Descripción del proyecto
ANTE SITUACIONES AMBIENTALES ADVERSAS LAS BACTERIAS NO DIFERENCIADAS ADOPTAN EL FENOTIPO VIABLE NO CULTIVABLE (VNC). LA CARACTERISTICA MAS DESTACABLE DE ESTE FENOTIPO ES LA PERDIDA DE CULTIVABILIDAD MANTENIENDO ACTIVIDAD FISIOLOGICA. NUESTRO EQUIPO HA DESCRITO LOS CAMBIOS MORFOLOGICOS, FISIOLOGICOS Y ALGUNAS VARIACIONES EN EL PROTEOMA QUE EXPERIMENTA E. COLI EN EL TRANSITO CULTIVABLE-VNC CUANDO SE INCORPORA A LOS SISTEMAS ACUATICOS. LA TEMPERATURA SUBOPTIMA PARA EL CRECIMIENTO, LA LIMITACION DE NUTRIENTES, EL EFECTO DE LA LUZ VISIBLE Y ULTRAVIOLETA Y LA SALINIDAD, CONDICIONES INHERENTES A LOS SISTEMAS ACUATICOS, SON FACTORES DE ESTRES PARA E. COLI QUE RESPONDE ADOPTANDO EL FENOTIPO VNC. ESTE COMPORTAMIENTO SE HA DESCRITO EN MAS DE 60 ESPECIES BACTERIANAS ENTRE ELLAS PATOGENOS COMO VIBRIO CHOLERAE, CAMPYLOBACTER JEJUNI, SALMONELLA SPP. LAS BACTERIAS EN EL ESTADO VNC SON BACTERIAS VIVAS QUE NO PUEDEN SER DETECTADAS POR LOS METODOS TRADICIONALES DE CULTIVO DEBIDO A SU INCAPACIDAD PARA CRECER. ESTA SITUACION JUNTO AL HECHO COMPROBADO DE QUE ALGUNAS ESPECIES, POR EJEMPLO V. CHOLERAE, SON CAPACES DE RECUPERAR LA CAPACIDAD DE CRECER Y COLONIZAR CUANDO LAS CONDICIONES AMBIENTALES SE TORNAN FAVORABLES, CONVIERTE A LAS BACTERIAS QUE ADOPTAN ESTE FENOTIPO EN UN RIESGO POTENCIAL PARA LA SALUD PUBLICA. A LO LARGO DEL AÑO, SE HA DEMOSTRADO QUE, DURANTE LA EPOCA FRIA, NO SE DETECTA LA PRESENCIA DEL GENERO VIBRIO EN LOS MEDIOS ACUATICOS. SE HA DEMOSTRADO QUE, EN RESPUESTA A LA TEMPERATURA SUBOPTIMA, ESTA BACTERIA ADOPTA EL ESTADO VNC. CUANDO LAS TEMPERATURAS INCREMENTAN, MESES CALIDOS, VIBRIO ES DE NUEVO DETECTABLE PUDIENDO PRODUCIRSE BROTES DE ENFERMEDADES ASOCIADAS.SE HAN DESCRITO ALGUNAS CARACTERISTICAS FISIOLOGICAS Y MOLECULARES ASOCIADAS AL COMPORTAMIENTO DE ESTAS BACTERIAS FRENTE AL ESTRES; SIN EMBARGO, LOS MECANISMOS REGULADORES DE LA RESPUESTA AL AMBIENTE ADVERSO SON POCO CONOCIDOS Y REQUIEREN UN ESTUDIO EN PROFUNDIDAD. DEL MISMO MODO, LA REVERSION DEL FENOTIPO VNC CUANDO AUMENTA LA TEMPERATURA MERECE UN ESTUDIO EXHAUSTIVO. EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES AHONDAR EN LOS CAMBIOS MORFOLOGICOS Y FISIOLOGICOS QUE SE PRODUCEN EN UN MODELO EXPERIMENTAL, V. HARVEYI, EN RESPUESTA AL ESTRES AMBIENTAL, FUNDAMENTALMENTE EL DESCENSO DE LA TEMPERATURA, ASI COMO CONOCER LOS ASPECTOS MOLECULARES RESPONSABLES DE ESTOS CAMBIOS QUE ADEMAS, REGULAN LA RESPUESTA AL ESTRES. EMPLEAREMOS, COMO HERRAMIENTAS, MICROSCOPIA DE EPIFLUORESCENCIA, CITOMETRIA DE FLUJO, TECNICAS PROTEOMICAS, PERFILES DE RNA Y APROXIMACIONES DE GENETICA MOLECULAR ORIENTADAS A DESCUBRIR LA LLAVE DE LOS FACTORES CELULARES QUE SE MANIFIESTAN EN RESPUESTA AL AMBIENTE ADVERSO. EL CONOCIMIENTO, DERIVADO DEL EMPLEO DE HERRAMIENTAS DE PROTEOMICA Y TRANSCRIPTOMICA PARA CARACTERIZAR EL FENOTIPO VNC, NOS PROPORCIONARA DATOS DE INTERES PARA ENTENDER EL PROCESO DE RESUCITACION. OTROS OBJETIVOS DE ESTE PROYECTO SON EL DISEÑO DE NUEVOS PROTOCOLOS DE RESUCITACION Y EL DISEÑO DE METODOS DE DETECCION DE CELULAS VNC. ADEMAS DE PERMITIRNOS CONOCER EL CONTROL MOLECULAR DE LA RESPUESTA DE VIBRIO AL ESTRES, LOS RESULTADOS DEL PROYECTO PUEDEN TENER IMPLICACIONES EN EL CAMPO DE LA BIOMEDICINA IMPULSANDO EL DESARROLLO DE NUEVAS ESTRATEGIAS DE DETECCION Y CONTROL DE LA SUPERVIVENCIA Y DISEMINACION DE PATOGENOS EN EL MEDIO AMBIENTE. LOS RESULTADOS PUEDEN RESULTAR DE INTERES EN EL DISEÑO DE NUEVAS DIANAS PARA FARMACOS ANTIBACTERIANOS Y CONTRIBUIR A MEJORAR EL CONTROL DE CALIDAD BACTERIANA EN AGUAS Y ALIMENTOS. IBRIO\PROTEOMA\RESUCITACION\CULTIVABILIDAD\VIABILIDAD\CICLO\TEMPERATURA