ESTUDIO Y DETERMINACION DE MARCADORES DE CONGELABILIDAD EN SEMEN PORCINO
EL PROYECTO QUE SE PRESENTA EN ESTA CONVOCATORIA FUE PRESENTADO, EL AÑO PASADO, EN LA CONVOCATORIA DE AYUDAS A PROYECTOS DE INVESTIGACION FUNDAMENTAL NO ORIENTADA CON EL MISMO TITULO Y CON LA REFERENCIA AGL2008-00608/GAN, DICHO PR...
EL PROYECTO QUE SE PRESENTA EN ESTA CONVOCATORIA FUE PRESENTADO, EL AÑO PASADO, EN LA CONVOCATORIA DE AYUDAS A PROYECTOS DE INVESTIGACION FUNDAMENTAL NO ORIENTADA CON EL MISMO TITULO Y CON LA REFERENCIA AGL2008-00608/GAN, DICHO PROYECTO FUE EVALUADO POSITIVAMENTE, ALCANZANDO UNA CALIFICACION C PERO NO ALCANZO LA PRIORIDAD SUFICIENTE PARA OBTENER FINANCIACION, EL PROYECTO QUE SE PRESENTA EN ESTA CONVOCATORIA, ES EL MISMO PROYECTO QUE SE PRESENTO EN LA CONVOCATORIA ANTERIOR PERO MODIFICADO, EN EL SENTIDO, QUE HAN SIDO SUBSANADOS TODOS AQUELLOS ASPECTOS MAS CRITICOS DESCRITOS EN EL INFORME DE EVALUACION DEL PROYECTO AGL2008-00608/GAN Y MEJORADO ATENDIENDO A LAS OBSERVACIONES REALIZADAS POR LOS EVALUADORES Y LA COMISION DE EXPERTOS,LA CRIOPRESERVACION ESPERMATICA EN PORCINO OFRECE MULTIPLES VENTAJAS PARA EL SECTOR: FACILITA LA IMPORTACION Y EXPORTACION, PERMITE LA CREACION DE BANCOS DE GERMOPLASMA Y MEJORA LA GESTION Y PLANIFICACION DE LOS CENTROS DE INSEMINACION ARTIFICIAL, SIN EMBARGO, EL SEMEN DESCONGELADO DE PORCINO PRESENTA UNOS VALORES DE CALIDAD ESPERMATICA Y DE FERTILIDAD IN VIVO MUY VARIABLES, THURSTON Y COL, (2002) DEMOSTRARON QUE LA CAPACIDAD DEL SEMEN PORCINO DE RESISTIR EL PROCESO DE CONGELACION / DESCONGELACION ES UNA CARACTERISTICA HEREDABLE, PUDIENDO DISTINGUIR ENTRE VERRACOS ¿BUENOS Y MALOS¿ CONGELADORES DE SEMEN, LA ESCASA RESISTENCIA DEL SEMEN PORCINO A LA CRIOPRESERVACION SE DEBE A LA CARACTERISTICA COMPOSICION DE LA MEMBRANA PLASMATICA DE SUS ESPERMATOZOIDES, POBRE EN COLESTEROL Y RICA EN FOSFOLIPIDOS INSATURADOS, EL ENFRIAMIENTO Y LA CONGELACION ALTERAN LA PERMEABILIDAD Y LA FLUIDEZ DE MEMBRANA Y CON ELLA LA DINAMICA Y COMPOSICION PROTEINICA DE RECEPTORES, TRANSPORTADORES, ETC, LA PERDIDA DE CALIDAD DEL SEMEN DESCONGELADO DEPENDE DE LAS DISFUNCIONES QUE EXPERIMENTA LA MEMBRANA PLASMATICA DE LOS ESPERMATOZOIDES, A SU VEZ, RELACIONADAS CON LA COMPOSICION DE LA MISMA, DICHA COMPOSICION DEBERIA SER DISTINTA ENTRE VERRACOS ¿BUENOS Y MALOS CONGELADORES DE SEMEN¿, EN ESTE PROYECTO NOS PROPONEMOS ANALIZAR LAS DIFERENCIAS ENTRE VERRACOS ¿BUENOS Y MALOS CONGELADORES¿, EN RELACION A LA PRESENCIA, DENSIDAD Y DISTRIBUCION DE 12 MARCADORES / INDICADORES: COLESTEROL, GLUT-3, HSP90AA1, HSP60, HSP70, SOD, PSP-I/II, CALPAIN, CITOCROMO C, BCL-2, BAX AND PLSCR1-4, DICHOS ANALISIS SE LLEVARAN A CABO, EN GENERAL, EN CUATRO ETAPAS DEL PROCESO DE CONGELACION / DESCONGELACION: EN SEMEN REFRIGERADO (17ºC), EN SEMEN ENFRIADO (5ºC) Y EN SEMEN DESCONGELADO A LOS 30 MINUTOS Y A LAS 4 HORAS, LA INMUNOLOCALIZACION DE LOS 12 MARCADORES / INDICADORES SE LLEVARA A CABO MEDIANTE LA APLICACION DE TECNICAS DE INMUNOMARCAJE CON ANTICUERPOS PRIMARIOS ESPECIFICOS Y CON ANTICUERPOS SECUNDARIOS QUE EMITAN FLUORESCENCIA EN BANDAS DISTINTAS QUE PERMITAN REALIZAR ESTUDIOS DE COLOCALIZACION DE DOS O MAS MARCADORES / INDICADORES, LOS ESTUDIOS DE PRESENCIA, LOCALIZACION Y DISTRIBUCION DE DICHOS MARCADORES / INDICADORES SE LLEVARA A CABO MEDIANTE MICROSCOPIA OPTICA DE FLUORESCENCIA Y, SALVO CON EL COLESTEROL, TAMBIEN MEDIANTE CITOMETRIA DE FLUJO, EN AMBOS GRUPOS DE VERRACOS (BUENOS Y MALOS CONGELADORES), SE ANALIZARA LA CALIDAD ESPERMATICA Y LA FERTILIDAD IN VIVO, A PARTIR DE SEMEN REFRIGERADO Y DESCONGELADO, EL OBJETIVO PRINCIPAL QUE SE PERSIGUE ES DISPONER DE UN INDICADOR DE CONGELABILIDAD, RESULTANTE DE LA DETECCION DE UN MARCADOR O DE LA COMBINACION DE VARIOS QUE NOS PERMITA, A PRIORI (ANTES DE PROCEDER A LA CONGELACION), ESTABLECER LA CONGELABILIDAD DE UN EYAC CRIOPRESERVACION\SEMEN\VERRACO\MARCADORES MOLECULARES\REPRODUCCIONver más
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