE FRAGMENTOS DE TEJIDOS CON TOXINA A INHIBIDORES DE TRANSPORTADORES DE MEMBRANA Y DE PROCESOS RELACIONADOS. LOS ANALISIS DE ACIDO DOMOICO Y LOS ESTUDIOS DE METABOLITOS SE REALIZARAN MEDIANTE UHPLC-MS O UHPLC-MSN UTILIZANDO POSTERIORMENTE HERRAMIENTAS DE LIBRE ACCESO DE METABOLOMICA.