Descripción del proyecto
LOS BANCOS DE GERMOPLASMA CONSTITUYEN HERRAMIENTAS FUNDAMENTALES EN LA GESTION DE POBLACIONES ANIMALES, QUE ADQUIEREN ESPECIAL RELEVANCIA EN EL CASO DE ESPECIES/RAZAS/POBLACIONES AMENAZADAS DE EXTINCION COMO EL OSO PARDO DE LAS MONTAÑAS CANTABRICAS, QUE PODRIA BENEFICIARSE DEL USO DE UN BANCO DE RECURSOS GENETICOS EN SU PLAN DE PROTECCION Y CONSERVACION, LA BIOTECNOLOGIA DE LA REPRODUCCION BASADA EN EL SORTING PERMITE MEJORAR LA CALIDAD DE LOS ESPERMATOZOIDES ALMACENADOS (SEPARACION PARA ENRIQUECIMIENTO EN Nº DE ESPERMATOZOIDES CON DETERMINADAS CARACTERISTICAS CELULARES ¿APOPTOSIS -, VIABILIDAD + ETC,) ASI COMO SU ESPECIFICIDAD (SEXAJE) O AMBAS, ESTE HECHO TIENE ESPECIAL IMPORTANCIA EN ESPECIES AMENAZADAS, DADO EL VALOR ESTRATEGICO, ESCASEZ Y CALIDAD DUDOSA (IMPOSIBLE ESTABLECER CRITERIOS RIGIDOS DE CONTROL DE CALIDAD INICIAL) DE LOS GAMETOS ALMACENADOS, EN ESTE AMBITO, SURGE LA PROBLEMATICA DE QUE LAS TECNICAS DE MEJORA REQUIEREN DE CENTROS DE REFERENCIA, CON ALTA CUALIFICACION TECNOLOGICA, QUE SON MUY ESCASOS Y CASI SIEMPRE ESTAN DISTANTES DEL PUNTO EN EL QUE SE OBTIENEN LAS MUESTRAS, EN CONSECUENCIA, LOS PROTOCOLOS DE CRIOPRESERVACION ESPERMATICA DEBEN DE SER REDEFINIDOS EN BASE A DOS ASPECTOS FUNDAMENTALES, POR UN LADO EL FACTOR TIEMPO: LAS TECNICAS DE MEJORA ESPERMATICA REQUIEREN UN PERIODO SUPLEMENTARIO EN LA SECUENCIA ESTANDAR DE CRIOPRESERVACION SEMINAL (TRANSPORTE A CENTROS DE REFERENCIA Y APLICACION BIOTECNOLOGICA), TENIENDO EN CUENTA QUE EL OBJETIVO ES CONSERVAR MEDIANTE CONGELACION LOS EYACULADOS ¿MEJORADOS¿, HAY QUE PROPONER ALTERNATIVAS A LOS PROTOCOLOS CLASICOS DE CONGELACION EN LOS QUE SE EMPLEAN INTERVALOS REDUCIDOS OBTENCION-CONGELACION (MAXIMO 3-4 HORAS), ASUMIENDO QUE DICHAS ALTERNATIVAS SUPONEN EN PRINCIPIO UNA DISMINUCION DE LA CALIDAD ESPERMATICA POSDESCONGELACION, POR OTRO LADO, LAS TECNICAS DE MEJORA BASADAS EN EL SORTING ESPERMATICO PLANTEAN ALGUNOS INCONVENIENTES ESPECIFICOS DERIVADOS DEL USO DE ALTAS TASAS DE DILUCION, EMPLEO DE ALTAS PRESIONES -SORTER-, USO DE FLUOROCROMOS NO TOTALMENTE INOCUOS, PROCEDIMIENTOS DE CENTRIFUGACION, ETC, EN ESTE PROYECTO, BASANDONOS EN LA METODOLOGIA DE CONGELACION ESPERMATICA DESARROLLADA POR ANEL ET AL, 2003 (THERIOG 60(7):1293-308) ADAPTADA ESPECIFICAMENTE AL SEMEN DE OSO PARDO POR NUESTRO GRUPO (CGL2007-63748/BOS), PROPONEMOS UN ESTUDIO SECUENCIAL SOBRE: 1º) LA VIABILIDAD DE DOS MODELOS DE CRIOPRESERVACION SEMINAL QUE PERMITAN UNA APLICACION DIFERIDA DE BIOTECNOLOGIA ESPERMATICA, EN CONCRETO LA CONGELACION DIFERIDA (CONGELAR TRAS REFRIGERACION A 5ºC DE HASTA 72 HORAS, LO QUE PERMITE TRANSPORTAR Y APLICAR LAS TECNICAS DE MEJORA SEMINAL EN PRECONGELACION) Y LA RECONGELACION (APLICACION DE DOS CICLOS DE CONGELACION ESPERMATICA ¿MEJORA SEMINAL APLICADA ENTRE AMBOS-); 2º) LA REPERCUSION QUE SOBRE LA CONGELABILIDAD ESPERMATICA, EN CONGELACION DIFERIDA Y RECONGELACION TIENEN DE FORMA AISLADA Y/O CONJUNTA UNA SERIE DE FACTORES ASOCIADOS AL EMPLEO DE TECNICAS DE SEPARACION ESPERMATICA (ALTA TASA DE DILUCION, FACTOR MECANICO DEL SORTING, USO DE FLUOROCROMOS) Y 3º) EL ESTABLECIMIENTO DE MEDIDAS CORRECTORAS QUE MEJOREN LA CALIDAD ESPERMATICA POSTDESCONGELACION: CONGELACION DIFERIDA (CON REFRIGERACION EN MEDIOS VISCOSOS, ANTIOXIDANTES Y ANAEROBIOSIS) RECONGELACION (CON ANTIOXIDANTES, VELOCIDAD DE CONGELACION, Y SELECCION DE GRADIENTES) Y CONDICIONES ASOCIADAS AL SORTING (CON ADICION DE PROTEINAS -PLASMA SEMINAL; EXOGENAS- Y ANTIOXIDANTES AL ELUYENTE EMPLEADO EN EL SORTING)