Descripción del proyecto
ESTE PROYECTO SE ENFOCA EN LA IDENTIFICACION Y ESTUDIO FUNCIONAL DE INTERACCIONES ENTRE PROTEINAS VIRALES Y DEL HUESPED DURANTE EL CICLO INFECTIVO DE POTYVIRUS Y DE CUCUMOVIRUS EN PLANTAS SUSCEPTIBLES Y, EN EL CASO DE POTYVIRUS, TAMBIEN EN SU VECTOR TRANSMISOR, AMBOS TIPOS DE VIRUS TIENEN GRAN IMPORTANCIA ECONOMICA EN LA AGRICULTURA DE NUESTRO PAIS Y DEL MUNDO, ESTOS PROCESOS INTERACTIVOS OCURREN EN ESPACIOS DEFINIDOS, COMO EL DE LA CELULA VEGETAL, DONDE FACTORES VIRALES Y DE LA PLANTA INTERACCIONAN FORMANDO PARTE DE ESTRUCTURAS MOLECULARES DE ORDEN SUPERIOR, QUE DETERMINAN SU ACTIVIDAD BIOLOGICA, POR ELLO, NUESTRO RAZONAMIENTO DE PARTIDA ES QUE EL USO COMBINADO DE TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR Y DE BIOLOGIA CELULAR [EXPRESION TRANSITORIA DE GENES VIRALES O DE LA PLANTA (MEDIANTE T-DNAS AGROINFILTRADOS), VISUALIZACION DE PROTEINAS Y DE INTERACCIONES ENTRE PROTEINAS IN VIVO (MEDIANTE MARCAJE Y MICROSCOPIA EPIFLUORESCENTE Y CONFOCAL, Y COMPLEMENTACION BIMOLECULAR FLUORESCENTE, BIFC), SILENCIAMIENTO DE GENES ESPECIFICOS (MEDIANTE VIRAL-INDUCED GENE SILENCING, VIGS), Y ENSAYOS DE ACTIVIDAD BIOLOGICA IN PLANTA DE LOS FACTORES INVOLUCRADOS] PERMITIRA ESTABLECER UNA RELACION CAUSAL ENTRE LA INTERACCION VISUALIZADA Y SU FUNCION BIOLOGICA, LOS CONOCIMIENTOS ADQUIRIDOS EN ESTOS ESTUDIOS DE INTERACCIONES MOLECULARES PODRIAN SER BASE PARA EL DESARROLLO DE NUEVAS ESTRATEGIAS DE INTERFERENCIA CON LAS MISMAS Y POR TANTO CON EL CICLO INFECTIVO VIRAL, DE UN MODO CONCISO LOS OBJETIVOS PROPUESTOS SON LOS SIGUIENTES: 1, DETERMINAR LOS ESTADOS FUNCIONALES DE SUPRESORES VIRALES DE SILENCIAMIENTO GENICO, Y EL EFECTO DE LA COMPARTIMENTALIZACION SUBCELULAR Y DE LA INTERACCION CON FACTORES DE LA PLANTA EN SU ACTIVIDAD BIOLOGICA, DURANTE LA INFECCION POR POTYVIRUS Y CUCUMOVIRUS, 2, VISUALIZAR EL TRAFICO DEL SUPRESOR HCPRO DURANTE EL PROCESO DE TRANSMISION DE POTYVIRUS POR SUS VECTORES, Y ANALIZAR SU SIGNIFICADO FUNCIONAL, BiFC\viral suppressors\gene silencing\potyvirus\cucumovirus\protein-protein interactions\vector transmission